Tässä tutkimuksessa käytetty kasviperäinen valmiste DJT valmistettiin GMP:n (hyvien tuotantokäytäntöjen) mukaisesti ja sen toimitti Sun Ten Pharmaceutical (Taiwan). Hanke rahoitettiin kokonaan CCMP:n toimesta DJT:n mahdollisen myrkyllisyyden tai haittavaikutusten havaitsemiseksi. DJT-erän toimittamisen lisäksi Sun Ten Pharmaceutical ei osallistunut mihinkään muuhun sponsorointiin, tutkimuksen suunnitteluun tai osallistujien seurantaan.
Yrttien valmistus
Kaikki DJT:n kasviperäiset komponentit valmistettiin suuressa tietokoneohjatussa kattilassa, jossa terapeuttista arvoa omaavat haihtuvat öljyt kerättiin talteen ja ruiskutettiin kaksikerroksiseen korkeatyhjiökuivauskammioon. Yrttien aktiiviset ainesosat muutettiin rakeisiksi yhdisteiksi, jotka olivat viisi kertaa väkevämpiä kuin raa’at yrtit. Nämä rakeistetut yhdisteet kuivattiin tyhjiössä alhaisissa lämpötiloissa ennen kuin ne siivilöitiin erilliseen steriiliin huoneeseen, jossa ne pullotettiin, merkittiin ja suljettiin. DJT:n aktiivisten ainesosien laadunvarmistukseen käytettiin HPLC (korkean suorituskyvyn nestekromatografia) -sormenjälkitutkimusta lopputuotteen sisältämien aineiden tunnistamiseksi. CCMP-säännösten edellyttämä uuttamisprosessi suoritettiin käyttämällä vettä AA-I:n poistamiseksi Asarum heteropoides -kasvin juurista, sillä se on nefrotoksinen aine, jota on lähinnä kasvien lehdissä ja/tai antenniosissa. Terveysministeriön elintarvike- ja lääkeaineanalyysitoimisto (Bureau of Food and Drug Analysis of the Department of Health) oli tehnyt ennen nykyistä tutkimusta nestekromatografia-tandem-massaspektrometriaa (LC/MS/MS) , joka on herkempi menetelmä, varmistaakseen, että AA-I:n pitoisuus ei ollut havaittavissa. Jokaisesta DJT-erästä testattiin myös E. coli, Salmonella (bakteerien määrä) ja raskasmetallit.
Henkilöiden rekrytointi
Tämä prospektiivinen seurantatutkimus koordinoitiin Kansallisesta Taiwanin yliopistosta, kun taas osallistujat rekrytoitiin kahdesta Pohjois-Taiwanissa sijaitsevasta tutkimusklinikasta: Taipein kaupunginsairaalan kiinalaisen lääketieteen osasto ja Yangmingin osasto. Tutkimukselle saatiin hyväksyntä Taiwanin perinteisen kiinalaisen lääketieteen yhteisöltä (Joint Institutional Review Board for Traditional Chinese Medicine of Taiwan) (JIRBTCM94-0426-01). Kaikki osallistujat antoivat allekirjoitetun ja tietoon perustuvan suostumuksen ennen tutkimukseen osallistumista.
Sisäänottokriteerit
Osallistujat rekrytoitiin sanomalehti-ilmoitusten ja klinikoilla ja terveysmessuilla huhtikuun ja lokakuun 2005 välisenä aikana julkaistujen lentolehtisten avulla. Polven nivelrikon tila varmistettiin röntgenkuvauksella (lieviä tai keskivaikeita osteofyyttejä ja/tai nivelvälin kaventumista). Osallistujat olivat vähintään 18-vuotiaita, joilla oli oireinen nivelrikko vähintään toisessa polvessa ja jotka olivat hakeneet lääkärin apua tutkimusta edeltävien kahden viikon aikana. Osallistujat eivät olleet osallistuneet muihin lääketieteellisiin tutkimuksiin kolme kuukautta ennen tutkimusta. Osallistujien oli lopetettava kaikkien nykyisten lääkkeiden käyttö, mukaan lukien kaikki tavanomaiset tai kasviperäiset niveltulehdukseen tarkoitetut valmisteet, vähintään kaksi viikkoa ennen tutkimuksen ensimmäistä seulontatutkimusta.
Sulkemiskriteerit
reumaattinen, tulehduksellinen tai muunlainen niveltulehdus; artroskopia tai nivelensisäiset kortikosteroidi-/hyaluronihappoinjektiot edellisen kuukauden aikana; merkkejä munuaisten tai maksan toimintahäiriöistä, jotka on määritetty vähintään 1:llä tasolla.5-kertainen ylempi viitearvo ; hallitsematon verenpainetauti; diabetes mellitus; tai merkkejä syövästä.
Tutkimuksen rakenne ja kulku
Kaikki tutkimukseen osallistuneet sairaanhoitajat osallistuivat standardoituun koulutustilaisuuteen johdonmukaisuuden varmistamiseksi ja GCP:n (hyvän kliinisen käytännön) vaatimusten täyttämiseksi tutkimusprotokollassa. Osallistujien kelpoisuus arvioitiin kahden ensimmäisen klinikkakäynnin aikana. Ensimmäisen seulontakäynnin jälkeen osallistujat siirtyivät sisäänajovaiheeseen, jossa määritettiin perustiedot heidän oireistaan ja elämänlaadustaan; jokaiselle osallistujalle tehtiin myös terveystarkastus, johon sisältyi täydellinen verenkuva ja biokemialliset toimintakokeet. Nämä tiedot kerättiin, jotta voitiin varmistaa kunkin osallistujan kelpoisuuskriteerit ja seuloa pois vastaajat, joilla saattoi olla huono vaatimustenmukaisuus. Käyttöönottovaiheen jälkeen jokaiselle osallistujalle annettiin riittävästi DJT:tä hoidon aloittamiseksi annoksella 2,5 g kahdesti vuorokaudessa.
Seuraavat tutkimuskäynnit ajoitettiin ensimmäiselle, toiselle ja neljännelle viikolle, ja kullakin käyntikerralla arvioitiin mahdolliset polven oireet ja haittavaikutukset. Tutkimuksen lopussa osallistujille tehtiin vielä lääkärintarkastus, johon sisältyi myös verikokeita. Osallistujiin otettiin yhteyttä puhelimitse yhdestä kahteen päivää ennen kutakin käyntiä, jotta osallistujia kannustettaisiin noudattamaan sääntöjä. Koko tutkimusjakson ajan laskettiin jäljelle jääneet pakkaukset, jotta voitiin seurata kunkin osallistujan noudattamista. Myös ei-steroidisten tulehduskipulääkkeiden (NSAID-lääkkeiden) käyttö kirjattiin jokaisella käyntikerralla.
Tehokkuus / siedettävyys
Ensisijaiset tulosparametrit, joita arvioitiin ennen neljän viikon interventiota ja sen aikana, olivat kipu, jäykkyys ja fyysisen toimintakyvyn osa-asteikot sekä kipua koskeva kokonaisarviointi, jossa käytettiin 100 mm:n visuaalista analogia-asteikkoa Western Ontarion ja McMasterin yliopistojen nivelrikkoindeksin (Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis index, jäljempänä ”WOMAC” -indeksi) avulla. Ostimme kiinankielisen WOMAC-lomakkeen suoraan kirjoittajalta . Elämänlaadun muutoksia arvioitiin myös käyttämällä Maailman terveysjärjestön elämänlaatukyselylomaketta – Taiwanin lyhyt versio (WHOQOL-BREF) . Kunkin tutkittavan fyysinen konstituutio luokiteltiin myös mallien tunnistamiseen tarkoitetulla kyselylomakkeella eli kiinalaisessa lääketieteellisessä terminologiassa ”bian zheng” -lomakkeella, joka perustui Zhongyao Xinyao Linchuang Yanjiu Zhidao Yuanze -julkaisussa (Uusia kiinalaisia lääkkeitä koskevan kliinisen tutkimuksen suuntaviivat) suositeltuihin kriteereihin. Kyselylomake koostui seuraavista luokista: kivun esiintymistiheys, kylmän vastenmielisyys sekä alaselän ja polvien velttous (kutakin arvioitiin asteikolla ”satunnaisesti tai harvemmin”, ”usein” tai ”niin usein, että se haittaa työskentelyä”) ja jäykkyyden kesto (”alle tunti” tai ”yli tunti”).
WOMAC-indeksi on moniulotteinen, tautispesifinen, itseraportoitava terveydentilamittari. Sillä kartoitetaan kliinisesti tärkeitä, potilaan kannalta merkityksellisiä oireita kivun, jäykkyyden ja fyysisen toimintakyvyn alueilla potilailla, joilla on polven nivelrikko. Mittarissa on 24 kysymystä (viisi kysymystä kivusta, kaksi kysymystä jäykkyydestä ja 17 kysymystä fyysisestä toimintakyvystä), ja se voidaan täyttää alle viidessä minuutissa. Painotukset otettiin käyttöön, jotta viisi kipua koskevaa kysymystä voidaan laskea yhteen kokonaispistemääräksi, joka mittaa pääasiassa polven kivun vakavuutta eri päivittäisissä toiminnoissa. WOMAC-mittarin VAS-versio on pätevä, luotettava ja riittävän herkkä havaitsemaan kliinisesti merkittävät muutokset terveydentilassa erilaisten toimenpiteiden jälkeen. WHOQOL-BREF-mittarin taiwanilaisessa versiossa on neljä osa-aluetta (fyysinen, psyykkinen, sosiaalinen ja ympäristöön liittyvä), joihin kuuluu 24 osa-aluetta, sekä kaksi kansallista kysymystä, jotka koskevat yleistä elämänlaatua ja yleistä terveydentilaa, ja korkeammat pistemäärät kertovat paremmasta elämänlaadusta.
Turvallisuuden arviointi
Rutiininomaiset hematologiset ja biokemialliset tiedot kerättiin lähtötilanteessa ja viikolla 4, mukaan lukien täydellinen verenkuva ja verihiutaleet, seerumin kreatiniini-, BUN-, AST-, ALT-, albumiini/globuliini (A/G) -arvot, virtsahappoarvot sekä virtsan N-asetyyli-β-D-glukosaminidaasi- ja retinolia sitovan proteiinin arvot. Tutkimushoitaja seurasi myös aktiivisesti mahdollisia haittatapahtumia ja kirjasi ylös kaikki odottamattomat merkit, oireet tai tuntemukset tutkimusjakson aikana.
Tilastollinen analyysi
Analyysissämme keskityttiin pääasiassa muutoksiin WOMAC-arvioinnin kolmen osa-alueen konstruktiossa (kipu, jäykkyys ja fyysinen toimintakyky) yhdessä WHOQOL-mittareiden kanssa. Hoidon vaikutukset kuvattiin osallistujien keskimääräisten erojen muutoksina kullakin käyntikerralla viikoilla 1, 2 ja 4 ja lähtötilanteessa mitattujen pistemäärien välillä. Kivun, jäykkyyden ja fyysisen toimintakyvyn alaskaalojen, VAS-kivun ja WHOQOL-BREF-alueiden eriytyneiden pistemäärien vastemuuttujille muodostettiin erilliset lineaariset regressiomallit.
Lopullisessa regressiomallissa selittäviä muuttujia olivat sukupuoli, ikä, nivelrikon vaikeusaste lähtötilanteessa, iän ja sukupuolen yhteisvaikutus, painoindeksi (kiloina neliömetrissä), kylmää kohtaan tuntema vastenmielisyys, selän alaselän ja polvien lonksuvuus sekä tulehduskipulääkkeiden (NSAID:ien) pelastuslääkevalmisteiden käyttö. Regressiomalliin sisällytettiin myös kaksi indikaattorimuuttujaa viikkojen 2 ja 4 käyntejä varten, jotta voitiin tarkastella paranemista kolmen käyntikerran aikana. Näiden kahden indikaattorimuuttujan kertoimet kuvaavat viikkojen 2 ja 4 käyntien mitattujen pisteiden keskiarvojen eroja verrattuna viikon 1 käynteihin. Virhetermien oletettiin korreloivan kunkin osallistujan kolmen toistetun mittauksen välillä. Lopuksi kutakin yksittäistä WOMAC-pistemäärää tarkasteltiin myös erikseen, jotta voitaisiin tunnistaa kaikki WOMAC-pistemäärät, jotka ovat herkkiä DJT-hoidolle. Kertoimien estimaatit ja estimaattien keskivirheet moninkertaisissa regressiomalleissa, joissa virhetermit olivat korreloituneet, saatiin käyttämällä ilmaisen tilasto-ohjelmiston R-versiossa 2.1.1 .
olevan nlme-paketin version 3.1-60 yleistetyn pienimmän neliösumman toimintoa.