Em muitos casos o uso de material radiolabelado (PAIRA-Pure Active Ingredient, Radiolabelled) é considerado obrigatório e a escolha do radiolabel é normalmente o isótopo carbono-14. Em alguns casos o trítio pode ser usado, mas seu uso é desencorajado, ou mesmo proibido, pois a troca hidrogênio-tritio pode ocorrer tornando a interpretação dos dados difícil.
Razões para escolher o carbono-14
- 14C é o isótopo regulador de escolha
- Tem uma longa metade…vida – não é necessário corrigir a decomposição em estudos prolongados
- Posição(ões) de etiqueta(s) definida(s) na estrutura central da molécula
- Compostos podem ser preparados usando síntese personalizada
- Provê um método de detecção altamente sensível que é Quantitativo & Qualitativo
- Permite que o destino dos pais e metabolitos seja seguido e caminhos elucidados
- Controlos de qualidade críticos incluindo BPL apoiam o seu uso em estudos regulatórios
Exemplos de orientação que realçam a natureza do radiolabel e do carbono…14 especificamente:
Radio-rotulagem deve ser posicionada em locais (um ou mais conforme necessário), para facilitar a elucidação das vias metabólicas e de transformação e para facilitar a investigação da distribuição da substância activa e dos seus metabolitos, produtos de reacção e de degradação (EU 283/2013).
Dados sobre metabolismo juntamente com um diagrama esquemático das vias metabólicas em plantas e animais são necessários e estes estudos devem ser conduzidos com uma ou mais formas rádio-rotuladas da substância ativa e, quando relevante, formas estereoisômeros da substância ativa e seus metabólitos (EU 283/2013).
Radiolabéis são necessários para permitir a quantificação do total de resíduos extraíveis e não-extraíveis e 14C é o isótopo preferido para estudos de resíduos (OECD 501).
14C material rotulado é um pré-requisito para alguns estudos (OECD 304A).
O átomo 14C deve estar na porção mais recalcitrante da molécula (OECD 314)
Se o composto tiver estruturas em forma de anel, então conduza experimentos separadamente em cada anel com não mais que uma estrutura em forma de anel rotulado em cada experimento (OCSPP 850 170 & 1730).
Estudos separados que reflitam a etiquetagem de cada anel serão normalmente necessários (OECD 502) se ocorrer a clivagem da molécula – além do radiolabel, é encorajado o uso de isótopos estáveis.
O radiolabel pode ser preferido para estudos em estrume, onde o anel fenil U-14C é especialmente preferido, já que os voláteis 14C CO2 e 14C como o 14CH4 devem ser aprisionados (EMA/CVMP 2009/430327).
14C deve ser usado para todo o balanço de massa e identificação de metabolitos, a menos que a sensibilidade da especificidade analítica seja pelo menos tão boa quanto a sensibilidade do radiolabel e forneça o balanço de massa adequado e a informação de identificação do metanol. O rótulo deve estar na porção central da molécula e a rotulagem múltipla pode ser necessária para seguir o destino metabólico (OCDE 417).
O uso de um Radiolabel pode ser opcional, mas é preferível, por exemplo, em estudos de bioacumulação, pois pode facilitar a análise (OCDE 305, OCDE 315 & 317).
Trítio é frequentemente fortemente desencorajado (OPPTS 860.1300), para não ser usado (SANCO/11187/2013) ou proibido (OECD 507).
14C é recomendado em alguns testes (OECD 309).