Clusters de ferro/enxofre são cofactores chave em proteínas envolvidas num grande número de processos celulares conservados, incluindo expressão genética, replicação e reparação do DNA, biogénese do ribossoma, modificação do tRNA, metabolismo central e respiração. As proteínas Fe/S podem desempenhar uma vasta gama de funções, desde a transferência de electrões à catálise redox e não redox. Em todos os organismos vivos, as proteínas Fe/S são sintetizadas pela primeira vez em uma forma apóstata. Contudo, como o grupo protético Fe/S é necessário para uma correcta dobragem e/ou estabilidade proteica, os clusters Fe/S são inseridos co-traduzidos ou imediatamente após a tradução por máquinas de montagem específicas. Estes sistemas têm sido extensivamente estudados na última década, tanto em procariotas como eucariotas. A presente revisão abrange os princípios básicos do sistema ISC de biogénese de Fe/S e os recentes avanços moleculares relacionados. Alguns dos mais recentes destaques relacionados a este sistema incluem a caracterização estrutural e funcional de complexos binários e ternários envolvidos na formação de clusters de Fe/S na IscU da proteína do andaime. Estes avanços aumentam a nossa compreensão do mecanismo de montagem de Fe/S cluster, revelando interações essenciais que nunca poderiam ser determinadas com proteínas isoladas e provavelmente estão mais próximas de uma situação in vivo. Muito menos se sabe atualmente sobre o mecanismo molecular da etapa de transferência de Fe/S, mas um breve relato das interações proteína-proteína envolvidas é dado. Este artigo é parte de um número especial intitulado: Proteínas Fe/S: Análise, estrutura, função, biogênese e doenças.