A jelen vizsgálatban használt DJT gyógynövénykészítményt GMP (Good Manufacturing Practices) szerint állították elő, és a Sun Ten Pharmaceutical (Tajvan) biztosította. A projektet teljes egészében a CCMP finanszírozta a DJT esetleges toxicitásának vagy káros hatásainak kimutatására. A DJT gyártási tételének biztosításán kívül a Sun Ten Pharmaceutical nem vett részt semmilyen más szponzorálásban, a vizsgálat tervezésében vagy a résztvevők megfigyelésében.
A gyógynövények előállítása
A DJT összes növényi összetevőjét egy nagy, számítógép által vezérelt kazánban állították elő, ahol a terápiás értékű illóolajokat összegyűjtötték és egy kétszintes, nagy vákuumú szárítókamrába permetezték. A gyógynövények hatóanyagait a nyers gyógynövényeknél ötször koncentráltabb granulált vegyületekké alakították át. Ezeket a granulált vegyületeket ezután alacsony hőmérsékleten vákuumszárították, mielőtt egy külön steril helyiségbe szippantották, ahol palackozták, felcímkézték és lezárták őket. A DJT hatóanyagainak minőségbiztosítása érdekében HPLC (nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás) ujjlenyomat-vizsgálatot alkalmaztak a végtermékben lévő anyagok azonosítására. A CCMP-előírások által megkövetelt extrakciós eljárást végeztek, amely víz felhasználásával eltávolította az Asarum heteropoides gyökeréből az AA-I-t, amely nefrotoxikus anyagot főként a növények levelei és/vagy légi részei tartalmaznak. A folyadékkromatográfia-tandem tömegspektrometria (LC/MS/MS) , egy érzékenyebb módszer, amelyet az Egészségügyi Minisztérium Élelmiszer- és Gyógyszeranalitikai Hivatala a jelenlegi vizsgálatot megelőzően végzett el annak biztosítása érdekében, hogy az AA-I szintje ne legyen kimutatható. A DJT minden egyes tételét E. coli, Salmonella (baktériumszám) és nehézfémek szempontjából is megvizsgálták.
A vizsgálati személyek toborzása
Ezt a prospektív követéses vizsgálatot a Nemzeti Tajvani Egyetem koordinálta, míg a résztvevőket két észak-tajvani kutató klinikán keresztül vették fel: Taipei Városi Kórház Kínai Orvosi Kirendeltsége és Yangming Kirendeltsége. A vizsgálathoz a tajvani Hagyományos Kínai Orvoslás Közös Intézményi Felülvizsgálati Testületének jóváhagyását kaptuk (JIRBTCM94-0426-01). A vizsgálatban való részvétel előtt minden résztvevő aláírt és tájékozott beleegyezését adta.
Befogadási kritériumok
A résztvevőket újsághirdetések és a klinikákon és egészségügyi vásárokon 2005 áprilisa és októbere között kihelyezett szórólapok segítségével toborozták. A térd osteoarthritisének státuszát röntgenvizsgálattal igazolták (enyhe vagy közepes mértékű osteophyták és/vagy ízületi résszűkület). A jogosult résztvevők legalább 18 évesek voltak, legalább az egyik térdükben tüneteket mutató osteoarthritisben szenvedtek, és a vizsgálatot megelőző kéthetes időszakban orvosi segítséget kértek. A résztvevők a vizsgálatot megelőző három hónapban nem vettek részt semmilyen más orvosi vizsgálatban. A résztvevőknek legalább két héttel a vizsgálatra való első szűrővizsgálat előtt abba kellett hagyniuk minden jelenlegi gyógyszer szedését, beleértve az ízületi gyulladásra szánt hagyományos vagy növényi termékeket is.
Kizáró kritériumok
Rheumatoid, gyulladásos vagy bármilyen más típusú ízületi gyulladás; artroszkópia vagy ízületen belüli kortikoszteroid/hyaluronsav injekciók az előző hónapban; vese- vagy májműködési zavarra utaló jelek, amelyet legalább 1. szint határoz meg.A felső referenciahatár 5-szerese; nem kontrollált magas vérnyomás; cukorbetegség; vagy a rák bármely jele.
Vizsgálati terv és eljárás
A vizsgálatban részt vevő összes ápoló standardizált képzésen vett részt a következetesség biztosítása és a GCP (Good Clinical Practices) követelményeinek való megfelelés érdekében a vizsgálati protokollban. A résztvevők alkalmasságát a klinikán tett első két látogatás során értékelték. A kezdeti szűrővizsgálatot követően a résztvevők egy bevezető fázisba léptek, hogy meghatározzák a tüneteikre és az életminőségükre vonatkozó alapadatokat; minden résztvevő egészségügyi felmérésen is átesett, beleértve a teljes vérképet és a biokémiai funkcióvizsgálatokat. Ezeket az adatokat azért gyűjtötték, hogy biztosítsák az egyes résztvevőkre vonatkozó jogosultsági kritériumokat, és hogy kiszűrjék a potenciálisan rosszul teljesítő válaszadókat. A befutási fázist követően minden résztvevő elegendő DJT-t kapott a kezelés megkezdéséhez, napi kétszer 2,5 g-os adagban.
A további vizsgálati látogatásokat az első, második és negyedik hétre ütemezték, és minden egyes látogatás alkalmával értékelték a térd esetleges tüneteit és a nemkívánatos eseményeket. A vizsgálat végén a résztvevők további fizikális vizsgálaton vettek részt, beleértve a vérvizsgálatokat is. A résztvevőkkel minden egyes vizsgálat előtt egy-két nappal telefonon felvették a kapcsolatot, hogy ösztönözzék őket a további megfelelésre. A vizsgálati időszak alatt a résztvevők megfelelőségének nyomon követése érdekében a megmaradt csomagok számbavételére került sor. A nem-szteroid gyulladáscsökkentők (NSAID-ok) mentőgyógyszerek fogyasztását is feljegyezték minden egyes látogatás alkalmával.
Effektivitás/Tolerálhatóság
A négyhetes beavatkozás előtt és alatt értékelt elsődleges kimeneti paraméterek a fájdalom, a merevség és a fizikai működés alskálái voltak, valamint a globális fájdalom értékelése a Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis (WOMAC) index 100 mm-es “vizuális analóg skála” (VAS) segítségével. A WOMAC kínai nyelvű formanyomtatványát közvetlenül a szerzőtől vásároltuk . Az életminőség változását az Egészségügyi Világszervezet életminőségi kérdőívének tajvani rövid változatával (WHOQOL-BREF) is értékeltük . Az egyes alanyok fizikai állapotát a Zhongyao Xinyao Linchuang Yanjiu Zhidao Yuanze (Az új kínai gyógyszerekkel kapcsolatos klinikai kutatásokra vonatkozó iránymutatások) által ajánlott kritériumok alapján egy mintaazonosító kérdőív, vagy a kínai orvosi terminológiában “bian zheng” segítségével is kategorizáltuk. A kérdőív a következő kategóriákból állt: a fájdalom gyakorisága, a hideggel szembeni ellenszenv és a deréktáji és térdízületi petyhüdtség (mindegyiket az “alkalmanként vagy ritkábban”, “gyakran” vagy “olyan gyakran, hogy zavarja a munkát”), valamint a merevség időtartama (“kevesebb mint egy óra” vagy “több mint egy óra”).
A WOMAC-index egy többdimenziós, betegségspecifikus, önkitöltős, egészségi állapot mérőeszköz. A klinikailag fontos, a betegre vonatkozó tüneteket vizsgálja a fájdalom, a merevség és a fizikai funkció területén térdízületi artritiszben szenvedő betegeknél. Az eszköz 24 kérdésből áll (öt a fájdalomra, kettő a merevségre és 17 a fizikai funkciókra vonatkozóan), és kevesebb mint öt perc alatt kitölthető. Súlyozást vezettek be, hogy a fájdalomra vonatkozó öt elemet összeadják, és így egy teljes pontszámot kapjanak, amely elsősorban a térdfájdalom súlyosságát számszerűsíti a különböző napi tevékenységek során, és ugyanezt a folyamatot végezték el a merevség és a fizikai működés tekintetében is. A WOMAC VAS változata érvényes, megbízható és kellően érzékeny az egészségi állapot klinikailag fontos változásainak kimutatására különböző beavatkozásokat követően. A WHOQOL-BREF tajvani változata négy területet (azaz fizikai, pszichológiai, szociális és környezeti) foglal magában, amelyek 24 aspektust tartalmaznak, valamint két nemzeti elemet az általános életminőségre (QOL) és az általános egészségi állapotra vonatkozóan, ahol a magasabb pontszámok jobb életminőséget jeleznek.
Biztonsági értékelés
Rutin hematológiai és biokémiai adatokat gyűjtöttek a kezdeti és a 4. héten, beleértve a teljes vérképet és a vérlemezkéket, a szérum kreatinin, BUN, AST, ALT, albumin/globulin (A/G), húgysav és a vizelet N-acetil-β-D-glükozaminidáz és retinolkötő fehérje szintjét. Egy kutató ápoló emellett aktívan figyelemmel kísérte a nemkívánatos eseményeket, és feljegyzett minden váratlan jelet, tünetet vagy érzést a vizsgálati időszak alatt.
Statisztikai elemzés
Az elemzésünk elsősorban a WOMAC-értékelés három területre vonatkozó konstrukciójának (fájdalom, merevség és fizikai funkció) változásaira összpontosított a WHOQOL-mérésekkel együtt. A kezelés hatásait a résztvevők között az egyes látogatások során az 1., 2. és 4. héten, valamint a kiindulási szinten mért pontszámok közötti átlagos különbségek változásaként írtuk le. Külön lineáris regressziós modelleket alkottak a fájdalom, a merevség és a fizikai működés alskáláinak, a VAS-fájdalom és a WHOQOL-BREF tartományok differenciált pontszámainak válaszváltozóira.
A végső regressziós modellben a magyarázó változók a nem, az életkor, az osteoarthritis kiindulási súlyossága, az életkor és a nem közötti interakció, a BMI (kg/m2-ben), a hideggel szembeni ellenszenv, a hát és a térdek petyhüdtsége, valamint az NSAID mentőszerek használata voltak. Annak érdekében, hogy a 3 látogatás közötti javulást vizsgálhassuk, a 2. és 4. heti látogatásokra vonatkozó két indikátor változót is bevontuk a regressziós modellbe. A két indikátor változó együtthatói a 2. és 4. heti látogatásoknál mért pontszámok átlagértékének különbségét jelentik az 1. heti értékekhez képest. A hibatételekről feltételeztük, hogy korrelálnak az egyes résztvevőkön végzett három ismételt mérés között. Végül minden egyes WOMAC-pontszámelemet külön-külön is megvizsgáltunk, hogy azonosítsuk a DJT-kezelésre érzékeny WOMAC-elemeket. A korrelált hibatermekkel rendelkező többszörös regressziós modellekben az együtthatók és a becslések standard hibáinak becsléseit az nlme csomag 3.1-60-as verziójának általánosított legkisebb négyzetek funkciójával kaptuk az ingyenes R statisztikai szoftver 2.1.1.1 .
verziójában.