Los clústeres de hierro/azufre son cofactores clave en las proteínas implicadas en un gran número de procesos celulares conservados, incluyendo la expresión génica, la replicación y reparación del ADN, la biogénesis de los ribosomas, la modificación del ARNt, el metabolismo central y la respiración. Las proteínas Fe/S pueden desempeñar una amplia gama de funciones, desde la transferencia de electrones hasta la catálisis redox y no redox. En todos los organismos vivos, las proteínas Fe/S se sintetizan primero en una forma apo. Sin embargo, como el grupo prostético Fe/S es necesario para el correcto plegamiento y/o la estabilidad de la proteína, los grupos Fe/S se insertan de forma cotraduccional o inmediatamente después de la traducción mediante maquinarias de ensamblaje específicas. Estos sistemas se han estudiado ampliamente durante la última década, tanto en procariotas como en eucariotas. La presente revisión abarca los principios básicos del sistema ISC de biogénesis de Fe/S en bacterias y los recientes avances moleculares relacionados. Algunos de los aspectos más interesantes relacionados con este sistema son la caracterización estructural y funcional de los complejos binarios y ternarios implicados en la formación de los clústeres de Fe/S en la proteína andamio IscU. Estos avances mejoran nuestra comprensión del mecanismo de ensamblaje de los clústeres de Fe/S al revelar interacciones esenciales que nunca podrían determinarse con proteínas aisladas y que probablemente se acercan más a una situación in vivo. Actualmente se sabe mucho menos sobre el mecanismo molecular del paso de transferencia del Fe/S, pero se ofrece una breve descripción de las interacciones proteína-proteína implicadas. Este artículo forma parte de un número especial titulado Proteínas Fe/S: Análisis, estructura, función, biogénesis y enfermedades.