Plioceen Tijdperk (5,3-1,8 mya)
De afkoeling en uitdroging die in het Mioceen tijdperk begon, zet zich voort in het Plioceen. Een verschuiving van de Caribische tektonische plaat naar het oosten creëert een landbrug die Noord-Amerika met Zuid-Amerika verbindt. Hierdoor kunnen landdieren zich vrij tussen de continenten bewegen en wordt de omringende oceaan in tweeën gedeeld — de Atlantische en de Stille Oceaan — waardoor het gescheiden zeeleven op verschillende evolutionaire paden wordt gezet.
Op de hogere breedtegraden ontwikkelen zich planten die koel weer verdragen. Winterharde planten die een kort groeiseizoen kunnen verdragen, zoals sedges, mossen en korstmossen, bewonen de bijna permanent bevroren toendra. In iets warmere streken bestaan taigabossen voornamelijk uit groenblijvers. Op lagere breedtegraden worden graslanden gekenmerkt door steeds minder bomen. Deze habitats bieden beperkte voedselbronnen voor dieren en ondersteunen minder diversiteit.
Tijdens het Plioceen evolueren mensachtige primaten in Oost-Afrika. Deze hominiden stammen af van boombewonende wezens en leven waarschijnlijk aan de rand van de bossen. Olifanten, paarden, runderen en andere grote herbivoren gedijen goed, waarschijnlijk omdat zij in staat zijn seizoensgebonden voedseltekorten te overleven en grovere vegetatie te verteren. Maar ze hebben te maken met woeste roofdieren, waaronder sabeltandkatten, honden die op roedels jagen en beren. Veel Plioceen dieren lijken op die van vandaag, maar sommige zijn aanzienlijk groter. Reusachtige gordeldieren (glyptodons) en grote luiaards (Megatherium) leven beide in Zuid-Amerika.