Abstract

En stor hindring for produktion af rekombinante proteiner i Escherichia coli er deres tendens til at ophobes i form af uopløselige og biologisk inaktive aggregater kendt som inklusionskroppe. Selv om det undertiden er muligt at omdanne aggregeret materiale til naturligt, biologisk aktivt protein, er dette en tidskrævende, arbejdskrævende, omkostningskrævende og usikker opgave (1). Derfor er der blevet anvendt mange tricks i et forsøg på at omgå dannelsen af inklusionskroppe (2). En tilgang, der er meget lovende, er at udnytte visse proteiners medfødte evne til at øge opløseligheden af deres fusionspartnere. Selv om man oprindeligt troede, at stort set alle meget opløselige proteiner kunne fungere som et generelt opløsningsmiddel, har dette ikke vist sig at være tilfældet. I en direkte sammenligning med glutathion S-transferase (GST) og thioredoxin var maltosebindende protein (MBP) klart overlegen med hensyn til at solubilisere en forskellig samling af aggregeringsvillige passagerproteiner (3). Desuden var nogle af disse proteiner i stand til at folde sig ind i deres biologisk aktive konformationer, når de blev fusioneret med MBP. Det er ikke helt klart, hvorfor MBP er et så spektakulært solubiliserende middel, men noget tyder på, at det kan fungere som en generel molekylær chaperon i forbindelse med et fusionsprotein ved midlertidigt at seponere aggregationsfremmende foldningsintermediater fra dets fusionspartnere og forhindre deres selvforening (3, 4, 5, 6).

Articles

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.