Abstract
Syfte. Jämförande utvärdering av morfologiska egenskaper hos främre kapslar och apoptosinduktion i epitelceller efter femtosekundlaserassisterad kataraktkirurgi (FLACS) och standard phakoemulsifieringskirurgi. Metoder. Grupp 1: 30 FLACS främre kapsulotomier och grupp 2: 30 manuella främre kontinuerliga curvilinjära kapsulorhexer. Alla patienter opererades av samma erfarna kirurg. Morfologiska egenskaper hos de främre kapslarna och apoptosinduktion i epitelceller utvärderades. Resultat. Alla patienter uppvisade en signifikant förbättring av den genomsnittliga bästa korrigerade synskärpan (BCVA) 3 månader efter operationen, och inga större intraoperativa eller postoperativa komplikationer förekom. Kapselepitelet verkade vara bevarat i båda grupperna. Analys med svepelektronmikroskopi visade oregelbundna sågtandsformade kanter i kapslarna från grupp 1 medan kapslarna från grupp 2 uppvisade regelbundna och släta kanter. Ett statistiskt signifikant högre uttryck av den nedströms apoptotiska effektorn kluvet caspas 3 observerades i grupp 1. Slutsatser. Det sågtandade utseendet berodde sannolikt på den progressiva sekvensen av laserpulser på kapseln. Laserpulsens egenskaper med låg energi/hög frekvens, i kombination med ett överlappande pulsmönster, resulterade i en mycket kontinuerlig morfologi hos kapselkanterna. Den högre apoptosinduktionen i FLACS-gruppen kan bero på fotodisruptionsberoende plasmagenerering och bildning av kavitationsbubblor.
1. Introduktion
Kataraktkirurgi är det mest utförda kirurgiska ingreppet i världen, med ett ökande antal kirurgiska ingrepp på upp till 24 miljoner per år, enligt WHO:s beräkningar .
Under flera år har tekniken med phakoemulsifiering varit standardmetoden för kataraktutdragning, och de kontinuerliga tekniska förbättringarna, t.ex. de tydliga korneala mikroincisionerna, användningen av vikbara intraokulära linser och tillämpningen av lägre ultraljudsenergi för fragmentering av linsen har gjort kataraktkirurgin effektiv och säker. Den bimanuella mikroincisionskataraktkirurgin (B-MICS) är en minimalt invasiv variant av den traditionella koaxiala phakoemulsifikationen, som möjliggör tydliga korneala mikroincisioner på 1,4 mm och använder en ärmlös phaco-spets med en separat spolningshackare som ger en högre stabilitet i den främre kammaren och möjlighet att använda både höger och vänster hand under det kirurgiska ingreppet .
Den senaste uppdateringen av kataraktkirurgin var introduktionen av femtosekundlaserteknik. Med utgångspunkt från femtosekundlasrar som först introducerades för hornhinnekirurgi i syfte att producera hornhinneflikar för refraktiv kirurgi, arbetar de flesta av den senaste generationens femtosekundlasrar vid kataraktkirurgi med en repetitionsfrekvens på upp till 160 kHz kombinerat med ett energiområde på högst 10-15 μJ .
Med utgångspunkt i fotodisruptionsprinciperna gör sådana typer av lasrar det möjligt för oss att optimalt standardisera några av de svåraste delarna av ingreppet, inklusive kapsulotomi, kärnfragmentering och hornhinnesnitt, förutom att de ger mer exakta och reproducerbara resultat jämfört med manuella tillvägagångssätt .
Intills femtosekundlaserteknikens intåg har manuell kontinuerlig curvilinjär capsulorhexis (mCCC) varit standardmetoden för öppning av främre kapseln vid kataraktkirurgi eller refraktivt linsbyte. Femtosekundlaserassisterad kataraktkirurgi (FLACS) har nu revolutionerat detta viktiga kirurgiska steg genom att skapa förutsägbara och kurvlinjiga kapsulotomier som resulterar i bättre överlappning mellan kapsel och intraokulär lins (IOL) och bättre IOL-centrering och -position än med den manuella tekniken. Framför allt har tidigare resultat visat att FLACS-kapsulotomier har en repeterbar och exakt storlek, är centrerade och följaktligen ger bättre IOL-centrering och minskad sannolikhet för IOL-tiltning .
I flera studier har man undersökt morfologin hos kanterna och jämnheten hos FLACS-kapsulotomier, som skapas av en specifik laservåglängd, pulsenergi, pulsvaraktighet, pulsmönster, repetitionsfrekvens och fläckstorlek . Preliminära analyser av kapslarna visade att de hade en poststämpelaspekt med en betydande ojämnhet, som sannolikt orsakades av flera faktorer, bland annat den laserenergi som användes för att skapa kapslarna .
För övrigt är bakre kapselns opacificering (PCO) en av de mest återkommande långtidskomplikationerna av kataraktkirurgi. Många studier har hittills genomförts för att definiera vilka faktorer som kan påverka utvecklingen av PCO, inklusive IOL-designen, administreringen av terapeutiska medel, själva kirurgitekniken och andra kirurgiska ingrepp för att rengöra den bakre kapseln .
Som rapporterats i litteraturen utsätts linskapseln för mekanisk eller fotodestruktiv skada, när antingen capsulorhexis eller capsulotomi utförs, med påföljande död av epitelcellerna. Hypotesen är att femtosekundlaser rimligen kan inducera apoptos i högre grad.
Syftet med den här studien var att utvärdera morfologiska egenskaper hos människans främre linskapsel, även på ultrastrukturell nivå, efter kataraktkirurgi utförd med manuell teknik respektive FLACS. Dessutom undersökte vi om apoptos inducerades i monolagerat epitel under den främre kapseln, efter de två kirurgiska tillvägagångssätten.
2. Material och metoder
Den experimentella studien godkändes av den forskningsetiska kommittén för humant forskningsetiska kommittén vid universitetet i Modena och Reggio Emilia (Modena, Italien) och utfördes i enlighet med Helsingforsdeklarationen vid det ögonmedicinska institutet, universitetet i Modena och Reggio Emilia. Patienter med katarakt LOCS III grad 2 eller 3 och en synskärpa på 5/10 eller sämre på korrekt avstånd ingick i studien. Patienterna uteslöts vid okulärt trauma, pseudoexfoliationssyndrom eller andra okulära komporbiditeter. Studien genomfördes efter skriftligt samtycke från patienterna som genomgick antingen traditionell manuell kataraktutdragning (B-MICS) eller femtosekundlaserassisterad kataraktkirurgi med hjälp av femtosekundlasern Ziemer LDV Z8. Alla kirurgiska ingrepp utfördes av samma erfarna kirurg (G.M.C.).
2.1. Kirurgiska tekniker
En konsekvent mydriasis uppnåddes med instillation av 10 % fenylefrin och 1 % cyklopentolat och en lokoregional anestesi med peribulbar blockering utfördes (1,5 ml lidokain 2 % och 1,5 ml bupivokain 0,5 %).
2.1.1.1. FSL-assisterad teknik
Vi applicerade försiktigt en sugring för engångsbruk på ögat, centrerad över limbus. Sugringen fylldes med balanserad saltlösning (BSS) för att skapa ett flytande gränssnitt, och lasersystemets rörliga arm dockades över hornhinnans apex. De okulära strukturerna visades av det integrerade OCT-systemet (optical coherence tomography) och behandlingsparametrarna bestämdes på ett skräddarsytt sätt med hjälp av guiden för laserplattformens inställningar. Inställningarna för energi- och frekvenslaserpulsen var 900 mW, 1 MHz för capsulotomi; 950-1000 mW, 2 MHz för phakofragmentering; 1200-1300 mW, 2 MHz för hornhinnesnitt. Laserbehandlingen inleddes med linsfragmentering med ett åttadelat pajskärningsmönster, följt av en främre kapsulotomi med en diameter på 5,2 mm. Slutligen utförde lasern två 1,4 mm stora korneala mikroincisioner vid klockan 10 respektive klockan 2. I slutet avlägsnades sugringen från ögonytan för att fortsätta med phakoförfarandet. Kirurgen kontrollerade CCI:ernas genomsläpplighet med hjälp av en slät spatel, först med en vinkelrät lutning mot limbuslutningen och sedan med mjuka rörelser längs snittet för att öppna det helt från sida till sida. Den främre kammaren fylldes med okulär viskoelastisk anordning (OVD) för att fortsätta med avlägsnandet av den främre kapseln, varvid man var uppmärksam på eventuella vävnadskapselbryggor för att undvika kapselfugue.
Hydrodissektion och hydrodelineation utfördes med hjälp av en 26-gauge-kanyl med injektion av BSS under den främre kapselns kant, varvid man var uppmärksam på luftbubblornas rörelser för att undvika bakre kapselblockering och kapselrupturer. Bimanuell fakoemulsifieringsteknik användes för att aspirera kärnan med en 20-gauge 30-graders vinklad ärmlös sond och en 19-gauge spolningshuggare (Oertli-Instruments AG). Slutligen utfördes bimanuell bevattning/aspiration av den kvarvarande cortexen med hjälp av två 21-gauge-sonder med oval formad sektion (21-gauge bevattningshandstycke slätt, 21-gauge aspirationshandstycke grovt, Bausch & Lomb) följt av polering av den bakre kapseln. Alla intraokulära linser placerades i kapselpåsen utan komplikationer. Avlägsnande av den främre linskapseln efter antingen manuell främre capsulorhexis eller FSL-assisterad främre capsulotomi visas i figur 1.
(a)
(b)
(a)
(b)
2.1.2. Standardteknik
Kirurgen utförde två 1,4 mm biplanära trapezoidala snitt vid klockan 10 respektive klockan 2 med en förkalibrerad kniv och en manuell 5 mm kontinuerlig curvilinear capsulorhexis (mCCC). Hydrodissektion utfördes med en 26-gauge kanyl och fakoemulsifiering med en 20-gauge, 30-graders vinklad ärmlös sond och en spolningshackare (Bragamele 19-gauge). Phako-frakturering uppnåddes med hjälp av stop-and-chop-tekniken. Irrigation/aspiration utfördes med två 21-gauge-sonder med oval formad sektion (21-gauge irrigationshandstycke smooth Stellaris, 21-gauge aspirationshandstycke rough, Bausch & Lomb). I båda teknikerna implanterades IOL utan att huvudincisionen utvidgades; incisionerna hydrosuturerades. BunnyLens AF IOL (Hanita Lenses, Israel) implanterades genom 1,4 mm mikroincision med sårassisterad teknik genom ViscoJect™ BIO 1,5-injektorn. I slutet av operationen avlägsnades OVD och incisionerna hydrerades av säkerhetsskäl.
Postoperativ behandling bestod av tobramycin och dexametason ögondroppar fyra gånger om dagen i 15 dagar, följt av flurbiprofen ögondroppar tre gånger om dagen i ytterligare 15 dagar.
2.2. Morfologisk utvärdering: Fasskontrast-, histologiska och svepelektronmikroskopiska analyser
Prover av främre linskapseln som erhållits med antingen FSL-assisterad eller standardteknik tvättades omedelbart med fosfatbuffersaltlösning (PBS) efter det kirurgiska uttaget. För att utvärdera morfologin och kanterna på de kapslar som erhållits efter båda de kataraktkirurgiska teknikerna bearbetades proverna för faskontrast-, histologiska och svepelektronmikroskopiska analyser. En del av proverna fixerades med 4 % paraformaldehyd (PFA) i PBS i 20 minuter i rumstemperatur. Därefter tvättades proverna tre gånger med PBS och observerades med hjälp av ett Nikon Eclipse TE2000-U inverterat mikroskop. Representativa faskontrastbilder togs med en CCD-kamera Hamamatsu ORCA 285. Därefter bearbetades proverna för histologisk analys genom att de torkades med graderad etanol, rensades och bäddades in i paraffin. Fem μm tjocka seriella snitt klipptes för varje prov och rutinmässig färgning med hematoxylin/eosin (H&E) utfördes för att analysera de morfologiska detaljerna och mäta tjockleken på de främre kapslarna.
En annan del av de insamlade proverna tvättades, direkt efter de kirurgiska ingreppen, med 0,1 M pH 7,4 Sorensons fosfatbuffert (PB) och fixerades med 1 % glutaraldehyd i 0,1 M pH 7,4 PB. Efter tre tvättar i PB dehydratiserades proverna av främre linskapseln med graderad etanol tills SEM-observation utfördes. SEM-bilder togs med ett Nova NanoSEM 450 (FEI) svepelektronmikroskop (SEM).
Huvudsyftet med dessa analyser var att utvärdera epitelcellskiktet, förekomsten av fransar i kapselns kanter och kanternas grovhet/släthet.
2.3. Utvärdering av apoptos i LECs
För att utvärdera om apoptos inträffade i linsepitelceller som fäster vid främre linskapseln efter B-MICS kirurgiskt tillvägagångssätt och efter frisättning av pulsenergi med femtosekundlaser, behandlades proverna för konfokal immunofluorescensanalys, enligt tidigare beskrivning . Kortfattat: kapslar fixerade med 4 % tvättades med PBS och mättades med PBS innehållande 3 % bovint serumalbumin (BSA) i 30 minuter i rumstemperatur. Därefter inkuberades proverna med en primär antikropp av kanin mot klyftat caspas 3 (Cell Signaling), utspädd 1:50 i PBS innehållande 3 % BSA, i 1 timme i rumstemperatur. Efter tvätt i PBS innehållande 3 % BSA inkuberades proverna med en sekundär antikropp mot get-antikanin Alexa546 (Life Technologies), utspädd 1 : 200 i PBS innehållande 3 % BSA. Proverna tvättades sedan med PBS, färgades med 1 mg/ml 4′,6-diamidino-2-fenylindol (DAPI) i PBS i 1 minut och monterades sedan med ett antifadingmedium. Fluorescerande prover observerades med ett Nikon A1 konfokalt laserskanningsmikroskop. De konfokala seriella sektionerna bearbetades med ImageJ-programvaran för att erhålla tredimensionella projektioner och bildrendering utfördes med Adobe Photoshop Software .
2.4. Statistisk analys
Data utvärderades med statistisk programvara (GraphPad Prism Software version 7 Inc., San Diego, CA, USA). Skillnader mellan de två försöksgrupperna analyserades med hjälp av Students -test. Data uttrycktes som medelvärde ± SD. Varje experimentell utvärdering utfördes i tre exemplar. I alla fall sattes signifikansen till .
3. Resultat
3.1. Kliniska observationer
För grupp 1 (FLACS) ingick 30 ögon (15 högra ögon och 15 vänstra ögon) av 30 patienter (10 män och 20 kvinnor) i studien; medelåldern var 74,07 ± 8,48 år. För grupp 2 (B-MICS) ingick 30 ögon (13 högra ögon och 17 vänstra ögon) av 30 patienter (8 män och 22 kvinnor) i studien; genomsnittsåldern var 75,72 ± 9,16 år. BunnyLens AF IOL implanterades i alla ögon. Alla IOL:er implanterades i påsen.
Den totala operationstiden var 17,89 ± 3,80 minuter i grupp 1, medan den i grupp 2 var 12,63 ± 2,10 minuter, med en skillnad som resulterade i att den var statistiskt signifikant (). I grupp 1 observerades ingen ofullständig capsulotomi eller kapselknappar; dessutom registrerades ingen intraoperativ större komplikation eller någon postoperativ komplikation i båda grupperna.
Tre månader efter operationen observerades en genomsnittlig BCVA-förbättring på 0,460 ± 0,249 LogMar i grupp 1 (jämfört med utgångsvärdena). På samma sätt observerades i grupp 2 en genomsnittlig BCVA-förbättring på 0,417 ± 0,150 LogMar ( jämfört med utgångsvärdena) vid samma utvärderingstillfälle. Inga statistiskt signifikanta skillnader i förbättringen av synskärpan observerades mellan de två grupperna.
Med avseende på astigmatism och korneal pachymetri upptäckte vi ingen statistiskt signifikant skillnad mellan utgångsvärden och postoperativa värden, med Students -test vare sig inom varje grupp eller mellan de två grupperna ().
För att slutligen, när det gäller antalet endotelceller (ECC), fann vi i grupp 1 vid 3 månaders uppföljning en genomsnittlig förlust av endotelceller på 162,27 ± 225,11 celler/mm2 i grupp 1 och 322,52 ± 339,93 celler/mm2 efter operationen i grupp 2, en minskning som var statistiskt signifikant antingen inom varje grupp eller mellan de två grupperna ().
3.2. Morfologisk analys: Fasskontrast-, histologiska och svepelektronmikroskopiska analyser
Fasskontrastbilder visade epitelceller med välbevarade kärnor och cytoplasma, förutom att de avslöjade intakta cellgränser genom större delen av epitelytan, med undantag för den närmare närheten av kapselns kanter, där epitelcellerna lossnade från basalmembranet (figur 2(a)). Kapslarnas kanter verkade regelbundna och släta, vilket redovisas i figur 2 a. När det gäller kapslarnas utseende i FLACS-gruppen var epitelcellerna mestadels vidhäftande till basalmembranet medan kanterna uppvisade ett mindre regelbundet, sågtandsmönster (figur 2 b). Den histologiska analysen bekräftade att en del av proverna från B-MICS-gruppen uppvisade en partiell avskiljning av epitelskiktet från basalmembranet, medan de flesta kapslarna från FLACS-gruppen uppvisade en kontinuerlig vidhäftning av epitelcellerna och basalmembranet (figur 3). Dessutom visade mätningar av kapseltjockleken mellan de två försöksgrupperna att det fanns en skillnad, även om den inte var statistiskt signifikant. I synnerhet visade prover som erhållits efter FLACS-tekniken en högre tjocklek jämfört med kapslar som erhållits från B-MICS (data inte visad).
(a)
(b)
(a)
(b)
Slutligt visade SEM-analysen, som redovisas i figur 4, med högre definition hur enhetlig vidhäftningen av epitelcellerna till basalmembranet var och, framför allt, utseendet av kapselkanter. I synnerhet i B-MICS-gruppen hade kapselkanterna en regelbunden, slät och genomskinlig kant (figur 4(a)). I annat fall uppvisade de kapselkanter som erhållits genom FLACS tydligt ett oregelbundet och fransigt utseende (figur 4(b)).
(a)
(b)
(a)
(b)
3.3. Utvärdering av apoptos i LECs
Konfokal immunofluorescensanalys visade att apoptos inträffade i linsepitelceller i prover som erhållits från antingen B-MICS-gruppen eller FLACS-gruppen, vilket visas i figur 5(a). Medan i kapslar som erhållits med den manuella kirurgiska tekniken observerades förekomsten av kluvet caspas 3 främst i epitelceller närmare kapselkanterna, visade prover som samlats in efter FLACS-tekniken en mer utbredd färgning mot kluvet caspas 3, från kanten till kärnan av epitelskiktet. Pseudofärgbilder av kluvet caspas 3 togs fram enligt tidigare beskrivning och redovisas i figur 5(b). Densitometrisk analys av de immunofluorescerande signalerna gav semikvantitativa data om uttrycket av den apoptotiska effektorn kluvet caspas 3, som var statistiskt signifikant högre i FLACS-gruppen jämfört med B-MICS-gruppen (figur 5(b); ).
(a)
(b)
(a)
(b)
4. Diskussion
Användningen av femtosekundlaser utgör den senaste landvinningen inom kataraktkirurgi, med utgångspunkt från deras första kliniska tillämpning 2008. På grund av det ökande behovet av att tillgodose förväntningarna på ett optimalt refraktivt resultat har många nya utvecklingar uppfyllts.
Användningen av femtosekundlaser vid kataraktkirurgi har gjort det möjligt att förbättra förfarandets säkerhet och effektivitet, vilket är väl dokumenterat i litteraturen . Tidigare rapporter har faktiskt visat den höga repeterbarheten och precisionen i utförandet av de svåraste faserna av kataraktkirurgi, inklusive optimerade främre kapsulotomier som producerade ett kontinuerligt skarpkantigt snitt med god draghållfasthet .
Vår studie utvärderade de morfologiska egenskaperna hos människans främre kapslar som erhållits med standardteknik för phakoemulsifiering respektive FLACS. De sistnämnda insamlades efter användning av Ziemer LDV Z8, en femtosekundlaser som drar nytta av ett system med låg energi och hög frekvens (hög pulsrepetitionsfrekvens – upp till 10 MHz – kombinerat med ett mycket lågt energiområde på 100-150 nJ) och som använder ett flytande optiskt gränssnitt för att underlätta faserna för kapsulotomi och fragmentering av linsen. Dessa egenskaper gjorde det möjligt att få fram främre kapselprover med en välbevarad histomorfologi, med epitelceller som är enhetligt vidhäftande, jämfört med prover som erhållits med manuell teknik, vilket visades med hjälp av faskontrast- och SEM-analyser. I enlighet med befintlig litteratur var kanterna på de främre kapslarna från FLACS mindre regelbundna och kännetecknade av ett sågtandsmönster, jämfört med den släta kant som framställdes med manuell teknik . Mönstret som observerades i FLACS-gruppen kan sannolikt tillskrivas Femto LDV Z8-laserns pulsraster med hög densitet och optik med hög precision, vilket resulterar i flera överlappande fläckar som skapar ett kontinuerligt, rent snitt, som liknar det som erhålls med B-MICS-tekniken .
Preparat från främre kapseln som erhållits med FLACS-tekniken uppvisade också en högre tjocklek jämfört med kapslar som erhållits med B-MICS, vilket troligen berodde på förekomsten av cortex som hängde fast vid främre kapseln.
Förutom histomorfologiska egenskaper visade våra data att apoptos inträffade i epitelcellerna i främre kapslar som erhållits med båda kirurgiska tekniker. I synnerhet var uttrycket för kluvet caspas 3 betydligt högre i prover som samlats in efter FLACS, med en positiv färgning som inte var begränsad till cellerna längs skärkanten utan även spreds till kapselns inre kärna, vilket tyder på en bredare induktion av celldöd. Omvänt upptäcktes apoptos i epitelskiktet som hängde fast vid kapselproverna från B-MICS-förfarandet endast längs snittkanten, som en följd av den mekaniska skada som inducerats av den tångmedierade extraktionen av den främre kapseln. Denna större apoptotiska händelse som påverkar det monolagiga epitelet under den främre kapseln efter FLACS beror sannolikt på laserpulsenergin, den fotodisruptionsberoende plasmabildningen och det efterföljande skapandet av kavitationsbubblor . Våra data stämmer överens med tidigare resultat från Mayer et al. och i synnerhet kan ett utbrett uttryck av den apoptotiska effektorn kluvet caspas 3 utgöra en positiv förutsägelsefaktor som gör det möjligt att förhindra kapselpåseopacifiering, genom att kraftigt hämma proliferationen av kvarvarande epitelceller, vilket i allmänhet korrelerar med postoperativt inflammatoriskt svar . Ur klinisk synvinkel visade vår studie att patienter från antingen FLACS- eller B-MICS-gruppen tre månader efter operationen uppvisade en statistiskt signifikant förbättring av den bästa korrigerade synskärpan (BCVA) jämfört med utgångsmätningarna. Noterbart är att när det gäller antalet endotelceller observerades en statistiskt signifikant minskning av korneal endotelcellsförlust i FLACS-gruppen, händelse som kan tillskrivas kortare phakoemulsifieringstider. Dessa uppgifter överensstämmer med tidigare resultat som visar att laserkataraktkirurgi är mindre traumatiskt för hornhinnans endotel förutom att erbjuda ett verktyg för kirurgerna att standardisera de kritiska faserna av kataraktkirurgi, genom en inledande inlärningskurva .
5. Slutsatser
Användningen av femtosekundlaser vid kataraktkirurgi gör det möjligt att optimera några av de svåraste stegen i ingreppet, inklusive capsulotomi, kärnfragmentering och hornhinnesnitt, förutom att ge mer exakta och repeterbara resultat. Våra resultat stämmer överens med den befintliga litteraturen, men det kommer att krävas ytterligare studier för att matcha de ljusa sidorna av manuell teknik och femtosekundlaser, genom att definiera den optimala kombinationen av laserenergi, repetitionsfrekvens och fläckstorlek, för att erhålla kapsulotomier av bättre kvalitet med regelbundna skärkanter som är jämförbara med dem vid manuell kapsulorhexis, och för att minska den inflammatoriska reaktionen i ögat, och på så sätt förhindra proliferation av lensepitelceller och kapselsäcksopacifiering.
Abkortningar
| FLACS: | Femtosekundassisterad laserkataraktkirurgi |
| B-MICS: | Bimanuell mikroinkisionskataraktkirurgi |
| mCCC: | Manuell kontinuerlig curvilinjär capsulorhexis |
| IOL: | Intraokulär lins |
| PCO: | Posterior capsule opacification |
| BSS: | Balanserad saltlösning |
| OCT: | Optical coherence tomography |
| OVD: | Ocular viscoelastic device |
| PBS: | Phosfatbuffersaltlösning |
| PFA: | Paraformaldehyd |
| H&E: | Haematoxylin/eosin |
| SEM: | Scanning elektronmikroskop |
| BSA: | Bovine serum albumin |
| DAPI: | 4′,6-Diamidino-2-phenylindol. |
Offentliggörande
Detta arbete presenterades delvis vid det 20:e AICCER-mötet 2017 (Associazione Italiana di Chirurgia della Cataratta e Refrattiva), 9-11 mars, Rimini (Italien), 2017.
Intressekonflikter
Författarna förklarar att det inte finns några ekonomiska intressekonflikter.