Abstract
Ein Haupthindernis für die Produktion rekombinanter Proteine in Escherichia coli ist ihre Tendenz, sich in Form von unlöslichen und biologisch inaktiven Aggregaten, den so genannten Einschlusskörpern, zu sammeln. Obwohl es manchmal möglich ist, aggregiertes Material in natives, biologisch aktives Protein umzuwandeln, ist dies ein zeitraubendes, arbeitsintensives, kostspieliges und unsicheres Unterfangen (1). Daher wurden viele Tricks angewandt, um die Bildung von Einschlusskörpern zu verhindern (2). Ein vielversprechender Ansatz ist die Ausnutzung der angeborenen Fähigkeit bestimmter Proteine, die Löslichkeit ihrer Fusionspartner zu verbessern. Obwohl man ursprünglich davon ausging, dass praktisch jedes gut lösliche Protein als allgemeines Lösungsvermittlungsmittel fungieren könnte, hat sich dies nicht bewahrheitet. In einem direkten Vergleich mit Glutathion-S-Transferase (GST) und Thioredoxin erwies sich das Maltose-bindende Protein (MBP) als deutlich überlegen bei der Solubilisierung einer Reihe von zur Aggregation neigenden Passagierproteinen (3). Darüber hinaus waren einige dieser Proteine in der Lage, sich in ihre biologisch aktiven Konformationen zu falten, wenn sie mit MBP fusioniert waren. Es ist nicht ganz klar, warum MBP ein so spektakuläres Solubilisierungsmittel ist, aber es gibt einige Hinweise darauf, dass es im Zusammenhang mit einem Fusionsprotein als allgemeines molekulares Chaperon fungieren kann, indem es aggregationsanfällige Faltungsintermediate seiner Fusionspartner vorübergehend sequestriert und ihre Selbstassoziation verhindert (3, 4, 5, 6).