Abstract
Un obstacle majeur à la production de protéines recombinantes dans Escherichia coli est leur tendance à s’accumuler sous la forme d’agrégats insolubles et biologiquement inactifs connus sous le nom de corps d’inclusion. Bien qu’il soit parfois possible de convertir le matériel agrégé en protéine native biologiquement active, il s’agit d’une entreprise longue, laborieuse, coûteuse et incertaine (1). Par conséquent, de nombreuses astuces ont été employées pour tenter de contourner la formation de corps d’inclusion (2). Une approche très prometteuse consiste à exploiter la capacité innée de certaines protéines à augmenter la solubilité de leurs partenaires de fusion. Bien que l’on ait pensé à l’origine que pratiquement toute protéine hautement soluble pouvait servir d’agent solubilisant général, cela ne s’est pas avéré être le cas. Dans une comparaison directe avec la glutathion S-transférase (GST) et la thiorédoxine, la protéine de liaison au maltose (MBP) s’est avérée nettement supérieure pour solubiliser une collection diverse de protéines passagères sujettes à l’agrégation (3). De plus, certaines de ces protéines étaient capables de se replier dans leurs conformations biologiquement actives lorsqu’elles étaient fusionnées à la MBP. La raison pour laquelle la MBP est un agent de solubilisation si spectaculaire n’est pas entièrement claire, mais certaines preuves suggèrent qu’elle pourrait être capable de fonctionner comme un chaperon moléculaire général dans le contexte d’une protéine de fusion en séquestrant temporairement les intermédiaires de repliement sujets à l’agrégation de ses partenaires de fusion et en empêchant leur auto-association (3, 4, 5, 6).