Har du prøvet trikrom?
Trikromfarvningen er en af de mest almindeligt anvendte specialfarvninger i alle histologiske laboratorier.
Den pedantiske betydning af ordet trikrom er “trefarvet”, hvilket henviser til, at teknikken farvelægger vævsprøver i tre farver på forskellig vis.
Derimod bruges udtrykket nu faktisk til at beskrive enhver farvningsmetode, der anvender to eller flere syrefarvestoffer i kontrasterende farver til selektiv farvning af forskellige basale vævskomponenter.
Hvad farves med trikrom?
Teknikken anvender tre farvestoffer til at frembringe forskellige farvninger af forskellige vævstyper. Typisk bruges de til at påvise kollagen, ofte i kontrast til glat muskel, men kan også bruges til at fremhæve fibrin i kontrast til røde blodlegemer. De kan også selektivt fremhæve andre komponenter.
| Vævstype | Farve med trikromfarve | |
| Kollagen, Knogle | Grøn-blå | |
| Muskel, Fibrin, Cytoplasma, | Rød | |
| Røde blodlegemer | Gul eller rød | |
| Nukleus | Mørk rød-sort |
Hvem bruger trikromfarve?
Disse farvestoffer anvendes i vid udstrækning til både forskning og diagnostiske formål. For eksempel vil forskere, der studerer udviklingen af sårheling eller evaluerer effektiviteten af farmakologiske produkter, der fremskynder den, rutinemæssigt undersøge trikromfarvede vævsafsnit for at måle kollagenaflejring.
I diagnostiske laboratorier bruger patologer ofte denne farvestof til at hjælpe med at besvare spørgsmål, der kan opstå efter undersøgelse af rutinemæssige hæmatoxylin- og eosinfarvede afsnit. Især anmodes der rutinemæssigt om denne farvning for at vurdere sygdomme i leveren. Den kan være særlig værdifuld ved undersøgelse af leverprøver fra patienter med skrumpelever, hvor den kan give nyttige oplysninger om graden af fibrose og dermed om sygdommens stadium og progression.
Generelle principper for farvningen
Under proceduren påføres Bouins opløsning (det “bejdsemiddel”, der fastholder farvestoffet til vævet) på vævsafsnit for at intensivere den endelige farve. Kerner farves med jernhæmatoxylin. Cytoplasma og muskler farves derefter rødt med Biebrich scarlet-syre fuchsin. Efter behandling med polyaciderne phosphotungstic acid (PTA) og phosphomolybdic acid (PMA) farves kollagen med trichrome blue, der indeholder anilinblåt (eller anilin light green, der farves grønt på kollagen). Endelig anvendes en eddikesyreopløsning til at skylle snittene efter farvningen, hvilket giver en mere delikat nuance af vævsfarve.
Differente teknikker til farvning af trichrome
Der findes forskellige opskrifter på trichrome, som alle stammer fra patologen Claude L. Pierre Massons oprindelige formulering fra begyndelsen af 1900-tallet. Af de forskellige typer af trichromfarvninger, der findes, er de mest almindeligt anvendte i dag:
- Massons trichrom: Dette er en farvningsteknik i flere trin. Den anvender polyaciderne PTA og PMA. Alle bejdsnings- og farvningstrin (som beskrevet ovenfor) udføres hver for sig.
- Gomori’s Trichrome: Dette er en metode til farvning i ét trin. Denne metode anvender ikke polyacider, og i modsætning til dens Masson-modstykke kombinerer den alle reagenser i en enkelt opløsning (bortset fra kernefarvningen og Bouins bejdsemiddel), som påføres vævsafsnit i et vist tidsrum.
Hvilken trichrome anvendes mest almindeligt i dine laboratorier?
Har du en yndlingsopskrift på trichrome?
Har dette hjulpet dig? Så del den venligst med dit netværk.