Tässä hankkeessa keskitytään hiiren zona pellucidan (mZP) oligosakkaridien rakenteeseen ja toimintaan sekä siihen, miten tämä munasolua ympäröivä solunulkoinen glykokalyksi on vuorovaikutuksessa siemennesteen pinnalla olevien täydentävien molekyylien kanssa. Aiemmat todisteet viittaavat vahvasti siihen, että mZP:n siittiöitä sitova aktiivisuus liittyy sen oligosakkaridiosuuteen. Hakijan laboratoriossa hiljattain tehdyissä tutkimuksissa on ensimmäistä kertaa osoitettu N-sidoksisten polylaktosaminyyliglykaanien ja O-sidoksisen trisakkaridin esiintyminen, joilla uskotaan olevan tärkeä rooli siittiöiden ja munasolujen tunnistamisessa ja sitoutumisessa. Näiden oligosakkaridien bioaktiivisuuden arvioimiseksi ehdotuksella on viisi erityistavoitetta: (1) mZP2:n ja mZP3:n puhdistaminen ja sen jälkeen N-sidoksisten glykaanien ja O-sidoksisen trisakkaridin pilkkominen ja radiomerkitseminen, (2) radiomerkittyjen N-sidoksisten ja O-sidoksisten glykaanien funktionaalisen roolin arvioiminen siittiöiden ja munasolujen tunnistamisessa ja sitoutumisessa, (3) funktionaalisen N-sidoksisen glykaanin tai funktionaalisten N-sidoksisten glykaani(e)n eristäminen ja kemiallinen karakterisointi, (4) syntetisoida O-sidoksinen trisakkaridi, tutkia sen toimintaa ja siittiöiden pinta-antigeeni-trisakkaridikompleksin muodostumisen taustalla olevaa mekanismia ja (5) tunnistaa ja luonnehtia kemiallisesti hiiren siittiöiden plasmakalvoproteiinit (PM-proteiinit), jotka N-sidoksiset ja/tai O-sidoksiset glykaanit tunnistavat. Kun tämä tutkimus valmistuu, se on ensimmäinen julkaistu raportti sekä N- että O-sidonnaisten oligosakkaridien rakenne-toiminta-vaihtelusta. Kun toisiaan täydentävät molekyylit (eli ZP-glykoproteiinien bioaktiiviset glykaanit ja siittiöiden PM:n täydentävät reseptorit) on tunnistettu valitussa koehiirikannassa, on mahdollista käsitellä kysymystä lajien välisistä ja lajien sisäisistä suhteista vastakkaisten sukusolujen vuorovaikutuksen aikana. Yhdessä nämä tutkimukset lisäävät ymmärrystämme siittiöiden ja munasolujen vuorovaikutuksen ja hedelmöittymisen mekanismista hiirellä, ja ne antavat tarvittavaa tietoa hedelmöittymisprosessien säätelystä muilla lajeilla, myös ihmisillä.

Articles

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.