Miniaturisering af HTS-assays (high-throughput screening) har været en bredt debatteret og undersøgt strategi med det formål at reducere screeningsomkostningerne og øge hastigheden, uden at det går ud over datakvaliteten. I den forbindelse forbedres væskehåndteringsteknologierne fortsat. En ny og lovende udvikling er fremkomsten af nanoliter-dispensere, som er i stand til at overføre forbindelser direkte til mikroplader til assays. I denne undersøgelse undersøgte vi miniaturiseringen af et HTS-kinaseassay og sammenlignede den reelle ydeevne af den nuværende avancerede luftforskydningsoverførselsteknologi (MiniTrak V System) og en kapillarbaseret nanolitredispenser (CyBi-HummingWell). Robustheden og effektiviteten af de miniaturiserede assayformater blev sammenlignet ved at teste staurosporin for at generere dosis-respons-kurver og 340 tidligere identificerede aktive forbindelser. Ved hjælp af MiniTrak-enheden blev der opnået en miniaturisering af assayet fra 18 mikroL til 6 mikroL i 384-well- og 1536-well-pladeformater. Ved hjælp af nanoliter-dispenseren blev miniaturiseringen udført ned til 5 mikroL i 1536-well-plader. De Z’-faktorer, der blev opnået for hvert analyseformat, var konsekvent over 0,5. De data, der præsenteres her, beskriver reproducerbarheden af de resultater, der er opnået med de to overførselsteknologier, og fremhæver mulige problemer i forbindelse med hitidentifikation.

Articles

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.