Oletko kokeillut trikromivärjäystä?
Trikromivärjäys on yksi yleisimmin käytetyistä erikoisvärjäyksistä jokaisessa histologian laboratoriossa.
Sanan trikromi pedanttinen merkitys on ”kolmivärinen”, mikä viittaa siihen, miten tekniikka värjää kudosnäytteet eri tavoin kolmella värillä.
Termiä käytetään kuitenkin nykyään itse asiassa kuvaamaan mitä tahansa värjäysmenetelmää, jossa käytetään kahta tai useampaa eriväristä happoväriainetta värjäämään valikoivasti eri peruskudoskomponentteja.
Mitä trikromivärjäys värjää?
Tekniikassa käytetään kolmea väriainetta, joilla saadaan aikaan erilainen väritys eri kudostyypeille. Tyypillisesti niitä käytetään kollageenin osoittamiseen, usein vastakohtana sileälle lihakselle, mutta niitä voidaan käyttää myös korostamaan fibriiniä vastakohtana punasoluille. Niillä voidaan myös valikoivasti korostaa muita komponentteja.
| Kudostyyppi | Väri trikromivärjäyksellä |
| Kollageeni, luu | Vihreä-sininen |
| Lihas, fibriini, sytoplasma, | Punainen |
| Punaiset verisolut | Keltainen tai punainen |
| Ytimet | Tumma punamusta |
Kuka käyttää trikromivärjäystä?
Näitä värjäyksiä käytetään laajalti sekä tutkimus- että diagnostisiin tarkoituksiin. Esimerkiksi tutkijat, jotka tutkivat haavan paranemisen etenemistä tai arvioivat sitä nopeuttavien farmakologisten valmisteiden tehoa, tutkivat rutiininomaisesti trikromivärjättyjä kudosleikkeitä mitatakseen kollageenin laskeutumista.
Diagnostiikan laboratorioissa patologit käyttävät usein tätä värjäystä auttaakseen vastaamaan kysymyksiin, jotka voivat nousta esiin rutiininomaisesti hematoksyliini- ja eosiinivärjättyjen leikkeiden tutkimisen jälkeen. Erityisesti tätä värjäystä pyydetään rutiininomaisesti maksan sairauksien arvioimiseksi. Se voi olla erityisen arvokas tutkittaessa maksakirroosipotilaiden maksanäytteitä, jolloin se voi antaa hyödyllistä tietoa fibroosin asteesta ja siten sairauden vaiheesta ja etenemisestä.
Värjäyksen yleiset periaatteet
Menetelmän aikana kudosleikkeisiin levitetään Bouinin liuosta (peittausaine, joka kiinnittää väriaineita kudokseen) lopullisen värin voimistamiseksi. Ytimet värjätään rautahematoksyliinillä. Tämän jälkeen sytoplasma ja lihakset värjätään punaiseksi Biebrichin skarppihappofuchsiinilla. Sen jälkeen, kun kollageeni on käsitelty polyhapoilla fosfotungstiinihapolla (PTA) ja fosfomolybdeenihapolla (PMA), kollageeni värjätään aniliinisinistä (tai aniliinin vaaleanvihreää, joka värjää kollageenin vihreäksi) sisältävällä trikromisinisellä. Lopuksi leikkeet huuhdellaan värjäyksen jälkeen etikkahappoliuoksella, joka saa aikaan hienovaraisemman kudosvärin.
erilaisia trikromivärjäystekniikoita
On olemassa erilaisia trikromireseptejä, jotka kaikki ovat peräisin patologi Claude L. Pierre Massonin alkuperäisestä reseptistä 1900-luvun alusta. Saatavilla olevista erityyppisistä trikromivärjäyksistä nykyisin yleisimmin käytetyt ovat:
- Massonin trikromi: Tämä on monivaiheinen värjäystekniikka. Siinä käytetään polyhappoja PTA ja PMA. Kaikki peittaus- ja värjäysvaiheet (kuten edellä on kuvattu) suoritetaan erikseen.
- Gomorin trikromi: Tämä on yksivaiheinen menetelmä värjäystekniikka. Tässä menetelmässä ei käytetä polyhappoja, ja toisin kuin Massonin vastaavassa menetelmässä, siinä yhdistetään kaikki reagenssit yhdeksi liuokseksi (lukuun ottamatta ydinvärjäystä ja Bouinin peittausaineita), jota levitetään kudosleikkeisiin tietyksi ajaksi.
Mitä trikromimenetelmää käytetään yleisimmin laboratorioissanne?
Onko sinulla suosikkitrikromiresepti?
Onko tästä ollut apua? Jaa se sitten verkostollesi.