Nukleiinihapon sulamiskäyrä, jossa näkyy hypokromaattisuus lämpötilan funktiona

Valon absorption mittaaminen on tärkeää seurattaessa DNA:n sulamista ja annealingia. Sulamislämpötilassa (Tm) DNA on puoliksi denaturoitunut ja puoliksi kaksisäikeinen. Alentamalla lämpötilaa Tm:n alapuolelle denaturoituneet DNA-säikeet anneenoituvat takaisin kaksoissäikeiseksi DNA:ksi. Kun lämpötila on Tm:n yläpuolella, DNA on denaturoitunut.

Koska sulaminen tapahtuu lähes välittömästi tietyssä lämpötilassa, DNA:n absorbanssin seuraaminen eri lämpötiloissa osoittaisi sulamislämpötilan. Kun tiedemiehet pystyvät selvittämään lämpötilan, jossa DNA sulaa ja hehkuu, he pystyvät erottamaan DNA-juosteita ja hehkuttamaan niitä toisten DNA-juosteiden kanssa. Tämä on tärkeää luotaessa hybridi-DNA:ta, joka koostuu kahdesta eri lähteistä peräisin olevasta DNA-juosteesta. Koska DNA-juosteet voivat hehkuttaa vain, jos ne ovat samanlaisia, hybridi-DNA:n luominen voi osoittaa samankaltaisuuksia eri organismien genomien välillä.

Articles

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.