Abstract

Scop. Evaluarea comparativă a caracteristicilor morfologice ale capsulelor anterioare și a inducerii apoptozei în celulele epiteliale după chirurgia cataractei asistată de laserul cu femtosecundă (FLACS) și chirurgia standard de facoemulsificare. Metode. Grupul 1: 30 de capsulotomii anterioare FLACS și Grupul 2: 30 de capsulotomii anterioare continue curbilinii manuale. Toți pacienții au fost operați de același chirurg experimentat. Au fost evaluate caracteristicile morfologice ale capsulelor anterioare și inducerea apoptozei în celulele epiteliale. Rezultate. Toți pacienții au evidențiat o îmbunătățire medie semnificativă a acuității vizuale cel mai bine corectate (BCVA) la 3 luni după operație și nu au apărut complicații majore intraoperatorii sau postoperatorii. Epiteliul capsular a părut să fie conservat în ambele grupuri. Analiza prin microscopie electronică de scanare a dezvăluit margini neregulate în formă de dinți de fierăstrău în capsulele din grupul 1, în timp ce capsulele din grupul 2 au prezentat margini regulate și netede. O expresie mai mare, semnificativă din punct de vedere statistic, a efectului apoptotic din aval, caspaza scindată 3, a fost observată în Grupul 1. Concluzii. Aspectul în dinți de fierăstrău s-a datorat probabil secvenței progresive de impulsuri laser pe capsulă. Proprietățile de energie scăzută/frecvență ridicată ale impulsului laser, combinate cu un model de impulsuri suprapuse, au dus la o morfologie foarte continuă a marginilor capsulei. Inducția mai mare a apoptozei în grupul FLACS s-ar putea datora generării de plasmă dependentă de fotodistrugere și formării de bule de cavitație.

1. Introducere

Chirurgia cataractei este cea mai efectuată intervenție chirurgicală la nivel mondial, cu un număr în creștere de proceduri chirurgicale până la 24 de milioane pe an, conform estimărilor OMS .

De mai mulți ani, tehnica de facoemulsificare a fost metoda standard pentru extracția cataractei, iar îmbunătățirile tehnice continue, cum ar fi microinciziile corneene clare, utilizarea lentilelor intraoculare pliabile și aplicarea unei energii ultrasonore mai scăzute pentru fragmentarea cristalinului, au făcut ca chirurgia cataractei să fie eficientă și sigură. Operația de cataractă cu microincizie bimanuală (B-MICS) este o variantă minim invazivă a facoemulsificării coaxiale tradiționale, care, permițând microincizii corneene clare de 1,4 mm, utilizează un vârf de faco fără mâneci cu un chopper de irigare separat care conferă o stabilitate mai mare a camerei anterioare și posibilitatea de a folosi atât mâna dreaptă, cât și mâna stângă în timpul intervenției chirurgicale .

Ultima actualizare în chirurgia cataractei a fost introducerea tehnologiei laserului cu femtosecundă. Pornind de la laserele femtosecunde introduse inițial pentru chirurgia corneei cu scopul de a produce lambouri corneene pentru chirurgia refractivă, majoritatea laserelor femtosecunde de ultimă generație operează în chirurgia cataractei la o rată de repetiție de până la 160 kHz combinată cu un interval de energie de maximum 10-15 μJ .

Bazate pe principiile fotodisrupției, astfel de tipuri de lasere ne permit să standardizăm în mod optim unele dintre cele mai dificile părți ale procedurii, inclusiv capsulotomia, fragmentarea nucleară și inciziile corneene, pe lângă faptul că oferă rezultate mai precise și mai reproductibile, în comparație cu abordările manuale .

Până la apariția tehnologiei laserului cu femtosecundă, capsulorhexisul curbiliniu continuu manual (mCCC) a fost metoda standard pentru deschiderea capsulei anterioare în chirurgia cataractei sau înlocuirea lentilei refractive. Chirurgia cataractei asistată de laserul cu femtosecunde (FLACS) a revoluționat acum această etapă chirurgicală importantă, creând capsulotomii previzibile și curbilinii care au ca rezultat o mai bună suprapunere capsulă-lentilă intraoculară (LIO) și o mai bună centrare și poziție a LIO decât cu tehnica manuală. În special, constatările anterioare au demonstrat că capsulotomiile FLACS au o dimensiune repetabilă și precisă, sunt centrate și, în consecință, asigură o mai bună centrare a LIO și o probabilitate redusă de înclinare a LIO .

Diverse studii au examinat morfologia marginilor și netezimea capsulotomiilor FLACS, care sunt create de lungimea de undă specifică a laserului, energia pulsului, durata pulsului, modelul pulsului, rata de repetiție și dimensiunea spotului . Analizele preliminare ale capsulelor au arătat un aspect de ștampilă poștală cu o rugozitate semnificativă, cauzată probabil de mai mulți factori, inclusiv de energia laser utilizată pentru a crea capsulotomiile .

Mai mult, opacifierea capsulei posterioare (PCO) este una dintre cele mai recurente complicații pe termen lung ale operației de cataractă. Multe studii au fost efectuate până în prezent pentru a defini care sunt factorii care pot influența dezvoltarea PCO, inclusiv designul LIO, administrarea de agenți terapeutici, tehnica chirurgicală în sine și alte proceduri chirurgicale pentru curățarea capsulei posterioare .

După cum se raportează în literatura de specialitate, capsula cristalinului este expusă la leziuni mecanice sau fotodisruptive, atunci când se efectuează capsulorexisul sau capsulotomia, cu moartea consecutivă a celulelor epiteliale. Ipoteza este că laserul cu femtosecunde ar putea, în mod rezonabil, să inducă apoptoza într-o măsură mai mare.

Scopul acestui studiu a fost de a evalua caracteristicile morfologice ale capsulei anterioare a cristalinului uman, chiar și la nivel ultrastructural, în urma operației de cataractă efectuată prin tehnica manuală și, respectiv, FLACS. Mai mult, am investigat dacă apoptoza a fost indusă în epiteliul monostrat de sub capsula anterioară, în urma celor două abordări chirurgicale.

2. Materiale și metode

Studiul experimental a fost aprobat de Comitetul de etică a cercetării pe subiecți umani al Universității din Modena și Reggio Emilia (Modena, Italia) și a fost efectuat în conformitate cu Declarația de la Helsinki la Institutul de Oftalmologie, Universitatea din Modena și Reggio Emilia. Pacienții cu cataractă LOCS III de gradul 2 sau 3 și o acuitate vizuală la distanță corectă de 5/10 sau mai slabă au fost incluși în studiu. Pacienții au fost excluși în caz de traumatism ocular, sindrom de pseudoexfoliere sau alte comorbidități oculare. Studiul a fost realizat după obținerea consimțământului scris al pacienților supuși fie unei extracții manuale tradiționale de cataractă (B-MICS), fie unei operații de cataractă asistată de laserul cu femtosecundă cu ajutorul laserului cu femtosecundă Ziemer LDV Z8. Toate procedurile chirurgicale au fost efectuate de același chirurg experimentat (G.M.C.).

2.1. Tehnici chirurgicale

A fost obținută o midriază consistentă cu instilarea de 10% fenilefrină și 1% ciclopentolat și s-a efectuat o anestezie locoregională cu bloc peribulbar (1,5 ml de lidocaină 2% și 1,5 ml de bupivacaină 0,5%).

2.1.1. Tehnica asistată de FSL

Am aplicat cu grijă un inel de aspirație de unică folosință pe ochi, centrat pe limbus. Inelul de aspirație a fost umplut cu soluție salină echilibrată (BSS) pentru a crea o interfață lichidă, iar brațul mobil al sistemului laser a fost andocat peste apexul corneei. Structurile oculare au fost reprezentate de sistemul integrat de tomografie în coerență optică (OCT), iar parametrii de tratament au fost determinați într-o manieră personalizată prin utilizarea asistentului pentru setările platformei laser. Setările privind energia și frecvența impulsurilor laser au fost: 900 mW, 1 MHz pentru capsulotomie; 950-1000 mW, 2 MHz pentru facofragmentare; 1200-1300 mW, 2 MHz pentru incizii corneene. Tratamentul cu laser a început cu fragmentarea cristalinului cu un model de tăiere în formă de plăcintă cu opt piese, urmată de o capsulotomie anterioară cu diametrul de 5,2 mm. În cele din urmă, laserul a efectuat două microincizii corneene de 1,4 mm la ora 10 și, respectiv, la ora 2. La final, inelul de aspirație a fost îndepărtat de pe suprafața ochiului pentru a se trece la procedura faco. Chirurgul a verificat permeabilitatea CCI-urilor cu ajutorul unei spatule netede, mai întâi cu o înclinare perpendiculară pe înclinarea limbusului și apoi cu mișcări ușoare de-a lungul inciziei, pentru a o deschide complet dintr-o parte în alta. Camera anterioară a fost umplută cu un dispozitiv vâscoelastic ocular (OVD) pentru a proceda la îndepărtarea capsulei anterioare, acordând atenție oricăror punți capsulare tisulare pentru a evita fuga capsulei.

Hidrodisecția și hidrodelinearea au fost efectuate cu ajutorul unei canule de calibru 26 cu injectarea de BSS sub marginea capsulei anterioare, acordând atenție mișcărilor bulelor de aer, pentru a evita orice blocaj capsular posterior și rupturi. Tehnica de facoemulsificare bimanuală a fost utilizată pentru a aspira nucleul cu o sondă fără mânecă cu unghi de 30 de grade de calibru 20 și un chopper de irigare de calibru 19 (Oertli-Instruments AG). În cele din urmă, s-a efectuat irigarea/aspirarea bimanuală a cortexului rezidual cu ajutorul a două sonde de 21 de calibre cu secțiune ovală (piesă de mână de irigare netedă de 21 de calibre, piesă de mână de aspirație aspră de 21 de calibre, Bausch & Lomb), urmată de lustruirea capsulei posterioare. Toate lentilele intraoculare au fost plasate în sacul capsular fără complicații. Îndepărtarea capsulei anterioare a cristalinului după capsulorexisul anterior manual sau capsulotomia anterioară asistată de FSL este prezentată în figura 1.

(a)
(a)
(b)
(b)

. (a)
(a)(b)
(b)

Figura 1
Îndepărtarea capsulei anterioare a cristalinului la B-.Tehnici chirurgicale MICS și FLACS. (a) Capsuloreza anterioară manuală cu microforceps; (b) aspectul cristalinului după FLACS și îndepărtarea capsulotomiei anterioare cu microforceps.

2.1.2. Tehnica standard

Cirurgul a efectuat două incizii trapezoidale biplane de 1,4 mm la ora 10 și, respectiv, la ora 2, cu un cuțit precalibrat și un capsulorhexis curbiliniu continuu manual de 5 mm (mCCC). Hidrodisecția a fost efectuată cu o canulă de calibru 26 și facoemulsificarea cu o sondă fără manșon de calibru 20, cu un unghi de 30 de grade și un chopper de irigare (Bragamele de calibru 19). Faco-fracturarea a fost obținută prin tehnica stop-and-chop. Irigarea/aspirația a fost efectuată cu două sonde de 21 de calibre cu secțiune ovală (piesă de mână de irigare Stellaris netedă de 21 de calibre, piesă de mână de aspirație aspră de 21 de calibre, Bausch & Lomb). În ambele tehnici, IOL a fost implantată fără mărirea inciziei principale; inciziile au fost hidrosuturate. Lentilele BunnyLens AF IOL (Hanita Lenses, Israel) au fost implantate printr-o microincizie de 1,4 mm cu tehnica asistată de rană prin intermediul injectorului ViscoJect™ BIO 1.5. La sfârșitul intervenției chirurgicale, OVD a fost îndepărtată și inciziile au fost hidratate din motive de siguranță.

Terapia postoperatorie a constat în picături oculare de tobramicină și dexametazonă de patru ori pe zi timp de 15 zile, urmate de picături oculare de flurbiprofen de trei ori pe zi timp de alte 15 zile.

2.2. Evaluarea morfologică: Analize de contrast de fază, histologice și de microscopie electronică de scanare

Specimenele de capsulă anterioară a cristalinului obținute fie prin tehnici asistate de FSL, fie prin tehnici standard au fost spălate imediat cu soluție salină tampon de fosfat (PBS) după extracția chirurgicală. Pentru a evalua morfologia și marginile capsulelor obținute în urma ambelor tehnici chirurgicale de cataractă, specimenele au fost prelucrate pentru analize de contrast de fază, histologice și de microscopie electronică de scanare. O parte din probe au fost fixate cu paraformaldehidă (PFA) 4% în PBS timp de 20 de minute la temperatura camerei. Apoi, probele au fost spălate de trei ori cu PBS și au fost observate cu ajutorul unui microscop inversat Nikon Eclipse TE2000-U. Imagini reprezentative de contrast de fază au fost achiziționate cu o cameră CCD Hamamatsu ORCA 285. Ulterior, probele au fost prelucrate pentru analiza histologică, fiind supuse deshidratării cu etanol gradat, curățării și încorporării în parafină. Pentru fiecare probă au fost tăiate secțiuni seriale cu grosimea de cinci μm și s-a efectuat o colorare de rutină cu hematoxilină/eozină (H&E) pentru a analiza detaliile morfologice și a măsura grosimea capsulelor anterioare.

O altă parte a probelor colectate a fost spălată, imediat după procedurile chirurgicale, cu 0,1 M pH 7,4 Sorenson’s Phosphate Buffer (PB) și fixată cu glutaraldehidă 1% în 0,1 M pH 7,4 PB. După trei spălări în PB, probele de capsulă anterioară a cristalinului au fost deshidratate cu etanol gradat, până când s-a efectuat observarea SEM. Imaginile SEM au fost achiziționate cu un microscop electronic de scanare (SEM) Nova NanoSEM 450 (FEI).

Scopul principal al acestor analize a fost evaluarea stratului de celule epiteliale, prezența franjelor în marginile capsulei și rugozitatea/ netezimea marginilor.

2.3. Evaluarea apoptozei în LECs

Pentru a evalua dacă apoptoza a avut loc în celulele epiteliale ale cristalinului care aderă la capsula anterioară a cristalinului în urma abordului chirurgical B-MICS și după eliberarea energiei pulsului de către laserul cu femtosecundă, probele au fost procesate pentru analiza confocală de imunofluorescență, așa cum a fost descrisă anterior . Pe scurt, capsulele fixate cu 4% au fost spălate cu PBS și au fost supuse unei saturații cu PBS conținând 3% albumină serică bovină (BSA) timp de 30 de minute la temperatura camerei. Apoi, probele au fost incubate cu un anticorp primar de iepure anti-caspază clivată 3 (Cell Signaling) diluat 1 : 50 în PBS conținând 3% BSA, timp de 1 oră la temperatura camerei. După spălarea în PBS conținând 3% BSA, probele au fost incubate cu un anticorp secundar de capră anti-rabbit Alexa546 (Life Technologies), diluat 1 : 200 în PBS conținând 3% BSA. Probele au fost apoi spălate cu PBS, colorate cu 1 mg/ml de 4′,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) în PBS timp de 1 minut și apoi au fost montate cu mediu antimătreață. Probele fluorescente au fost observate cu ajutorul unui microscop confocal Nikon A1 cu scanare laser. Secțiunile seriale confocale au fost procesate cu software-ul ImageJ pentru a obține proiecții tridimensionale, iar redarea imaginilor a fost realizată cu ajutorul Adobe Photoshop Software .

2.4. Analiza statistică

Datele au fost evaluate cu ajutorul unui software statistic (GraphPad Prism Software versiunea 7 Inc., San Diego, CA, SUA). Diferențele dintre cele două grupuri experimentale au fost analizate prin testul lui Student. Datele au fost exprimate ca medie ± SD. Fiecare evaluare experimentală a fost efectuată în trei exemplare. În orice caz, semnificația a fost stabilită la .

3. Rezultate

3.1. Observații clinice

Pentru Grupul 1 (FLACS), au fost incluși în studiu 30 de ochi (15 ochi drepți și 15 ochi stângi) de la 30 de pacienți (10 bărbați și 20 de femei); vârsta medie a fost de 74,07 ± 8,48 ani. Pentru Grupul 2 (B-MICS), 30 de ochi (13 ochi drepți și 17 ochi stângi) de la 30 de pacienți (8 bărbați și 22 de femei) au fost incluși în studiu; vârsta medie a fost de 75,72 ± 9,16 ani. BunnyLens AF IOL a fost implantat în toți ochii. Toate IOL au fost implantate în sac.

Timp chirurgical total a fost de 17,89 ± 3,80 minute în Grupul 1, în timp ce în Grupul 2 a fost de 12,63 ± 2,10 minute, diferența rezultând a fi semnificativă din punct de vedere statistic (). În Grupul 1, nu au fost observate nici capsulotomie incompletă și nici nasturi capsulari; în plus, nu a fost înregistrată nici o complicație majoră intraoperatorie și nici o complicație postoperatorie în ambele grupuri.

La trei luni după operație, s-a observat o îmbunătățire medie a BCVA de 0,460 ± 0,249 LogMar în Grupul 1 ( față de valorile inițiale). În mod similar, în Grupul 2 s-a observat o îmbunătățire medie a BCVA de 0,417 ± 0,150 LogMar ( față de valorile inițiale), la același moment de evaluare. Nu au fost observate diferențe semnificative din punct de vedere statistic în ceea ce privește îmbunătățirea acuității vizuale între cele două grupuri.

În ceea ce privește astigmatismul și pahimetria corneei, nu am detectat nicio diferență semnificativă din punct de vedere statistic între valorile inițiale și cele postoperatorii, cu ajutorul testului – Student, nici în cadrul fiecărui grup, nici între cele două grupuri ().

În cele din urmă, în ceea ce privește numărul de celule endoteliale (ECC), în grupul 1, la urmărirea la 3 luni, am constatat o pierdere medie de celule endoteliale de 162,27 ± 225,11 celule/mm2 și de 322,52 ± 339,93 celule/mm2 după operație în grupul 2, o reducere care a fost semnificativă statistic fie în cadrul fiecărui grup, fie între cele două grupuri ().

3.2. Analiza morfologică: Analize de contrast de fază, histologice și de microscopie electronică de scanare

Imaginile de contrast de fază au arătat celule epiteliale cu nuclee și citoplasmă bine conservate, pe lângă faptul că au dezvăluit granițe celulare intacte pe cea mai mare parte a suprafeței epiteliale, cu excepția proximității mai apropiate a marginilor capsulare, unde celulele epiteliale erau desprinse de membrana bazală (Figura 2(a)). Marginile capsulelor păreau regulate și netede, așa cum se raportează în figura 2(a). În ceea ce privește aspectul capsular în grupul FLACS, celulele epiteliale erau în cea mai mare parte aderente la membrana bazală, în timp ce marginile prezentau un model mai puțin regulat, în dinți de fierăstrău [Figura 2(b)]. Analiza histologică a confirmat faptul că unele dintre probele din grupul B-MICS au prezentat o detașare parțială a stratului epitelial de membrana bazală, în timp ce majoritatea capsulelor din grupul FLACS au demonstrat o aderență continuă a celulelor epiteliale și a membranei bazale (figura 3). În plus, măsurătorile grosimii capsulare între cele două grupuri experimentale au relevat o diferență, deși fără semnificație statistică. În special, probele obținute după tehnica FLACS au prezentat o grosime mai mare în comparație cu capsulele derivate din B-MICS (date neevidențiate).

(a)
(a)
(b)
(b)

. (a)
(a)(b)
(b)

Figura 2
Evaluarea histomorfologică a capsulelor anterioare ale cristalinului. Imagini de contrast de fază care arată marginile și stratul epitelial al capsulelor anterioare ale cristalinului obținute prin tehnica B-MICS (a) și prin chirurgia cataractei asistată de laserul cu femtosecundă (b). Bară: 100 μm.

Figura 3
Analiza histologică a capsulelor anterioare ale cristalinului. Secțiunile transversale ale exemplarelor au fost colorate cu hematoxilină și eozină. În partea dreaptă, imaginile cu mărire mai mare arată detalii ale stratului epitelial în specimenele obținute în urma tehnicilor B-MICS și FLACS. Bară: 10 μm.

În cele din urmă, analiza SEM, așa cum este raportată în figura 4, a relevat cu o definiție mai mare cât de uniformă a fost aderența celulelor epiteliale la membrana bazală și, mai ales, apariția marginilor capsulare. În special, în grupul B-MICS, marginile capsulare aveau o margine regulată, netedă și translucidă [Figura 4(a)]. În caz contrar, marginile capsulelor obținute prin FLACS au demonstrat în mod clar un aspect neregulat și franjurat (Figura 4(b)).

(a)
(a)
(b)
(b)

. (a)
(a)(b)
(b)

Figura 4
Analiza prin microscopie electronică de baleiaj. Imagini reprezentative ale probelor obținute cu tehnicile B-MICS (a) și (b) FLACS, care arată stratul epitelial (stânga) și aspectul marginilor (dreapta) la diferite măriri.

3.3. Evaluarea apoptozei în LECs

Analiza de imunofluorescență focală a arătat că apoptoza a avut loc în celulele epiteliale ale cristalinului din probele obținute fie din grupul B-MICS, fie din grupul FLACS, așa cum se arată în figura 5(a). În timp ce în capsulele obținute prin tehnica chirurgicală manuală prezența caspazei scindate 3 a fost observată în principal în celulele epiteliale mai apropiate de marginile capsulare, probele recoltate în urma tehnicii FLACS au prezentat o colorare mai răspândită față de caspaza scindată 3, de la marginea până la miezul stratului epitelial. Imaginile pseudocolorate ale caspazei cleaved 3 au fost obținute așa cum au fost descrise anterior și raportate în figura 5(b). Analiza densitometrică efectuată pe semnalele imunofluorescente a furnizat date semicantitative ale expresiei efectorului apoptotic caspaza cleaved 3, care a fost semnificativ mai mare din punct de vedere statistic în grupul FLACS, în raport cu grupul B-MICS (Figura 5(b); ).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

Figura 5
Evaluarea apoptozei celulare în celulele epiteliale aderente la capsulele anterioare ale cristalinului. (a) Analiza de imunofluorescență a fost efectuată împotriva caspazei 3 scindate (roșu), iar nucleele au fost contrasemnate cu DAPI (albastru). (b) Imagini pseudocolor (sus) și analiză densitometrică (jos) a caspazei 3 clivate în celulele epiteliale. Bară: 20 μm.

4. Discuție

Utilizarea laserelor femtosecunde constituie cea mai nouă realizare în chirurgia cataractei, începând cu prima lor aplicare clinică în 2008. Datorită necesității din ce în ce mai mari de a răspunde așteptărilor unui rezultat refractiv optim, au fost îndeplinite o mulțime de noi dezvoltări.

Aplicarea laserului femtosecund la chirurgia cataractei a permis îmbunătățirea siguranței și eficienței procedurii, așa cum este bine documentat în literatura de specialitate . Într-adevăr, rapoartele anterioare au demonstrat repetabilitatea și precizia ridicată în executarea celor mai dificile faze ale chirurgiei cataractei, inclusiv capsulotomii anterioare optimizate care au produs o tăietură continuă cu margini ascuțite și cu o bună rezistență la tracțiune .

Studiul nostru a evaluat caracteristicile morfologice ale capsulelor anterioare umane obținute cu tehnica standard de facoemulsificare și, respectiv, FLACS. Acestea din urmă au fost colectate în urma utilizării Ziemer LDV Z8, un laser femtosecundar care profită de un sistem de înaltă frecvență cu energie redusă (rată mare de repetiție a impulsurilor – până la 10 MHz- combinat cu un interval de energie foarte scăzut de 100-150 nJ) și utilizează o interfață optică lichidă pentru a ușura fazele de capsulotomie și fragmentare a cristalinului. Aceste proprietăți au permis obținerea unor eșantioane de capsulă anterioară care dețin o histomorfologie bine conservată, cu celule epiteliale uniform aderente, în comparație cu eșantioanele obținute după tehnica manuală, așa cum au demonstrat analizele prin contrast de fază și SEM. În conformitate cu literatura de specialitate existentă, marginile capsulelor anterioare obținute prin FLACS au fost mai puțin regulate și caracterizate de un model în dinți de fierăstrău, în comparație cu marginea netedă obținută prin tehnica manuală . Modelul observat în grupul FLACS este cel mai probabil atribuibil rasterului de impulsuri de înaltă densitate și opticii de înaltă precizie a laserului Femto LDV Z8, care au ca rezultat multiple spoturi suprapuse care creează o tăietură continuă și curată, asemănătoare cu cea obținută cu tehnica B-MICS .

Probe de capsulă anterioară obținute prin tehnica FLACS au prezentat, de asemenea, o grosime mai mare, în comparație cu capsulele obținute prin B-MICS, cel mai probabil datorită prezenței cortexului aderent la capsula anterioară.

Pe lângă caracteristicile histomorfologice, datele noastre au arătat că apoptoza a avut loc în celulele epiteliale ale capsulelor anterioare obținute prin ambele tehnici chirurgicale. În special, expresia caspazei scindate 3 a fost semnificativ mai mare în probele recoltate în urma FLACS, cu o colorare pozitivă care nu s-a limitat la celulele situate de-a lungul marginii de tăiere, ci s-a răspândit și în nucleul intern al capsulei, sugerând astfel o inducție mai largă a morții celulare. În schimb, în stratul epitelial care aderă la probele de capsulă provenite din procedura B-MICS, apoptoza a fost detectată doar de-a lungul marginii de tăiere, ca o consecință a leziunii mecanice induse de extracția capsulei anterioare mediată de forceps. Acest eveniment apoptotic mai mare care afectează epiteliul monostrat de sub capsula anterioară după FLACS se datorează probabil energiei pulsului laser, formării de plasmă dependentă de fotodisrupție și creării ulterioare de bule de cavitație . Datele noastre sunt în concordanță cu constatările anterioare ale lui Mayer et al. și, în special, o expresie răspândită a efectorului apoptotic caspaza scindată 3 ar putea reprezenta un factor predictiv pozitiv care permite prevenirea opacifierii sacului capsular, prin inhibarea puternică a proliferării celulelor epiteliale reziduale care, în general, se corelează cu răspunsul inflamator postoperator . Din punct de vedere clinic, studiul nostru a evidențiat faptul că, la 3 luni după intervenția chirurgicală, pacienții din grupurile FLACS sau B-MICS au prezentat o îmbunătățire semnificativă din punct de vedere statistic a valorilor acuității vizuale cel mai bine corectate (BCVA), în raport cu măsurătorile inițiale. De remarcat, în ceea ce privește numărul de celule endoteliale, s-a observat o scădere semnificativă din punct de vedere statistic a pierderii de celule endoteliale corneene în grupul FLACS, eveniment care poate fi atribuit unor timpi mai scurți de facoemulsificare. Aceste date sunt în concordanță cu constatările anterioare care demonstrează că chirurgia laser a cataractei este mai puțin traumatică pentru endoteliul cornean pe lângă faptul că oferă un instrument pentru chirurgi pentru a standardiza fazele critice ale chirurgiei cataractei, printr-o curbă de învățare inițială .

5. Concluzii

Utilizarea laserului femtosecundar în chirurgia cataractei permite optimizarea unora dintre cele mai dificile etape ale procedurii, inclusiv capsulotomia, fragmentarea nucleară și inciziile corneene, pe lângă faptul că oferă rezultate mai precise și repetabile. Constatările noastre sunt în concordanță cu literatura de specialitate existentă; cu toate acestea, vor fi necesare studii suplimentare pentru a potrivi aspectele pozitive ale tehnicii manuale și ale laserului cu femtosecundă, prin definirea combinației optime de energie laser, rată de repetiție și dimensiune a spotului, pentru a obține capsulotomii de mai bună calitate, cu margini de tăiere regulate, comparabile cu cele ale capsulorexiei manuale, și pentru a reduce răspunsul inflamator din ochi, prevenind astfel proliferarea celulelor epiteliale ale cristalinului și opacifierea sacului capsular.

Abbreviații

FLACS: Chirurgia cataractei cu laser asistat de femtosecundă
B-MICS: Chirurgia cataractei cu microincizie manuală
mCCC: Capsulorexie curbilinie continuă manuală
IOL: Lentile intraoculare
PCO: Opacifierea capsulei posterioare
BSS: Soluție salină echilibrată
OCT: Tomografie în coerență optică
OVD: Dispozitiv viscoelastic ocular
PBS: Salină tampon fosfat
PFA: Paraformaldehidă
H&E: Haematoxilină/eosină
SEM: Microscop electronic cu scanare
BSA: Albumină serică bovină
DAPI: 4′,6-Diamidino-2-fenilindol.

Dezvăluiri

Această lucrare a fost prezentată parțial la cea de-a 20-a reuniune AICCER 2017 (Associazione Italiana di Chirurgia della Cataratta e Refrattiva), 9-11 martie, Rimini (Italia), 2017.

Conflicte de interese

Autorii declară că nu există conflicte de interese financiare.

.

Articles

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.