Abstract
A compreensão da dinâmica populacional das populações de mosquitos através da análise da tábua de mortalidade e da susceptibilidade aos insecticidas é importante para avaliar o provável impacto das estratégias de controlo vectorial, bem como para ajudar na concepção de novas intervenções. A variação nas tábuas de vida e outros dados biológicos foi comparada para duas populações de Culex quinquefasciatus Say 1823 de regiões geograficamente isoladas, Gorakhpur e Pune da Índia. Sob um regime de criação padronizado e condições laboratoriais constantes, foram criados mosquitos e comparados os atributos biológicos destas populações. O desenvolvimento e a sobrevivência dos estágios imaturos e adultos de Culex quinquefasciatus foram encontrados significativamente diferentes nas populações de Gorakhpur e Pune. A análise dos principais componentes dos dados morfológicos revelou que as duas populações formam grupos significativamente diferentes que podem ser diferenciados um do outro com base nas variáveis relacionadas ao sifão, sela, brânquias anais e pecten dental. Os resultados de suscetibilidade aos insetos sugerem que as larvas de ambas as áreas eram mais suscetíveis à deltametrina do que ao DDT e ao malatião. O presente estudo fornece informações de base sobre sobrevivência, variação morfológica e suscetibilidade aos inseticidas do Culex quinquefasciatus. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que diferentes áreas geográficas com habitats contrastantes têm influência significativa na sobrevivência e estratégias reprodutivas de Culex quinquefasciatus.
1. Introdução
As estratégias de intervenção de mosquitos comestíveis requerem um conhecimento profundo da dinâmica populacional e do estado de susceptibilidade aos insecticidas. Para melhor compreender a dinâmica populacional das espécies vetoriais, compreender os parâmetros como tempo de desenvolvimento, taxa de sobrevivência e fecundidade de particular importância. Uma tabela de vida descreve o desenvolvimento, sobrevivência e fecundidade de uma coorte e fornece dados básicos sobre os parâmetros de crescimento populacional. O estudo da tábua de mortalidade também fornece informações concisas sobre diferenças inerentes nas estratégias de sobrevivência e reprodução de populações sob diferentes regimes ecológicos e pode ajudar a explicar porque certas espécies proliferam em ambientes particulares.
Culex quinquefasciatus Say é uma espécie de mosquito cosmopolita encontrada em regiões tropicais, subtropicais e temperadas quentes. Cx. quinquefasciatus actua como um vector de vermes filariais , parasitas protozoários , e vários arbovírus . Na Índia, Cx. quinquefasciatus é o principal vetor da filariose bancroftial. A rápida urbanização e industrialização sem instalações adequadas de drenagem são responsáveis pelo estabelecimento do Cx. quinquefasciatus em várias cidades da Índia. Dos estimados 128 milhões de casos globais de filariose linfática, 91% são causados por Wuchereria bancrofti Cobbold . Só a Índia contribui com 40 por cento para a carga mundial da filaríase linfática . As estimativas da carga da doença devido à filariose sugerem que 2,06 milhões de anos de vida ajustados por incapacidade (DALYs) são perdidos na Índia .
Têm sido realizados inúmeros estudos sobre a biologia Cx. quinquefasciatus e a susceptibilidade aos insecticidas . Recentemente, Suman et al. relataram variações significativas na morfologia entre os ovos e os atributos da tábua de mortalidade das quatro cepas de Cx. quinquefasciatus. A comparação de atributos biológicos como suscetibilidade a inseticidas, análise da tábua de mortalidade e variação morfológica de Cx. quinquefasciatus de áreas endêmicas e não endêmicas de filariose linfática não está bem documentada.
Mosquitos que habitam em locais distintos normalmente se adaptam às condições locais. Gorakhpur e Pune estão geograficamente bem separados (~1500 km) (Figura 1) e têm condições climáticas diferentes. Uttar Pradesh (Gorakhpur) é um dos estados endêmicos de filaríase linfática da Índia enquanto Maharashtra (Pune) é não endêmico de filaríase linfática. O ambiente e as características climáticas destes dois ecótipos também são diferentes. Parece possível que o stress ambiental destas duas regiões ecoclimáticas influencie os traços da sua história de vida. Hipotecamos que estas estirpes de mosquitos serão diferentes em sua tabela de vida e atributos biológicos, pois parecem estar adaptadas aos seus respectivos ambientes locais. Para testar esta hipótese, investigamos a análise da tábua de mortalidade, variação morfológica e suscetibilidade aos inseticidas entre estas duas populações de Cx. quinquefasciatus de áreas geograficamente bem separadas na Índia, nomeadamente, Gorakhpur e Pune.
2. Materiais e Métodos
2.1. Declaração de Ética
Todos os animais foram manipulados de acordo com as boas práticas animais, conforme definido pelo Comitê de Ética Animal Institucional (IAEC) filiado ao Instituto Nacional de Virologia (NIV), Pune, Índia. Todos os trabalhos com animais foram aprovados pelo IAEC. As experiências em animais foram realizadas em estrita conformidade com as diretrizes do Comitê de Controle e Supervisão de Experimentos em Animais (CPCSEA), Índia.
2.2. Coleta e Criação de Mosquitos
Alt e larvas de Cx. quinquefasciatus foram amostradas de duas populações para examinar a possibilidade de diferenças populacionais nas áreas endêmicas e não endêmicas de infecção por filaríase linfática. Uttar Pradesh é uma área endêmica do vírus JE e infecção por filaríase linfática e Maharashtra é não endêmica do vírus JE e infecções por filaríase linfática. Gorakhpur (26°45′ N, 83°24′ E) está situada na faixa de Tarai, perto da cordilheira dos Himalaias, no estado de Uttar Pradesh, fronteira com o Nepal, enquanto Pune (18°31′ N, 73°55′ E) está situada perto de Ghats Ocidental da Índia, no estado de Maharashtra. Gorakhpur está situada na região da planície indo-gangética, que recebe 1200-1300 mm de precipitação por ano. A temperatura anual varia entre 8°C no inverno e 42°C no verão. A vegetação desta região é tropical, úmida e decídua. Pune está situada em uma região semi-árida que recebe 700-800 mm de precipitação por ano. A temperatura anual varia entre 12°C no inverno e 38°C no inverno. A vegetação desta região é de folha caduca seca. As larvas foram coletadas de poças e campos de águas subterrâneas temporárias e semipermanentes. A análise morfométrica foi realizada nestes campos mosquitos coletados. No presente estudo, para melhor compreender os parâmetros de base do ciclo de vida de Culex quinquefasciatus, colônias desta espécie de duas áreas ecológicas diferentes foram monitoradas em condições laboratoriais para análise de tabela de vida e suscetibilidade a inseticidas. Os indivíduos de Cx. quinquefasciatus foram identificados usando chaves de Barraud . Espécimes de vales foram depositados no Museu do Instituto Nacional de Virologia, Pune, Índia.
2.3. Análise da Tabela de Vida
A criação do mosquito em ambiente de laboratório impõe um certo grau de pressão de seleção sobre a biologia dos mosquitos. As colônias de mosquitos foram mantidas em condições ambientais padronizadas que eram favoráveis à sobrevivência dos mosquitos. Assim, assumimos que os parâmetros da tabela de vida derivados dos dados recolhidos das estirpes selvagens colonizadas representam estimativas máximas dos seus parâmetros da tabela de vida e são susceptíveis de reflectir diferenças verdadeiras entre estirpes geograficamente isoladas. Suposições semelhantes foram feitas anteriormente por Reisen et al. e Suman et al. para comparar os atributos da mesa de vida de estirpes geograficamente distintas do mosquito Culex.
Colónias de cada população foram mantidas no Instituto Nacional de Virologia Pune em condições laboratoriais padrão a 28 ± 1°C, 70 ± 5% de humidade relativa (HR) e luz: escura (LD) 12 : 12 h. Estas colónias foram mantidas por até sete gerações (aproximadamente 4 meses). Como fonte de nutrição foram oferecidos aos adultos 10% de solução de glicose embebida em almofadas de algodão diariamente. Uma galinha era fornecida como fonte de sangue duas vezes por semana. As aves foram mantidas de acordo com as diretrizes aprovadas pelo Comitê para Fins de Controle e Supervisão de Experimentos em Animais (CPCSEA) da Índia. Balsas de ovos foram coletadas dos mosquitos individuais em copos de plástico (60 ml) contendo água e revestidos com papéis filtrantes, na gaiola. A jangada de ovos individual foi transferida dos papéis filtrantes com a ajuda de agulhas de montagem para taças de plástico (10 cm de altura e 25 cm de diâmetro) onde foram mantidas por 24 a 72 h para incubação. Vinte e quatro horas após a eclosão, as larvas foram mantidas a uma densidade de 100 larvas por bandeja (45 × 30 × 10 cm) contendo 2 L de água desclorada. As larvas foram alimentadas com uma mistura de extracto de levedura e pó de biscoito de cão, polvilhadas na superfície da água. Em cada dia alternado, a água da bandeja de cultivo era trocada cuidadosamente até a pupa. As pupas eram separadas diariamente das larvas e colocadas em tigelas de plástico (10 cm de altura e 30 cm de diâmetro) meio cheias de água. Estas tigelas de plástico com pupas foram colocadas em gaiolas para adultos para emergência. Aos adultos após a emergência foram oferecidos 10% de solução de glicose embebida em almofadas de algodão diariamente. A fecundidade foi estimada com base no número médio de ovos postos por fêmea. A taxa de eclosão dos ovos foi estimada a partir do número de ovos eclodidos por fêmea. A duração dos períodos de desenvolvimento pré-adulto foi determinada observando cada panela diariamente, e todas as peles das larvas foram removidas, marcadas ao instar, e contadas. Houve duas réplicas para cada experiência descrita acima e todo o estudo foi repetido três vezes, resultando na monitorização de cerca de 600 larvas desde o primeiro instar até à idade adulta.
2,4. Análise de Sobrevivência
Cem larvas recém surgidas foram colocadas em bacias. Todas as bacias foram rastreadas com rede de nylon branca, à prova de insectos, para evitar a colonização por outros mosquitos e predadores. Todos os dias o número de larvas vivas e o seu estado de desenvolvimento foram contados e registados. Os mosquitos adultos que surgiram eram contados diariamente, e os sexos eram registrados. A análise da tábua de mortalidade padrão foi feita com base nos dados (Tabela 1). A computação da sobrevivência em estágio específico foi feita de acordo com a fórmula: onde está o número de indivíduos que entraram em estágio e é o número de indivíduos que entraram no estágio anterior.
2,5. Análise Morfológica
Larvas coletadas no campo foram utilizadas para análise morfométrica. Oito caracteres morfológicos e três razões foram pontuados para análise morfológica das larvas do quarto instar (Tabela 3). Índice de sifão, índice de guelras anais e razão de sifão são usados na taxonomia tradicional para distinguir entre espécies e subespécies. Entretanto, Fakoorziba e Vijayan e Kanojia et al. têm usado essas razões até mesmo para distinguir entre diferentes populações. Os caracteres das larvas da quarta estrela foram medidos usando oculares micrométricas com a menor contagem 0,01 mm.
2,6. Bioensaios Mosquitos Adultos
Testes de susceptibilidade aos insecticidas foram realizados usando o protocolo padrão da OMS, kits de testes de susceptibilidade aos insecticidas, e papéis impregnados. Foram testados Cx. quinquefasciatus adultos não alimentados com sangue, com dois a três dias de idade. Três lotes de 20 mosquitos cada foram expostos a testes impregnados com DDT (4%), Deltamethrin (0,05%) e Malathion (5%). Os controles incluíram lotes de mosquitos de cada local expostos a papéis não tratados.
2,7. Bioensaios Larvais
Lotes de quarto instars foram expostos a solução inseticida (DDT, Deltametrina e Malatião) diluída em água destilada. Vinte larvas por concentração e cinco concentrações por teste, proporcionando mortalidades variando de 0 a 100%, foram realizadas. A temperatura foi mantida a 28°C durante todo o teste, e a mortalidade larvar foi registrada após 1 h de exposição e depois corrigida para mortalidade de controle. Três réplicas com larvas de insectos de diferentes lotes de cultivo foram feitas em momentos diferentes, e os resultados foram agrupados. Os dados foram submetidos a uma análise log-probit para determinar os valores de LC50 e LC95 assim como os seus intervalos de confiança de 95% (IC).
2,8. A análise dos dados
Survival foi avaliada através da pontuação do número de mosquitos/larvas mortos todos os dias, para estimar o tempo de vida específico da fase mosquiteira. As larvas que são introduzidas na fase de pupa foram consideradas como dados censurados. A taxa de sobrevivência para cada população de mosquitos foi descrita usando a análise da tábua de mortalidade. Estas curvas de sobrevivência foram então comparadas usando o teste de logrank. A comparação em pares de cada personagem foi feita usando -test, com o ajuste de Bonferroni para as probabilidades (como 11 comparações foram feitas, então usamos como nosso valor de corte). Os dados foram analisados usando as estatísticas multivariadas. A análise multivariada oferece a vantagem de levar em conta todas as variáveis em uma única análise, tornando assim possível avaliar a variação nos caracteres morfológicos das larvas de diferentes locais de coleta. A análise de componentes principais (PCA) foi feita para criar componentes principais não correlacionados a partir das variáveis originais. As pontuações dos fatores estimam os valores reais das observações individuais para os fatores, enquanto a correlação entre as variáveis e os fatores é chamada de carga de fatores. Os componentes principais foram extraídos da matriz de covariância. Valores médios (centróides) e limites de confiança assimptóticos de 95% das pontuações das larvas individuais nos dois primeiros componentes principais foram calculados para cada amostra. Os dois primeiros fatores principais, que explicaram a variação máxima nos dados, foram analisados para entender a variação na morfologia dos diferentes indivíduos.
2,9. Análise dos dados do Bioensaio
Os dados do Bioensaio foram reunidos e analisados (valores LC50 e 95% LC) utilizando a ver SPSS. 16 programa (SPSS Inc., Chicago, IL).
2.9.1. Abbott’s Formula
Dados de bioensaio não foram considerados se as mortalidades de controle fossem >20%. As mortalidades reais foram calculadas contra as mortalidades de controle usando a fórmula da Abbott . Mortalidade corrigida = (% de sobrevivência no experimento controle – % de sobrevivência no experimento tratado)/(% de sobrevivência no experimento controle) × 100,
2,9,2. Linhas de Regressão Log-Probit
Linhas de regressão Log-Probit foram obtidas traçando percentagens de mortalidade ( eixo-probabilidade) contra concentração ( eixo-log). Foram obtidos os valores LC50 (dose que mata 50% da população) e LC95 (dose que mata 95% da população). A adequação das linhas de regressão foi estatisticamente testada usando valores .
3. Resultados
3.1. Desenvolvimento Pré-adulto e Sobrevivência
A duração média e as taxas de sobrevivência das diferentes fases da vida de Cx. quinquefasciatus de Gorakhpur e Pune estão representadas na Tabela 1. A porcentagem de eclosão de ovos foi menor em Gorakhpur (86,5 ± 7.3) em comparação com Pune (91,5 ± 3,8). A taxa de sobrevivência de Cx. quinquefasciatus em Pune (58,063,61) foi significativamente maior do que Gorakhpur (28% ± 0,76) (-teste ). A população de Pune de Cx. quinquefasciatus teve um tempo de desenvolvimento larval ligeiramente maior (14,57 dias) quando comparada com a população de Gorakhpur Cx. quinquefasciatus (13,33 dias). A taxa de sobrevivência larvar da população de Pune (68%) foi maior que a da população de Gorakhpur (42%) de Cx. quinquefasciatus (-test ). As taxas de sobrevivência das duas populações não foram significativamente diferentes (-test ). Não foi observada diferença significativa na taxa de emergência masculina feminina (-test ). A taxa de sobrevivência de Cx. quinquefasciatus adultos de Pune foi maior que a de Gorakhpur (teste logrank; em 1 grau de liberdade, ) (Figura 2).
(a)
(b)
(a)
(b)
3.2. Fecundidade
Comparação da produção de ovos da população de Gorakhpur e população de Pune de Cx. quinquefasciatus é relatada na Tabela 2. A população de Gorakhpur produziu maior quantidade de ovos (151-186 ovos) em comparação com a população de Pune (121-160 ovos). O número de ovos por jangada foi maior na população de Gorakhpur (169 ± 14,5) em comparação com a população de Pune (139,75 ± 15,96) (Tabela 2). O número de ovos/fêmeas foi maior na população de Gorakhpur (676 ± 32) (Tabela 2). Os ovos/fêmeas/dia variaram de 32,19 (1,68) na população de Gorakhpur e 26,59 (2,45) na população de Pune (Tabela 2).
3,3. Variação fenotípica entre as populações
A comparação pareada de caracteres morfológicos usando o teste não pareado revelou que caracteres como comprimento das brânquias anais, comprimento do sifão, dentículos nos dentes pecten apicais, razão sifão e índice das brânquias anais foram significativamente diferentes em ambas as populações estudadas (Tab. 3). A PCA da análise morfológica extraiu quatro fatores com valores próprios superiores a um. Cumulativamente, esses fatores explicaram 79,61% da variabilidade total dos dados. O primeiro factor (F1) explicou 31,97% da variabilidade total enquanto que o segundo factor (F2) explicou 19,73% da variabilidade total e os dois primeiros factores em conjunto explicaram 51,70% da variabilidade total. Os caracteres que apresentaram alta carga de fator em F1 incluíram comprimento do sifão, largura da brânquia anal, índice de sifão e relação sifão/seda, enquanto os caracteres que apresentaram alta carga de fator em F2 incluíram comprimento da brânquia anal, comprimento da sela e índice de brânquia anal. A PCA pôde distinguir dois grupos significativos para Cx. quinquefasciatus de Pune, Cx. quinquefasciatus de Gorakhpur (Figura 3). Nossa hipótese nula de que não há diferença significativa na morfometria das populações de Cx. quinquefasciatus foi rejeitada.
3,4. Insecticide Susceptibility
Baseado nos critérios da OMS, Cx. quinquefasciatus de Gorakhpur e Pune mostraram completa susceptibilidade à deltametrina (100% de mortalidade), potencial resistência ao malatião (~80% de mortalidade), e completa resistência ao DDT (Menos de 80% de mortalidade). Não foi observada diferença significativa na toxicidade das concentrações diagnósticas de DDT, deltametrina e malatião entre as populações de Gorakhpur e Pune de Cx. quinquefasciatus (-test ). A potência larvicida de DDT, deltrametrina e malatião contra Cx. quinquefasciatus está descrita na Tabela 4. A população de Gorakhpur mostrou maior valor de LC50 para DDT e malatião em comparação com a população de Pune. Não foi observada diferença significativa para os valores de LC50 de deltametrina para ambas as populações.
4. Discussão
Os efeitos dos eventos geográficos e ambientais sobre os atributos da tabela de vida e estrutura morfológica das populações locais de Cx. quinquefasciatus foram analisados neste estudo. Nossa hipótese nula de que não há diferença significativa entre os parâmetros do ciclo de vida, morfologia e perfis das populações de Gorakhpur e Pune foi rejeitada. As populações de Gorakhpur e Pune de Cx. quinquefasciatus são significativamente diferentes com relação aos atributos da tabela de vida e caracteres morfológicos.
Gorakhpur e Pune estão a ~1500 km de distância, tendo a área de Gorakhpur a maior amplitude térmica anual, menor umidade relativa durante a maior parte do ano e maior queda pluviométrica anual em relação a Pune. Assim, podemos esperar que as condições ambientais em Pune favoreçam a sobrevivência e o potencial reprodutivo dos mosquitos. A população da área de Gorakhpur exposta a duras condições de sobrevivência na natureza do que a cepa de Pune tinha uma expectativa de vida mais curta (20-23 dias em Gorakhpur vs 24-27 dias em Pune), colocou ovos na maioria dos dias (18-20 dias em Gorakhpur vs 20-22 dias em Pune), e construiu balsas de ovos maiores (169 ± 14,5 ovos/enxerto em Gorakhpur vs 139,75 ± 15,96 ovos/enxerto em Pune), indicando que a cepa de Gorakhpur investiu mais energia na reprodução rápida. A maior sobrevivência do Cx. quinquefasciatus adulto em Pune em comparação com o Gorakhpur é provavelmente causada por causa do habitat e condições ambientais favoráveis em Pune.
A porcentagem de ovos eclodindo não foi significativamente diferente em Gorakhpur (86,5 ± 7,3) em comparação com Pune (91,5 ± 3,8) (-teste ). A porcentagem de eclosão de ovos tem sido relatada como 82,1% em Culex pipiens fatigans (sinônimo de Cx. quinquefasciatus; Gomez et al. ), 79,6% em Cx. quinquefasciatus (Suleman e Reisen ), e 80,5%-95,6% em Cx. quinquefasciatus (Suman et al. ; cinco populações da Índia) que estão próximas aos valores relatados no presente estudo (Tabela 1). O tempo médio de desenvolvimento desde o ovo até adulto variou pouco, mostrando uma variação de ≤1 dia (15,4 dias em Gorakhpur e 16,5 dias em Pune). Esses valores foram superiores ao período de desenvolvimento relatado para Cx. quinquefasciatus coletado nas áreas de Bikaner, Jamnagar e Bhatinda na Índia. Foi documentado que as variações nas taxas de desenvolvimento de mosquitos imaturos dependem das condições do habitat . Os resultados obtidos neste estudo também sugerem que o habitat e as condições ambientais desempenham um papel importante nos atributos biológicos dos mosquitos.
A expectativa de vida é um importante atributo da capacidade vetorial, pois desempenha um papel importante nos patógenos de transmissão. Estudos sobre a transmissão de filariose linfática indicam que as microfilariose requerem 16-17 dias no vetor mosquito para alcançar o estágio infeccioso. Este período encurta com temperatura e umidade mais altas mas aumenta até 42 dias a temperaturas mais baixas . Como a análise da tabela de vida sugere que a população de Gorakhpur investe mais energia na reprodução, é provável que tome farinha de sangue com mais frequência. A mordida repetida pode causar a propagação de doenças rapidamente. Temperaturas ambientes mais elevadas e a natureza de mordedura frequente de Cx. quinquefasciatus de Gorakhpur podem ser responsáveis por casos frequentes de filariose linfática nesta área.
Análise multivariada de caracteres morfológicos revelou que duas populações de Cx. quinquefasciatus diferem significativamente em caracteres morfológicos (Tabela 2; Figura 3(a)). A análise dos principais componentes dos dados sugeriu que as variáveis relacionadas ao sifão, sela, brânquias anais e dentes pecten foram os caracteres distintivos mais importantes (Figura 3(b)). As brânquias anais são mais longas na população de Gorakhpur do que na população de Pune (Tab. 3). Como a concentração de sal na água aumenta, o comprimento das brânquias anais começa a reduzir . A concentração de sal da água de Pune pode ser uma razão provável por trás da redução do comprimento das brânquias anais. As causas das diferenças morfológicas entre as populações são muitas vezes bastante difíceis de explicar. O fenótipo está sob o duplo controlo das condições ambientais e do genótipo, mas as mudanças morfológicas podem ser rápidas quando ocorrem diferentes condições ambientais. Hipotecamos que a transição do comprimento da sela e das brânquias anais nas populações de Cx. quinquefasciatus é uma consequência da selecção das condições ambientais.
A história da resistência aos insecticidas nas espécies Culex sugere que os membros do género Culex têm uma reputação notória de desenvolver resistência aos insecticidas, incluindo organofosforados, carbamatos e piretróides . Na Índia, a primeira evidência de desenvolvimento de resistência ao DDT em Cx. quinquefasciatus foi observada em 1952, a partir de uma aldeia perto de Delhi . Mais tarde, várias áreas como Nagpur, Pune, Patna e Rajahmundry relataram resistência em mosquitos Culex a vários inseticidas como BHC, fenitrothion, DDT, malathion e temephos . A investigação de Mukhopadhyay et al. não mostrou mortalidade em Cx. quinquefasciatus adultos contra os 4% de DDT e 5% de malatião. Cerca de 8% e 14% de mortalidade foram encontrados em larvas de Cx. quinquefasciatus em 0,125 e 3,125 mg/l de DDT e malatião, respectivamente. O presente estudo conclui que as larvas de ambas as populações de Cx. quinquefasciatus são altamente susceptíveis à deltametrina. Entretanto, as populações de Cx. quinquefasciatus nessas áreas mostraram resistência ao DDT e ao malatião. Portanto, como um estudo de base, pode-se concluir que no futuro o uso prudente de estratégias de controle vetorial deve ser aplicado para reduzir o incômodo de Cx. quinquefasciatus em Gorakhpur e Pune.
Em resumo, este estudo fornece informações de base sobre sobrevivência, variação morfológica e suscetibilidade inseticida de populações de Culex quinquefasciatus. As condições climáticas de Pune parecem mais permissivas para o desenvolvimento e sobrevivência de Culex quinquefasciatus. Os resultados da susceptibilidade aos inseticidas revelaram que no futuro serão necessárias diferentes medidas de controle para reduzir as populações de Cx. quinquefasciatus. Este conhecimento, juntamente com uma melhor compreensão da ecologia do Cx. quinquefasciatus, irá permitir a utilização de recursos de saúde pública localmente específicos e eficientes na redução da carga de Cx. quinquefasciatus.
Conflito de Interesses
Os autores declararam que não existem interesses concorrentes.
Financiamento
O estudo foi apoiado pelo Conselho Indiano de Pesquisa Médica, Governo da Índia. A agência financiadora não teve nenhum papel no desenho do estudo, coleta e análise de dados, decisão de publicar, ou preparação do trabalho.
Agradecimentos
Os autores agradecem ao Dr. A. C. Mishra, Diretor, Instituto Nacional de Virologia, Pune, pelas facilidades e encorajamento. Apreciam a assistência técnica prestada pelo pessoal de campo do NIV. Eles agradecem ao Dr. Neelesh Dahanukar, IISER, Pune, pelas valiosas sugestões e ajuda na análise estatística.