Este projecto foca-se na estrutura e função dos oligossacarídeos da zona pelúcida do rato (mZP) e como esta glicocalix extracelular que envolve o ovo interage com moléculas complementares na superfície dos espermatozóides. Evidências anteriores sugerem fortemente que a actividade de ligação dos espermatozóides da mZP está associada à sua porção de oligossacarídeo. Estudos recentes no laboratório do requerente demonstraram pela primeira vez a presença de polilactosaminil glicanos ligados ao N e um trissacarídeo ligado ao O que se pensa ter papéis importantes no reconhecimento e ligação dos espermatozóides. Para avaliar a bioactividade destes oligossacarídeos, a proposta tem cinco objectivos específicos: (1) purificar mZP2 e mZP3, e depois clivar e radiolabelar os glicosacáridos ligados ao N e o trissacarídeo ligado ao O, (2) avaliar o papel funcional dos glicosacáridos ligados ao N e ligados ao O no reconhecimento e ligação dos espermatozóides, (3) isolar e caracterizar quimicamente os glicosacáridos funcionais ligados ao N, (4) sintetizar o trissacarídeo ligado ao O, examinar sua função e o mecanismo subjacente à formação do complexo antígeno-trissacarídeo de superfície do esperma, e (5) identificar e caracterizar quimicamente as proteínas da membrana plasmática do esperma de camundongos (PM) reconhecidas pelas glucanas ligadas ao N e/ou O. Quando concluído, este estudo será o primeiro relatório publicado sobre a diversidade de estrutura-função tanto dos oligossacarídeos ligados ao N quanto dos ligados ao O. Após a identificação das moléculas complementares (ou seja, as glicoproteínas bioactivas nas glicoproteínas ZP e os receptores complementares nos espermatozóides PM) na estirpe seleccionada de ratos experimentais, será possível abordar a questão das relações interespécies e intraespécies durante as interacções de gâmetas opostas. Coletivamente, esses estudos aprofundarão nosso entendimento do mecanismo de interação esperma-ovo e fertilização no rato, e fornecerão as informações necessárias para a regulação dos processos de fertilização em outras espécies, incluindo humanos.