I 11 beta-hydroxylase 1 (CYP11B1)-mangel vil serumkoncentrationerne af kortisol være lave (normalt <7 mikrogram/dL ved en morgenudtagning). 11-deoxycortisol og 11-deoxycorticosteron er forhøjet, normalt til mindst 2-3 gange (mere typisk 20-300 gange) den øvre grænse af det normale referenceområde ved en blodprøve om morgenen. Forhøjelserne af 11-deoxycortisol er normalt relativt større end dem af 11-deoxycorticosteron på grund af tilstedeværelsen af intakt 11-beta-hydroxylase 2 (CYP11B2). Af denne grund er serumkoncentrationerne af alle potente mineralske kortikoider (kortikosteron, 18-hydroxykortikosteron og aldosteron) typisk forhøjet over det normale referenceområde. Plasma reninaktiviteten er tilsvarende lav eller helt undertrykt. Der skal udvises forsigtighed ved fortolkning af mineralkortikoidresultaterne hos spædbørn under 7 dage; mineralkortikoidniveauerne er ofte væsentligt forhøjede hos raske nyfødte i de første timer af livet og falder først til nær voksenniveauerne i uge 1.
Mildt tilfælde af CYP11B1-mangel kan kræve stimulationstestning for adrenokortikotrofisk hormon (ACTH)1-24 for at få en endelig diagnose. Hos berørte personer vil den observerede serumkoncentration af 11-deoxycortisol 60 minutter efter intravenøs eller intramuskulær indgift af 250 mikrogram ACTH1-24 normalt overstige 20 ng/mL eller vise mindst en 4-dobbelt stigning. Sådanne stigninger observeres sjældent, hvis overhovedet, hos ikke-ramte personer. Det tilsvarende kortisolrespons vil være afstumpet (<18 ng/mL peak).
I CYP11B2-mangel er serumkortisolkoncentrationerne normalt normale, herunder et normalt respons på ACTH1-24. 11-Deoxycorticosteron vil være forhøjet, ofte mere dybtgående end ved CYP11B1-mangel, mens 11-deoxycortisol måske eller måske ikke er væsentligt forhøjet. Serumkortikosteronkoncentrationerne kan være lave, normale eller let forhøjede, mens serumkoncentrationerne af 18-hydroxykortikosteron og aldosteron vil være lave i de fleste tilfælde. Hvis den underliggende genetiske defekt imidlertid har påvirket 18-hydroxylaseaktiviteten selektivt, vil kortikosteronkoncentrationerne være væsentligt forhøjede. Omvendt vil 18-hydroxycorticosteronkoncentrationerne være meget høje, hvis manglen primært påvirker aldosteronsyntasefunktionen.
Expression af CYP11B2-genet reguleres normalt af renin og ikke af ACTH. Ved glukokortikoidresponsiv hyperaldosteronisme udøver den ACTH-responsive promotor af CYP11B1 en afvigende kontrol over CYP11B2-genekspression. Som følge heraf er kortikosteron, 18-hydroxykortikosteron og aldosteron betydeligt forhøjet hos disse patienter, og deres niveauer følger et døgnmønster, der styres af rytmen for ACTH-sekretionen. Desuden fører de høje niveauer af CYP11B2 til 18-hydroxylering af 11-deoxycortisol (en begivenhed, der normalt er sjælden, da CYP11B1, som har meget større aktivitet i 11-deoxycortisolkonverteringen end CYP11B2, ikke har 18-hydroxyleringsaktivitet). Derfor kan der hos disse patienter påvises betydelige niveauer af 18-hydroxycortisol, som normalt kun er til stede i spormængder. Den endelige diagnostiske bekræftelse kommer ved at påvise direkte respons af mineralkortikoidproduktionen på ACTH1-24-injektion. Normalt har dette kun en lille eller ingen virkning på kortikosteron-, 18-hydroxykortikosteron- og aldosteronniveauerne. Denne test kan så suppleres yderligere ved at vise, at mineralkortikoidniveauerne falder efter indgift af dexamethason. Kønssteroidniveauerne er moderat til signifikant forhøjede ved CYP11B1-mangel og langt mindre eller minimalt forhøjede ved CYP11B2-mangel. Kønssteroidniveauer ved glukokortikoidresponsiv hyperaldosteronisme er normalt normale.
De fleste ubehandlede patienter med 21-hydroxylasemangel har serum 17-hydroxyprogesteronkoncentrationer et godt stykke over 1000 ng/dL. For de få patienter med niveauer i intervallet fra mere end 630 ng/dL (øvre grænse for referenceområdet for nyfødte) til 2000 eller 3000 ng/dL kan det være klogt at overveje 11-hydroxylasemangel som en alternativ diagnose. Dette gælder især, hvis serum-androstenedionkoncentrationerne også kun er let til moderat forhøjede, og hvis fænotypen ikke er saltspild, men enten simpel viriliserende (kvinde) eller normal (kvinde eller mand). 11-hydroxylasemangel, især hvis den påvirker CYP11B1, kan være forbundet med beskedne forhøjelser af 17-hydroxyprogesteronkoncentrationerne i serum. I disse tilfælde bør testning for CYP11B1-mangel og CYB11B2-mangel overvejes og fortolkes som beskrevet ovenfor. Alternativt kan måling af 21-deoxycortisol være nyttig. Denne mindre metabolit akkumuleres ved CYP21A2-mangel, da den kræver 21-hydroxylaion for at blive omdannet til cortisol, men er normalt ikke forhøjet ved CYP11B1-mangel, da dens syntese kræver via 11-hydroxylering af 17-hydroxyprogesteron.
Forsigtighedsregler
Ved fødslen aktiveres hypothalamus-hypofyse-binyreaksen og hypothalamus-hypofyse-gonadalaksen, og alle binyrebarksteroider er høje, herunder mineralkortikoider og kønsteroider og deres forstadier. Hos for tidligt fødte børn kan forhøjelserne være endnu mere udtalte som følge af sygdom og stress. I tvivlsomme tilfælde, hvor den første test blev udført på et nyfødt barn, anbefales det at gentage testen et par dage eller uger senere.
Testning af adrenocorticotrofisk hormon (ACTH)1-24 har en lav, men sikker risiko for lægemiddel- og allergiske reaktioner og bør derfor kun udføres under tilsyn af en læge i et miljø, der garanterer patientens sikkerhed, typisk et endokrinologisk eller andet centraliseret testcenter.
Interpretation af ACTH1-24-testning i forbindelse med diagnosticering af medfødt binyrebarkhypoplasi (CAH) kræver betydelig erfaring, især for de mindre almindelige varianter af CAH, såsom 11-hydroxylasemangel eller 3-beta-hydroxysteroiddehydrogenase (3beta-HSD-mangel), for hvilke der kun findes meget få, hvis overhovedet nogen, pålidelige normative data. For de endnu sjældnere enzymdefekter som f.eks. mangel på StAR (steroidogen akut regulatorisk protein), 20,22 desmolase, 17a-hydroxylase/17-lyase og 17-beta-hydroxysteroiddehydrogenase (17beta-HSD) findes der kun tilfælde af rapporter. Der bør derfor indhentes ekspertudtalelse fra en pædiatrisk endokrinolog med erfaring med CAH.