Dit project richt zich op de structuur en functie van de oligosaccharide groeperingen van de zona pellucida (mZP) van de muis en hoe deze extracellulaire glycocalyx die de eicel omringt interageert met complementaire moleculen op het oppervlak van spermatozoa. Eerdere aanwijzingen duiden er sterk op dat de bindende activiteit van mZP voor sperma verband houdt met het oligosaccharidegedeelte ervan. Recente studies in het laboratorium van de aanvrager hebben voor het eerst de aanwezigheid aangetoond van N-gekoppelde polylactosaminylglycanen en een O-gekoppelde trisaccharide waarvan wordt aangenomen dat zij een belangrijke rol spelen bij de herkenning en binding van sperma en eicellen. Om de bioactiviteit van deze oligosacchariden te beoordelen, heeft het voorstel vijf specifieke doelstellingen: (1) mZP2 en mZP3 te zuiveren, vervolgens de N-gekoppelde glycanen en het O-gekoppelde trisaccharide te klieven en van radiolabel te voorzien, (2) de functionele rol van de radioactief gelabelde N- en O-gekoppelde glycanen bij de herkenning en binding van sperma-eieren te beoordelen, (3) functionele N-gekoppelde glycanen te isoleren en chemisch te karakteriseren, (4) het O-gekoppelde trisaccharide te synthetiseren, de functie ervan te onderzoeken, en het mechanisme dat ten grondslag ligt aan de vorming van het sperma-oppervlakte antigeen-trisaccharide complex, en (5) de door de N-gekoppelde en/of O-gekoppelde glycanen herkende muissperma plasmamembraan (PM) eiwitten te identificeren en chemisch te karakteriseren. Wanneer deze studie voltooid is, zal dit het eerste gepubliceerde verslag zijn over de structuur-functie diversiteit van zowel N-gekoppelde als O-gekoppelde oligosacchariden. Nadat de complementaire moleculen (d.w.z. de bioactieve glycanen op ZP-glycoproteïnen en complementaire receptoren op sperma PM) zijn geïdentificeerd in de geselecteerde stam van experimentele muizen, zal het mogelijk zijn om de kwestie van interspecies en intraspecies relaties tijdens interacties van tegenovergestelde gameten te behandelen. Tezamen zullen deze studies ons begrip van het mechanisme van sperma-ei-interactie en bevruchting in de muis bevorderen, en zij zullen noodzakelijke informatie verschaffen voor de regulatie van de bevruchtingsprocessen in andere soorten, waaronder de mens.