Preparat ziołowy DJT użyty w tym badaniu został przygotowany zgodnie z GMP (Good Manufacturing Practices) i dostarczony przez Sun Ten Pharmaceutical (Tajwan). Projekt został w całości sfinansowany przez CCMP w celu wykrycia potencjalnej toksyczności lub działań niepożądanych DJT. Poza dostarczeniem partii DJT, firma Sun Ten Pharmaceutical nie była zaangażowana w żaden inny sponsoring, projekt badania lub monitorowanie uczestników.
Przygotowanie ziół
Wszystkie składniki ziołowe DJT zostały przygotowane w dużym, sterowanym komputerowo kotle, gdzie lotne olejki o wartościach terapeutycznych zostały zebrane i rozpylone do dwupiętrowej komory suszenia próżniowego. Aktywne składniki ziół zostały przekształcone w granulowane związki pięciokrotnie bardziej skoncentrowane niż surowe zioła. Te granulowane związki były następnie suszone próżniowo w niskich temperaturach, zanim zostały przesączone do oddzielnego sterylnego pomieszczenia, gdzie zostały zabutelkowane, oznakowane i zapieczętowane. W celu zapewnienia jakości aktywnych składników DJT, zastosowano metodę HPLC (wysokosprawna chromatografia cieczowa) fingerprinting, aby zidentyfikować substancje w produkcie końcowym. Przeprowadzono proces ekstrakcji wymagany przez przepisy CCMP, polegający na użyciu wody w celu wyeliminowania AA-I z korzeni Asarum heteropoides, substancji nefrotoksycznej zawartej głównie w liściach i/lub nadziemnych częściach roślin. Chromatografia cieczowa – tandemowa spektrometria mas (LC/MS/MS), bardziej czuła metoda, została przeprowadzona przez Biuro Analiz Żywności i Leków Departamentu Zdrowia przed obecnym badaniem, aby zapewnić, że AA-I był na niewykrywalnym poziomie. Każda partia DJT była również badana pod kątem E. coli, Salmonelli (liczba bakterii) i metali ciężkich.
Rekrutacja badanych
To prospektywne badanie kontynuacyjne było koordynowane z National Taiwan University, podczas gdy uczestnicy byli zapisywani przez dwie kliniki badawcze w północnym Tajwanie: Oddział Medycyny Chińskiej i Oddział Yangming Szpitala Miejskiego w Taipei. Zatwierdzenie badania uzyskano od Joint Institutional Review Board for Traditional Chinese Medicine of Taiwan (JIRBTCM94-0426-01). Wszyscy uczestnicy dostarczyli podpisane i świadome zgody przed wzięciem udziału w badaniu.
Kryteria włączenia
Uczestników rekrutowano poprzez ogłoszenia w gazetach i ulotki wywieszone w klinikach i na targach zdrowia między kwietniem a październikiem 2005 roku. Stan choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego został potwierdzony radiograficznie (łagodne do umiarkowanych osteofity i/lub zwężenie przestrzeni stawowej). Zakwalifikowani uczestnicy byli w wieku co najmniej 18 lat z objawową chorobą zwyrodnieniową stawu kolanowego w co najmniej jednym kolanie i poszukiwali pomocy medycznej w okresie dwóch tygodni przed rozpoczęciem badania. Uczestnicy nie brali udziału w żadnych innych badaniach medycznych na trzy miesiące przed rozpoczęciem badania. Uczestnicy byli zobowiązani do zaprzestania stosowania jakichkolwiek aktualnych leków, w tym jakichkolwiek konwencjonalnych lub ziołowych produktów na zapalenie stawów, co najmniej dwa tygodnie przed wstępną kontrolą w ramach badania.
Kryteria wykluczenia
Reumatoidalne, zapalne lub jakiekolwiek inne zapalenie stawów; artroskopia lub wewnątrzstawowe wstrzyknięcia kortykosteroidów/kwasu hialuronowego w poprzednim miesiącu; jakiekolwiek dowody na zaburzenia czynności nerek lub wątroby określone przez poziom co najmniej 1.5-krotności górnej granicy referencyjnej; niekontrolowane nadciśnienie tętnicze; cukrzyca; lub jakiekolwiek oznaki nowotworu.
Projekt badania i procedura
Wszystkie pielęgniarki biorące udział w badaniu uczestniczyły w standaryzowanej sesji szkoleniowej w celu zapewnienia spójności i spełnienia wymagań GCP (Good Clinical Practices) w protokole badania. Kwalifikowalność uczestników oceniano podczas dwóch pierwszych wizyt w klinice. Po wstępnej wizycie przesiewowej uczestnicy weszli w fazę wstępną w celu określenia danych wyjściowych dotyczących objawów i jakości życia; każdy uczestnik przeszedł również ocenę stanu zdrowia, w tym pełną morfologię krwi i badania funkcji biochemicznych. Dane te zostały zebrane w celu zapewnienia kryteriów kwalifikujących każdego uczestnika oraz w celu odsiewu respondentów, którzy potencjalnie nie spełniali kryteriów. Po fazie wstępnej każdy uczestnik otrzymał wystarczającą ilość DJT, aby rozpocząć leczenie w dawce 2,5 g dwa razy na dobę.
Kolejne wizyty w ramach badania zaplanowano na pierwszy, drugi i czwarty tydzień, przy czym podczas każdej wizyty oceniano wszelkie objawy ze strony kolana oraz zdarzenia niepożądane. Pod koniec badania uczestnicy otrzymali kolejne badanie fizykalne, w tym badania krwi. Z uczestnikami kontaktowano się telefonicznie na jeden do dwóch dni przed każdą wizytą, aby zachęcić ich do dalszego przestrzegania zaleceń. Przez cały okres badania przeprowadzano liczenie resztek opakowań, aby monitorować przestrzeganie zaleceń przez każdego uczestnika. Podczas każdej wizyty odnotowywano również zużycie ratunkowych niesteroidowych leków przeciwzapalnych (NLPZ).
Skuteczność/Tolerancja
Pierwszorzędowymi parametrami ocenianymi przed i w trakcie czterotygodniowej interwencji były podskale bólu, sztywności i funkcjonowania fizycznego, wraz z globalną oceną bólu przy użyciu 100-mm „wizualnej skali analogowej” (VAS) z indeksu WOMAC (Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis). Formularz WOMAC w języku chińskim zakupiliśmy bezpośrednio od autora. Zmiany w jakości życia zostały również ocenione przy użyciu kwestionariusza World Health Organization Quality of Life – Taiwan brief version (WHOQOL-BREF). Konstytucja fizyczna każdego uczestnika została również skategoryzowana przy użyciu kwestionariusza do identyfikacji wzorca, lub „bian zheng” w chińskiej terminologii medycznej, w oparciu o kryteria zalecane w Zhongyao Xinyao Linchuang Yanjiu Zhidao Yuanze (The Guidelines for Clinical Research on New Chinese Medicines) . Kwestionariusz składał się z następujących kategorii: częstotliwość bólu, niechęć do zimna i wiotkość dolnej części pleców i kolan (z których każda była oceniana w kategoriach „sporadycznie lub mniej”, „często” lub „tak często, że przeszkadza w pracy”) oraz czas trwania sztywności („mniej niż jedna godzina” lub „więcej niż jedna godzina”).
Wskaźnik WOMAC jest wielowymiarową, specyficzną dla choroby, samoadministrowaną miarą stanu zdrowia. Sonduje on klinicznie ważne, istotne dla pacjenta objawy w zakresie bólu, sztywności i funkcji fizycznej u pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawu kolanowego. Narzędzie składa się z 24 pytań (pięć dotyczących bólu, dwa dotyczące sztywności i 17 dotyczące funkcjonowania fizycznego) i może być wypełnione w czasie krótszym niż pięć minut. Wprowadzono wagi w celu zsumowania pięciu pozycji dotyczących bólu jako całkowitego wyniku sumarycznego, który określa przede wszystkim nasilenie bólu kolana w różnych czynnościach dnia codziennego, przy czym ten sam proces przeprowadzono w odniesieniu do sztywności i funkcjonowania fizycznego. Wersja VAS kwestionariusza WOMAC jest ważna, wiarygodna i wystarczająco czuła do wykrywania klinicznie istotnych zmian w stanie zdrowia w następstwie różnych interwencji. Tajwańska wersja WHOQOL-BREF obejmuje cztery domeny (tj. fizyczną, psychologiczną, społeczną i środowiskową) zawierające 24 aspekty oraz dwie pozycje krajowe dotyczące ogólnej jakości życia (QOL) i ogólnego stanu zdrowia, przy czym wyższe wyniki wskazują na lepszą QOL.
Ocena bezpieczeństwa
Rutynowe dane hematologiczne i biochemiczne były zbierane na linii podstawowej i w tygodniu 4, w tym pełna morfologia krwi i płytki krwi, poziomy kreatyniny w surowicy, BUN, AST, ALT, albuminy/globuliny (A/G), kwas moczowy i poziomy moczu N-acetylo-β-D-glukozaminidazy i białka wiążącego retinol. Pielęgniarka badawcza również aktywnie monitorowała wszelkie zdarzenia niepożądane i rejestrowała wszelkie nieoczekiwane oznaki, objawy lub odczucia w okresie badania.
Analiza statystyczna
Nasza analiza koncentrowała się głównie na zmianach w trójdomenowym konstrukcie oceny WOMAC (ból, sztywność i funkcja fizyczna) wraz z miarami WHOQOL. Efekty leczenia opisywano jako zmiany średnich różnic między uczestnikami pomiędzy punktacją mierzoną podczas każdej wizyty w tygodniach 1, 2 i 4 oraz w punkcie wyjściowym. Odrębne modele regresji liniowej skonstruowano dla zmiennych odpowiedzi w postaci zróżnicowanej punktacji w podskalach bólu, sztywności i funkcjonowania fizycznego, w domenach VAS-ból i WHOQOL-BREF.
Zmiennymi objaśniającymi w ostatecznym modelu regresji były płeć, wiek, wyjściowe nasilenie choroby zwyrodnieniowej stawów, interakcja między wiekiem a płcią, BMI (w kg/m2), niechęć do zimna, wiotkość dolnej części pleców i kolan oraz stosowanie leków ratunkowych z grupy NLPZ. Aby zbadać poprawę na przestrzeni 3 wizyt, do modelu regresji włączono również dwie zmienne wskaźnikowe dla wizyt w tygodniu 2 i 4. Współczynniki tych dwóch zmiennych wskaźnikowych reprezentują różnice pomiędzy średnią wartością pomiaru punktacji dla wizyt w tygodniu 2 i 4 w stosunku do wizyt w tygodniu 1. Założono, że warunki błędu są skorelowane pomiędzy trzema powtarzanymi pomiarami u każdego uczestnika. Wreszcie, każda pojedyncza pozycja wyniku WOMAC była również badana oddzielnie, aby zidentyfikować jakiekolwiek pozycje WOMAC wrażliwe na leczenie przez DJT. Oszacowania współczynników i błędów standardowych oszacowań w modelach regresji wielokrotnej ze skorelowanymi warunkami błędu uzyskano za pomocą uogólnionej funkcji najmniejszych kwadratów pakietu nlme wersja 3.1-60 w bezpłatnym oprogramowaniu statystycznym R wersja 2.1.1 .
.