Sok esetben kötelezőnek tekintik a radioaktív anyag (PAIRA-Pure Active Ingredient, Radiolabelled) használatát, és a választott radioaktív anyag általában a szén-14 izotóp. Bizonyos esetekben tríciumot is lehet használni, de ennek használata nem javasolt, sőt, tilos, mivel hidrogén-trícium cserére kerülhet sor, ami megnehezíti az adatok értelmezését.
A szén-14 választásának okai
- A 14C a választott szabályozási izotóp
- Ez a hosszú fél- és…így nincs szükség a bomlás korrekciójára a hosszabb vizsgálatok során
- meghatározott jelölési pozíció(k) a molekula magszerkezetében
- A vegyületek testre szabott egyedi szintézissel állíthatók elő
- Nagyon érzékeny, kvantitatív kimutatási módszert biztosít. & Kvalitatív
- Elérhetővé teszi az alap- és metabolitok sorsának követését és az útvonalak megvilágítását
- Kritikus minőségi ellenőrzések, beleértve a GLP-t is, támogatják a hatósági vizsgálatokban való alkalmazását
Példák az útmutatóra, amely kiemeli a radiocímke és a szén-14 konkrétan:
A radiocímkéket olyan helyeken kell elhelyezni (szükség szerint egyet vagy többet), amelyek megkönnyítik a metabolikus és átalakulási utak felderítését, valamint a hatóanyag és metabolitjai, reakció- és bomlástermékei eloszlásának vizsgálatát (EU 283/2013).
A metabolizmusra vonatkozó adatok a növények és állatok metabolikus útvonalainak vázlatos ábrájával együtt szükségesek, és ezeket a vizsgálatokat a hatóanyag egy vagy több radioaktívan jelölt formájával, valamint adott esetben a hatóanyag és metabolitjai sztereoizomer formáival kell elvégezni (EU 283/2013).
A teljes kivonható és nem kivonható szermaradványok mennyiségi meghatározásának lehetővé tételéhez szükségesek a radioizotópok, és a 14C a szermaradványok vizsgálatához előnyben részesített izotóp (OECD 501).
A 14C-vel jelölt anyag előfeltétele egyes vizsgálatoknak (OECD 304A).
A 14C atomnak a molekula legvisszahúzódóbb részében kell lennie (OECD 314)
Ha a vegyület gyűrűs szerkezetű, akkor a kísérleteket minden gyűrűvel külön-külön kell elvégezni, és minden kísérletben legfeljebb egy gyűrűs szerkezetet szabad jelölni (OCSPP 850 170 & 1730).
A molekula hasadása esetén általában az egyes gyűrűk jelölését tükröző külön vizsgálatokra van szükség (OECD 502) – a radiocímkézés mellett a stabil izotópok használata is javasolt.
A radiocímkézés előnyben részesíthető a trágyában végzett vizsgálatoknál, ahol a fenilgyűrű U-14C különösen előnyös, mivel a 14C CO2-t és az olyan 14C illékony anyagokat, mint a 14CH4, csapdába kell ejteni (EMA/CVMP 2009/430327).
14C-t kell használni minden tömegmérleg és metabolit azonosításához, kivéve, ha az analitikai specifikusság érzékenysége legalább olyan jó, mint a radiocímkék érzékenysége, és megfelelő tömegmérleg- és metabolit-azonosítási információt nyújt. A jelölésnek a molekula magrészében kell lennie, és többszörös jelölés lehet szükséges a metabolikus sors követéséhez (OECD 417).
A radiocímke használata opcionális lehet, de előnyös például a bioakkumulációs vizsgálatokban, mivel megkönnyítheti az elemzést (OECD 305, OECD 315 & 317).
A tríciumtól gyakran erősen óva intenek (OPPTS 860.1300), nem szabad használni (SANCO/11187/2013) vagy tilos (OECD 507).
A 14C egyes vizsgálatoknál ajánlott (OECD 309).