Abstract

Główną przeszkodą w produkcji białek rekombinowanych w Escherichia coli jest ich tendencja do gromadzenia się w postaci nierozpuszczalnych i biologicznie nieaktywnych agregatów znanych jako ciała wtrętowe. Chociaż czasami możliwe jest przekształcenie zagregowanego materiału w natywne, biologicznie aktywne białko, jest to przedsięwzięcie czasochłonne, pracochłonne, kosztowne i niepewne (1). W związku z tym, zastosowano wiele sztuczek w celu uniknięcia powstawania ciałek wtrętowych (2). Jednym z podejść, które jest obiecujące, jest wykorzystanie wrodzonej zdolności niektórych białek do zwiększania rozpuszczalności ich partnerów fuzyjnych. Chociaż początkowo sądzono, że praktycznie każde wysoce rozpuszczalne białko może funkcjonować jako ogólny czynnik solubilizujący, okazało się, że tak nie jest. W bezpośrednim porównaniu z S-transferazą glutationową (GST) i tioredoksyną, białko wiążące maltozę (MBP) było zdecydowanie lepsze w rozpuszczaniu różnorodnej kolekcji białek pasażerskich podatnych na agregację (3). Ponadto, niektóre z tych białek były w stanie złożyć się do ich biologicznie aktywnych konformacji, gdy były połączone z MBP. Nie jest całkowicie jasne, dlaczego MBP jest tak spektakularnym czynnikiem solubilizującym, ale istnieją pewne dowody sugerujące, że może on być w stanie funkcjonować jako ogólny chaperon molekularny w kontekście białka fuzyjnego poprzez tymczasowe sekwestrowanie podatnych na agregację pośrednich etapów fałdowania jego partnerów fuzyjnych i zapobieganie ich samoczynnej asocjacji (3, 4, 5, 6).

.

Articles

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.