Abstract

Escherichia coli -bakteerissa tuotettavien rekombinanttiproteiinien tuotannon suurimpana esteenä on niiden taipumus kerääntyä liukenemattomiksi ja biologisesti inaktiivisiksi aggregaateiksi, joita kutsutaan inkluusiokappaleiksi. Vaikka joskus on mahdollista muuttaa aggregoitunut materiaali natiiviksi, biologisesti aktiiviseksi proteiiniksi, tämä on aikaa vievä, työläs, kallis ja epävarma yritys (1). Tämän vuoksi inkluusiokappaleiden muodostumista on pyritty välttämään monin keinoin (2). Yksi erittäin lupaava lähestymistapa on hyödyntää tiettyjen proteiinien luontaista kykyä parantaa fuusiokumppaneidensa liukoisuutta. Vaikka alun perin ajateltiin, että käytännössä mikä tahansa hyvin liukeneva proteiini voisi toimia yleisenä liukenevana aineena, tämä ei ole osoittautunut todeksi. Suorassa vertailussa glutationi-S-transferaasin (GST) ja tioredoksiinin kanssa maltoosia sitova proteiini (MBP) oli selvästi ylivoimainen liuottamaan erilaisia aggregaatiolle alttiita matkustajaproteiineja (3). Lisäksi jotkin näistä proteiineista pystyivät taittumaan biologisesti aktiiviseen muotoonsa, kun ne fuusioitiin MBP:hen. Ei ole täysin selvää, miksi MBP on niin vaikuttava solubilisoiva aine, mutta on olemassa viitteitä siitä, että se voi toimia yleisenä molekulaarisena chaperonina fuusioproteiinien yhteydessä sitomalla väliaikaisesti fuusiokumppaneidensa aggregaatiolle alttiita taittumisen välivaiheita ja estämällä niiden itsekohtaisen assosioitumisen (3, 4, 5, 6).

Articles

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.