De miniaturisering van high-throughput screening (HTS) assays is een veelbesproken en onderzochte strategie met als doel de screeningkosten te verlagen en de snelheid te verhogen zonder afbreuk te doen aan de kwaliteit van de gegevens. In dit verband worden de vloeistofbehandelingstechnologieën steeds verder verbeterd. Een nieuwe en veelbelovende ontwikkeling is de opkomst van nanoliterdispensers, die in staat zijn verbindingen direct over te brengen naar assay-microtiterplaten. In deze studie hebben wij de miniaturisatie van een HTS kinase assay onderzocht en de real life prestaties vergeleken van de huidige state-of-the-art luchtverplaatsing transfer technologie (MiniTrak V System) en een capillaire nanoliter dispenser (CyBi-HummingWell). De robuustheid en doeltreffendheid van de geminiaturiseerde assay-formaten werden vergeleken door staurosporine te testen om dosis-respons curven te genereren en 340 eerder geïdentificeerde actieve verbindingen. Met behulp van het MiniTrak-apparaat werd de assay geminiaturiseerd van 18 microL tot 6 microL in 384-well- en 1536-well-plaatformaten. Met behulp van de nanoliter-dispenser werd de assay geminiaturiseerd tot 5 microL in 1536-well-plaatjes. De Z’-factoren die voor elk assayformaat werden verkregen, lagen consistent boven 0,5. De hier gepresenteerde gegevens beschrijven de reproduceerbaarheid van de resultaten verkregen met de twee overdrachttechnologieën en wijzen op mogelijke problemen voor hitidentificatie.

Articles

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.