2-mikronsplasmidet i Saccharomyces cerevisiae är ett relativt litet multi-kopierat själviskt DNA-element som finns i jästens cellkärna med ett kopieringsantal på 40-60 per haploid cell. Plasmiden kan fortleva i värdpopulationer med nästan kromosomliknande stabilitet med hjälp av ett partitioneringssystem och ett system för kontroll av antalet kopior. I den första delen av artikeln beskrivs egenskaperna hos partitioneringssystemet som består av två plasmidkodade proteiner, Rep1 och Rep2, och en partitioneringslokus STB. Aktuella bevis stöder en modell där Rep-STB-systemet kopplar ihop plasmidseparation med kromosomseparation genom att främja den fysiska föreningen av plasmidmolekyler med kromosomer. I den andra delen ligger fokus på det platsspecifika rekombinationssystemet Flp som finns i plasmidet och som spelar en kritisk roll när det gäller att upprätthålla ett stabilt antal kopior av plasmidet. Flp-systemet korrigerar varje minskning av plasmidpopulationen genom att främja plasmidamplifiering via en rekombinationsinducerad rullcirkelreplikeringsmekanism. Lämplig plasmidamplifiering, utan att antalet kopior ökar i okontrollerad takt, säkerställs genom positiv och negativ reglering av FLP-genuttrycket genom plasmidkodade proteiner och genom kontroll av Flp-nivån/aktiviteten genom posttranslationell modifiering av Flp med hjälp av det cellulära sumoyleringssystemet. Flp-systemet har framgångsrikt använts för att förstå mekanismerna för platsspecifik rekombination och för att åstadkomma riktade genetiska förändringar för att lösa grundläggande problem inom biologin och för att uppnå biotekniska mål. En särskilt intressant, och kanske mindre välkänd och underskattad, tillämpning av Flp för att avslöja unika DNA-topologier som krävs för att ge funktionell kompetens till DNA-proteinmaskiner diskuteras.

Articles

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.