Mikroskopisté: Zkoušeli jste trichrom?

Zkoušeli jste trichrom?“

Barvení trichromem je jedním z nejčastěji používaných speciálních barvení v každé histologické laboratoři.

Pedantický význam slova trichrom je „tříbarevný“, což odkazuje na to, že tato technika odlišně barví vzorky tkání třemi barvami.

V současnosti se však tento termín ve skutečnosti používá k označení jakékoli barvicí metody, která používá dvě nebo více kyselých barviv kontrastních barev k selektivnímu barvení různých základních složek tkáně.

Co barví trichrom?“

Tato technika používá tři barviva k vytvoření různého zbarvení různých typů tkání. Obvykle se používají k průkazu kolagenu, často v kontrastu s hladkou svalovinou, ale lze je použít i ke zvýraznění fibrinu v kontrastu s červenými krvinkami. Mohou také selektivně zvýraznit jiné složky.

Typ tkáně	Barvení pomocí barvení trichromem
Kolagen, kost	Zelenomodrá
Sval, fibrin, cytoplazma,	Červená
Červené krevní buňky	Žlutá nebo červená
Jádra	Tmavě červená-černá

Kdo používá barvení Trichrom?

Tato barviva se hojně využívají pro výzkumné i diagnostické účely. Například vědci, kteří studují průběh hojení ran nebo hodnotí účinnost farmakologických přípravků, které hojení urychlují, běžně zkoumají řezy tkání obarvené trichromem, aby změřili ukládání kolagenu.

V diagnostických laboratořích patologové často používají toto barvení, aby pomohli odpovědět na otázky, které mohou vyvstat po vyšetření rutinních řezů obarvených hematoxylinem a eozinem. Zejména je toto barvení rutinně vyžadováno při hodnocení onemocnění jater. Zvláště cenné může být při zkoumání vzorků jater od pacientů s cirhózou, kdy může poskytnout užitečné informace o stupni fibrózy, a tedy o stadiu a progresi jejich onemocnění.

Obecné principy barvení

Při postupu se na řezy tkáně aplikuje Bouinův roztok („mořidlo“, které přichytí barvivo na tkáň), aby se zintenzivnilo konečné zbarvení. Jádra se barví železitým hematoxylinem. Cytoplazma a svalovina se pak obarví červeně Biebrichovým fuchsinem na bázi kyseliny šarlatové. Po ošetření polykyselinami kyselinou fosfotungovou (PTA) a fosfomolybdovou (PMA) se kolagen barví trichromovou modří obsahující anilinovou modř (nebo anilinovou světle zelenou, která barví kolagen zeleně). Nakonec se k opláchnutí řezů po barvení používá roztok kyseliny octové, který vytváří jemnější odstín zbarvení tkáně.

Různé techniky barvení trichromem

Existují různé receptury barvení trichromem, které vznikly na základě původní formulace patologa Clauda L. Pierra Massona z počátku 20. století. Z různých typů dostupných barvení trichromem se dnes nejčastěji používají tyto:

• Massonův trichrom: Jedná se o vícestupňovou techniku barvení. Používá polykyseliny PTA a PMA. Všechny kroky moření a barvení (jak je popsáno výše) se provádějí jednotlivě.
• Gomoriho trichrom: Jedná se o techniku barvení v jednom kroku. Tato metoda nepoužívá polykyseliny a na rozdíl od svého Massonova protějšku kombinuje všechna činidla do jediného roztoku (kromě jaderného barviva a Bouinova mořidla), který se po určitou dobu aplikuje na tkáňové řezy.

Který trichrom se ve vašich laboratořích používá nejčastěji?

Máte nějaký oblíbený recept na trichrom

.