Braz J Med Biol Res, Dezembro 1997, Volume 30(12) 1485-1487 (Comunicação Curta)
Plasma testosterona e 11-ketotestosterona de pacu Piaractus mesopotamicus (Cypriniformes, Characidae)
R. Gazola1 e M.I. Borella2
1Escola de Farmácia e Odontologia de Alfenas, Alfenas, MG, Brasil
2Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil
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ResumoTexto
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>AgradecimentosCorrespondência e notas de rodapé
Abstract
Os níveis de testosterona (T) e 11-ketotestosterona (11-KT) do pacu Piaractus mesopotamicus sul-americano foram determinados por radioimunoensaio durante dois estágios do ciclo reprodutivo, i.e., repouso e maturação, e o índice gonadosomático (GSI) foi calculado. Os níveis mais altos de T e 11-KT foram alcançados durante a fase de maturação (T = 2400 ± 56 pg/ml; 11-KT = 2300 ± 60 pg/ml) e os níveis mais baixos foram mantidos durante o período de repouso. O aumento dos níveis de androgênio ocorreu com o aparecimento dos espermatozóides no estágio de maturação, quando o GSI era mais alto.
Palavras-chave: peixe teleost, testosterona, 11-ketotestosterona, radioimunoensaio, ciclo reprodutivo
Alguns vertebrados androgênicos são produzidos pelas gônadas e pelo córtex adrenal, sendo o testículo o local onde a maioria dos androgênios é sintetizada e secretada. Os testículos dos peixes podem sintetizar os andrógenos testosterona (T), androstenediona e 11-ketotestosterona (11-KT) (1,2).
Há muita discussão sobre os papéis da testosterona e da 11-ketotestosterona nos teleóstatos masculinos. Geralmente pensa-se que a testosterona tem um efeito em alguns passos da espermatogénese, como a multiplicação espermatogónia e a formação de espermatócitos (3). O produto metabólico da testosterona, libertado do corpo na urina, também pode atrair o sexo oposto e afectar o comportamento sexual (4). Além disso, a testosterona é um precursor da biossíntese de estrogênio e pode estar implicada no processo de diferenciação sexual (5).
11-ketotestosterona estimula marcadamente o desenvolvimento de características sexuais secundárias em teleosts masculinos (1). Mudanças sazonais nos níveis séricos de hormônio esteróide gonadal têm sido documentadas em várias espécies de teleóstatos de água doce (4-9), incluindo as fêmeas pacu (10). Estes dados contribuíram para a compreensão dos aspectos endocrinológicos da reprodução em peixes.
O pacu, Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887, é um peixe migratório sul-americano de grande importância econômica que habita os rios do complexo de terras baixas de Matogrosso no Brasil Central. Em cativeiro, o pacu mostra um padrão de maturação gonadal semelhante ao observado na natureza; entretanto, a reprodução não ocorre espontaneamente em cativeiro (10).
O objetivo da presente investigação foi relatar as mudanças nos níveis plasmáticos dos esteróides sexuais testosterona e 11-ketotestosterona no pacu masculino em cativeiro durante dois estágios do ciclo reprodutivo, ou seja repouso (R) e maturação (M).
Paquu masculino, Piaractus mesopotamicus (N = 30), cultivado em cativeiro no Centro de Pesquisa e Treinamento em Aquacultura (CEPTA), Pirassunununga, SP, Brasil (zona subtropical, 22o 02′ S, 47o 30′ W), foram utilizados para a determinação da testosterona e 11-ketotestosterona dos esteróides dos testículos durante os estágios de repouso e maturação do ciclo reprodutivo. Foram retiradas amostras de sangue (5 ml/peixe) dos vasos caudais com seringas heparinizadas e todos os peixes foram pesados e sacrificados. O índice gonadosomático (GSI) foi calculado como (gonad weight/body weight) x 100. Amostras de gónadas foram excisadas de cada peixe, fixadas na solução de Bouin e processadas por métodos histológicos de rotina para a determinação da fase gonadal. As amostras de sangue foram centrifugadas e as alíquotas de plasma foram armazenadas a -20oC. O plasma armazenado foi transportado em gelo seco para o Laboratório West Vancouver (Vancouver, British Columbia), onde as concentrações hormonais foram determinadas por radioimunoensaio (RIA).
T e os níveis de 11-KT foram determinados diretamente em plasma não extraído e tratado termicamente (11). Detalhes completos de RIA de esteróides foram descritos em outra parte (12). Nos níveis de 50% T e 11-KT os anticorpos mostraram menos de 6% de reação cruzada com 11-hidroxitestosterona, e menos de 2% com andrenosterona e todos os outros esteróides testados. A validade do ensaio foi confirmada pela demonstração de que as quantidades conhecidas de T e 11-KT adicionadas ao plasma antes da preparação da amostra para RIA eram precisas. A precisão foi determinada pela análise dos coeficientes de variação intra-ensaio e interensaio, que foram inferiores a 10% para os dois ensaios. A sensibilidade dos ensaios foi de 5 pg/ml. Os dados foram relatados como média ± SEM e analisados pela análise de variância (ANOVA) e pelo teste Student-Newman-Keuls de múltiplos intervalos, com o nível de significância definido em P<0,01,
Os perfis de T e 11-KT como determinado pela RIA e o GSI do pacu masculino nos estágios R e M do ciclo gonadal são mostrados na Tabela 1. Os valores plasmáticos de 11-KT foram superiores aos valores de T no estágio R, enquanto no estágio M os valores de T foram superiores aos de 11-KT. No entanto, não foram observadas diferenças significativas entre os níveis de T e 11-KT no mesmo estágio. Os valores de T e 11-KT foram significativamente maiores (P<0,01) durante o estágio M (T = 2400 ± 56 pg/ml; 11-KT = 2300 ± 60 pg/ml) quando o GSI também foi maior (0,6 ± 0,1%).
Spermatogênese e espermatogênese foram considerados sob controle de gonadotropina em teleóstatos (4,13). Em peixes teleost machos os principais andrógenos sintetizados pelos testículos parecem ser testosterona e 11-ketotestosterona (4,6,8,14).
T e 11-KT estão presentes no plasma de pacu macho em quantidades aproximadamente iguais nos mesmos estágios do ciclo gonadal. Resultados similares foram obtidos para o salmão rosa salmonídeo (8), no qual o T e o 11-KT aumentam e diminuem concomitantemente ou às vezes com o T anterior ao 11-KT em cerca de um mês.
No pacu masculino, os níveis de T e 11-KT plasmáticos foram significativamente maiores durante o estágio de maturação do que durante o estágio de repouso do ciclo testicular, e foi observada uma correlação positiva entre os níveis de esteróides plasmáticos determinados e o GSI. Estes resultados estão de acordo com os obtidos para os peixes teleost. Em Scorpius lineatus, por exemplo, os valores de GSI são máximos durante o período de espermatogénese completa e a concentração de 11-KT é maior nos machos antes da desova (15). De acordo com Fostier (4), os níveis de T e 11-KT são caracteristicamente elevados durante períodos de actividade espermatogénica e espermiogénica e caem durante períodos de quiescência reprodutiva nas espécies de salmonídeos. Em Pagrus auratus, os valores de T plasmáticos aumentam nos peixes submetidos à esperminação, e os níveis de T plasmáticos 11-KT seguem um padrão muito semelhante ao dos níveis de T (16). Em machos Dicentrarchus labrax que desovam anualmente, os níveis plasmáticos de T e 11-KT são maiores durante a esperminação, uma vez que os estágios finais de maturação são regulados por esteróides C21 (6).
1. Wei-Xin Z (1988). Testosterona e 11-oxotestosterona mudam durante um ciclo anual e induzem a desova no focinho rombo (Megalobrama anblycephala). Anais do Simpósio Internacional de Guangzhou, PRC, 14-16: 66-72.
2. Vermeulen GJ, Lambert JGD, Van-der-Looy MJW & Goss HJT (1994). Análise cromato-espectrográfica de massa gasosa (GC-MS) de esteróides gonadal no plasma do peixe-gato africano macho, Clarias gariepinus: efeito da castração ou tratamento com hormônio analógico liberador de gonadotropina. Endocrinologia geral e comparativa, 96: 288-297.
3. Billard R, Fostier A, Weil C & Bretão B (1982). Controlo endócrino da espermatogénese em peixes teleost. Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences, 39: 65-79.
5. Liley NR, Breton B, Fostier A & Tan ESP (1986). Alterações endócrinas associadas ao comportamento de desova e estímulos sociais numa população selvagem de truta arco-íris (Salmo gairdneri). Endocrinologia Geral e Comparativa, 62: 145-156. 8. Corante HM, Sumpter JP, Fagerlund UHM & Donaldson EM (1986). Mudanças nos parâmetros reprodutivos durante a migração da desova do salmão rosa, Oncorhynchus gorbuscha (Walbaum). Journal of Fish Biology, 29: 167-176. 9. Scott AP & Sumpter JP (1989). Variações sazonais nos estágios das células germinativas testiculares e nas concentrações plasmáticas de esteróides sexuais na truta arco-íris masculina (Salmo gairdneri) amadurecendo aos 2 anos de idade. Endocrinologia Geral e Comparativa, 73: 46-58. 10. Gazola R, Borella MI, Donaldson EM, Val-Sella MV, Sukumasavin N, Fava-De-Moraes F & Bernardino G (1996). Níveis de esteróides plasmáticos e corticosteróides em pacu Piaractus mesopotamicus fêmea, Teleostei-Characidae. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 29: 659-664. 11. Scott AP, Mackenzie DS & Stacey NE (1984). Mudanças endócrinas durante a desova natural no sugador branco, Catostomus commersoni. Endocrinologia Geral e Comparativa, 56: 350-359. 12. Van der Kraak G, Dye HM & Donaldson EM (1984). Efeitos da LH-RH-etilamina no perfil plasmático de esteróides sexuais em fêmeas adultas de salmão coho. Endocrinologia Geral e Comparativa, 55: 36-45. 13. Planas V & Swanson P (1995). Alterações associadas à maturação na resposta do testículo do salmão às ações esteroidogênicas das gonadotropinas (GTH I e GTH II) in vitro. Biologia da Reprodução, 52: 697-704. 14. Kobayashi M, Aida K & Hanyu I (1986). Alterações anuais nos níveis plasmáticos de gonadotropina e hormonas esteróides em peixes dourados. Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries, 52: 1153-1158. 15. Dedual M & Pankhurst NW (1992). Concentrações de hormônio esteróide plasmático em relação ao ciclo reprodutivo da varredura Scorpius lineatus (Kyphodidae) capturado na natureza. Australian Journal of Marine and Freshwater Research, 43: 753-763. Acreditações Gostaríamos de agradecer ao Dr. E.M. Donaldson, Chefe do Laboratório West Vancouver, pelas medições hormonais, N. Sukumasavin pelo apoio técnico e G. Bernardino pelo fornecimento dos peixes.