Nukleinsyres smeltekurve, der viser hyperkromicitet som en funktion af temperaturen

Måling af lysabsorption er vigtig ved overvågning af smeltning og annealing af DNA. Ved smeltetemperaturen (Tm) er DNA’et halvt denatureret og halvt dobbeltstrenget. Ved at sænke temperaturen til under Tm vil de denaturerede DNA-strenge annealisere tilbage til et dobbeltstrenget DNA. Når temperaturen er over Tm, er DNA’et denatureret.

Da smeltning sker næsten øjeblikkeligt ved en bestemt temperatur, vil en overvågning af DNA’ets absorbans ved forskellige temperaturer vise smeltetemperaturen. Ved at kunne finde den temperatur, ved hvilken DNA smeltede og annealerede, er forskerne i stand til at adskille DNA-strenge og anneale dem med andre DNA-strenge. Dette er vigtigt for at skabe hybrid-DNA’er, som består af to DNA-strenge fra forskellige kilder. Da DNA-strenge kun kan annealere, hvis de ligner hinanden, kan skabelsen af hybrid-DNA’er indikere ligheder mellem genomer fra forskellige organismer.

Articles

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.