PROIECTARE ȘI METODE DE CERCETARE
Un total de 55 de pacienți cu diabet zaharat de tip 2, tratați numai cu dietă și cu sulfoniluree, au fost înrolați în prezentul studiu (Tabelul 1). IMC a fost estimat prin împărțirea greutății corporale (în kilograme) la pătratul înălțimii (în metri).
- Vezi inline
- Vezi popup
- Download powerpoint
Diabetele a fost diagnosticat în conformitate cu criteriile Asociației Americane de Diabet (14). Subiecțiicu niveluri de glucoză plasmatică la post ≥7,0 mmol/l au fost diagnosticați provizoriu ca având diabet. Ulterior, subiecții au fost supuși unui test de toleranță la glucoză pe cale orală (OGTT) de 75 g (Trelan G 75; Shimizu, Shizuoka, Japonia), iar cei cu niveluri de glucoză plasmatică la micul dejun ≥7,0 mmol/l sau niveluri de glucoză plasmatică în 2 ore≥11,1 mmol/l au fost diagnosticați ca având diabet. Diabetul de tip 2 a fost definit în funcție de gradul de secreție a insulinei, vârsta, modelul de debut și existența antecedentelor familiale de diabet.
La internare, 50 de pacienți au fost tratați doar cu dietă și 5 cusulfoniluree (glibenclamidă 2,5-5,0 mg/zi). Niciunul dintre pacienți nu a fost tratat cu insulină sau cu agenți de sensibilizare la insulină. Cincisprezece pacienți aveau neuropatie periferică și retinopatie diabetică simplă și 10 aveaumicroalbuminurie. Nu au fost depistate complicații macrovasculare.
Consimțământul informat a fost obținut de la toți subiecții înainte de începerea studiului.
Designul studiului
După internare, pacienții au fost supuși la dietă și terapie prin exerciții fizicepentru 6 săptămâni. Tratamentul dietetic a fost după cum urmează: 1.440-1.720 kcal/zi cu o dietă compusă din 20% (energie) proteine, 25% grăsimi și 55% carbohidrați. Respectarea tratamentului dietetic a fost verificată de către un dietetician de două ori pe săptămână. În timpul terapiei prin exerciții fizice, pacienții au mers aproximativ 10.000 de pași zilnic; numărul de pași pe zi a fost numărat cu ajutorul unui pedometru, iar numărul de pași a fost verificat de o asistentă în fiecare zi. Dieta și terapia prin exerciții fizice nu au fost modificate pe parcursul tratamentului.
Nivelurile sanguine de glucoză, HbAlc și insulină; valorile CLamp-IR, HOMA-IR și indicii simpli de sensibilitate la insulină (indicele de glucoză 30-min și 2-h, de insulină 30-min și 2-h și de insulinosensibilitate 30-min și 2-h obținut în timpul unui OGTT de 75 g)(9,10); și suprafața de grăsime corporală și tensiunea arterială au fost măsurate la toți subiecții în decurs de o săptămână după internare și cu o săptămână înainte de externare. Sulfonilureele au fost retrase cu 1 zi înainte de studiul de clampare; niciunul dintre pacienți nu a primit vreun medicament după primul studiu de clampare în timpul tratamentului.
Nivelul glucozei plasmatice a fost măsurat printr-o metodă enzimatică automată. NivelulHbAlc (valoare normală 4,3-5,8%) a fost măsurat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță. Insulina serică a fost măsurată cu ajutorul unui kit de testare imunoradiometrică (kit Insulin Riabead II; Dainabot, Tokyo). Acest kit a inclus anticorpi mousemonoclonali antiinsulină umană, marcați cu125I și neetichetați. Coeficienții de variație intra- și inter-teste ai testului au fost de 1,9 și, respectiv, 2,0%.
Clamp IR a fost evaluat prin tehnica de clampare hiperinsulinemică-euglicemică cu ajutorul pancreasului artificial (STG-22; Nikkiso, Tokyo)(1,7,15,16,17,18).Pe scurt, la ora 8:00 A.M., au fost introduse două canule acoperite cu teflon; una a fost introdusă în vena antecubitală stângă pentru perfuzia de insulină (Humulin R; Eli Lilly, Indianapolis, IN) și 10% glucoză, iar cealaltă a fost introdusă în vena dreaptă contralaterală încălzită a mâinii pentru prelevarea de sânge arterializat.După recoltarea sângelui de bază pentru determinarea glucozei și a insulinei, s-a administrat o doză de insulină în timpul primelor 10 minute într-o manieră alogaritmică descrescătoare pentru a crește rapid insulina serică până la nivelul dorit (1 200 pmol/l); acest nivel de insulină a fost apoi menținut printr-o perfuzie continuă de insulină la o rată de 13,44 pmol – kg-1- min-1 timp de 120 de minute. Nivelul mediu de insulină a atins un nivel stabil între 90 și 120 min după începerea studiului de clampare (înainte de tratament1.224,0 ± 208,8 pmol/l; după tratament 1.177,2 ± 232,8 pmol/l).Glicemia a fost monitorizată continuu și menținută la nivelul dorit (5,24 mmol/l) prin infuzie de glucoză 10%. Cantitatea medie de glucoză administrată în ultimele 30 de minute a fost considerată ca rată de perfuzie a glucozei, care a fost luată ca valoare a clampului IR.
HOMA a fost utilizat pentru a evalua rezistența la insulină înainte și după tratament(2). Presupunând că subiecții normali cu vârsta <35 de ani și greutate normală au o IR de 1, valorile pentru un pacient pot fi calculate din concentrațiile de insulină și glucoză la jeun folosind următoarea formulă: insulină serică la jeun (μU/ml) × glucoză plasmatică la jeun (mmol/l)/22,5. Probele de sânge pentru măsurătorile HOMA-IR au fost prelevate de la fiecare subiect de la ora 8:00 A.M. după o noapte de repaus la pat. Am examinat trei probe separate de insulină prelevate la 15 minute distanță, iar nivelul mediu de insulină a fost utilizat pentru calculul HOMA-IR. Pentru a estima reproductibilitatea HOMA-IR, am analizat un al doilea HOMA-IR la toți pacienții cu o altă ocazie în termen de 5 zile de la primul HOMA-IR înainte și după tratament. Coeficientul de variație pentru HOMA-IR înainte de tratament a fost de 10,2% și de 9,8% după tratament.
OGTT de 75 g a fost începută de la ora 8:00 dimineața după o noapte de repaus la pat (foame de 11:00 h). Sângele a fost prelevat la 0, 30 și 120 min, iar nivelurile de plasmăglucoză și insulină serică au fost evaluate.
Zona de grăsime corporală a fost evaluată așa cum a fost descrisă anterior(19). Suprafața totală a secțiunii transversale, suprafața de grăsime viscerală intraabdominală și suprafața de grăsime subcutanată au fost măsurate prin tomografie computerizată abdominală efectuată la nivelul ombilicului. Orice regiune intraperitoneală care are aceeași densitate ca și stratul de grăsime subcutanată a fost definită ca zonă de grăsime viscerală.
Presiunea arterială a fost determinată de trei ori în poziție decubit dorsal după o odihnă de 5 minute.
Analize statistice
Datele sunt exprimate ca medii ± SD. Testul t al lui Student a fostefectuat pentru a compara mediile variabilelor măsurate înainte și dupătratament. Relația dintre clamp IR și mai mulți indici clinici de sensibilitate la insulină a fost evaluată prin analiză de regresie univariată. compararea liniilor de regresie, în ceea ce privește pantele și interceptele,între HOMA-IR și clamp IR înainte și după tratament a fost realizată prin analiza covarianței; în această analiză, testul F a fost utilizat pentru a evalua diferența dintre doi coeficienți de regresie. Pentru a se apropia de o distribuție normală, valorile HOMA-IR și ale clamp IR au fost toate transformate logaritmic înainte de analiza de regresie și de covarianță. Testul lui Student și corelațiile au fost efectuate cu ajutorul programului StatView 4.0software (Abacus Concepts, Berkeley, CA) pentru Macintosh. Analiza de covarianță și analiza de regresie au fost efectuate cu ajutorul programului PRISM 2.0software (Graph-Pad software, San Diego, CA) pentru Macintosh. O valoare a probabilității de P < 0,05 la testele cu două fețe a fost considerată semnificativă din punct de vedere statistic.