RESE DESIGN AND METHODS
In totaal 55 patiënten met type 2 diabetes die werden behandeld met alleen een dieet en met sulfonylureas werden ingeschreven in de huidige studie (tabel 1). De BMI werd geschat door het lichaamsgewicht (in kilogrammen) te delen door het kwadraat van de lichaamslengte (in meters).
- View inline
- View popup
- Download powerpoint
Diabetes werd gediagnosticeerd volgens de criteria van de American DiabetesAssociation (14). Proefpersonen met nuchtere plasmaglucosewaarden ≥ 7,0 mmol/l werden voorlopig gediagnosticeerd als diabetici. Daarna ondergingen de proefpersonen een orale glucosetolerantietest (OGTT) van 75 g (Trelan G 75; Shimizu, Shizuoka, Japan), en bij de proefpersonen met nuchtere plasmaglucosewaarden ≥7,0 mmol/l of 2-uurs plasmaglucosewaarden ≥11,1 mmol/l werd diabetes vastgesteld. Diabetes type 2 werd gedefinieerd aan de hand van de graad van insulinesecretie, de leeftijd, het beginpatroon en het bestaan van familieanamnese van diabetes.
Bij opname werden 50 patiënten behandeld met alleen een dieet en 5 met sulfonylureas (glibenclamide 2,5-5,0 mg/dag). Geen van de patiënten werd behandeld met insuline of insuline-sensibiliserende middelen. Vijftien patiënten hadden perifere neuropathie en eenvoudige diabetische retinopathie en 10 hadden microalbuminurie. Macrovasculaire complicaties werden niet gedetecteerd.
Voor het begin van de studie werd van alle proefpersonen geïnformeerde toestemming verkregen.
Studieopzet
Na opname werden de patiënten gedurende 6 weken onderworpen aan dieet- en oefentherapie. De dieetbehandeling was als volgt: 1.440-1.720 kcal/dag met een dieet bestaande uit 20% (energie) eiwit, 25% vet, en 55% koolhydraten. De naleving van de dieetbehandeling werd tweemaal per week gecontroleerd door een diëtiste. Tijdens de oefentherapie liepen de patiënten dagelijks ongeveer 10.000 stappen; het aantal stappen per dag werd geteld met een stappenteller, en de telling werd elke dag gecontroleerd door een verpleegkundige. Het dieet en de oefentherapie werden niet gewijzigd tijdens de behandeling.
De bloedwaarden van glucose, HbAlc, en insuline; de waarden van clamp-IR, HOMA-IR, en de eenvoudige indexen van insulinegevoeligheid (de 30-min en 2-h glucose, 30-min en 2-h insuline, en 30-min en 2-h insulinegevoeligheidsindex verkregen tijdens een 75-g OGTT)(9,10); en lichaamsvet gebied en bloeddruk werden gemeten bij alle proefpersonen binnen 1 week na opname en 1 week voor ontslag. Sulfonylureas werden 1 dag voor de clampstudie ingetrokken; geen van de patiënten kreeg na de eerste clampstudie nog een geneesmiddel tijdens de behandeling.
De plasmaglucosespiegel werd gemeten met een geautomatiseerde enzymatische methode. HetHbAlc (normale waarde 4,3-5,8%) werd gemeten met behulp van hogedrukvloeistofchromatografie. Seruminsuline werd gemeten met een immunoradiometrische testkit (Insulin Riabead II kit; Dainabot, Tokio). Deze kit bevatte125I-gelabelde en niet-gelabelde anti-humane insuline mousemonoclonale antilichamen. De intra- en interassay variatiecoëfficiënten van de test waren respectievelijk 1,9 en 2,0%.
Clamp IR werd geëvalueerd met de hyperinsulinemische-euglycemische clamp-techniek waarbij gebruik werd gemaakt van de kunstmatige pancreas (STG-22; Nikkiso, Tokio)(1,7,15,16,17,18).In het kort, om 8.00 uur ’s morgens, twee teflon beklede canules ingebracht; een werd ingebracht in de linker antecubitale ader voor infusie van insuline (Humulin R; Eli Lilly, Indianapolis, IN) en 10% glucose, en de andere werd ingebracht in de rechter contralaterale verwarmde hand ader voor arteriële bloedafname.Na de basislijn bloedafnames voor glucose en insuline bepalingen, werd een hoge dosis insuline toegediend tijdens de eerste 10 minuten in een logaritmisch dalende manier om het serum insuline snel te verhogen tot het gewenste niveau (1.200 pmol / l); dit niveau van insuline werd vervolgens gehandhaafd door een continue insuline infusie met een snelheid van 13,44 pmol – kg-1- min-1 voor 120 min. De gemiddelde insulinespiegel bereikte een stabiel niveau tussen 90 en 120 minuten na het begin van de clampstudie (vóór de behandeling 1.224,0 ± 208,8 pmol/l; na de behandeling 1.177,2 ± 232,8 pmol/l).De bloedglucose werd continu gecontroleerd en op het gewenste niveau (5,24 mmol/l) gehouden door een infuus met 10% glucose. De gemiddelde hoeveelheid glucose die gedurende de laatste 30 minuten werd toegediend, werd beschouwd als de glucose-infusiesnelheid, die werd genomen als de waarde van de IR-klem.
HOMA werd gebruikt om de insulineresistentie vóór en na de behandeling te evalueren(2). Ervan uitgaande dat normale proefpersonen van <35 jaar met een normaal gewicht een IR van 1 hebben, kunnen de waarden voor een patiënt worden berekend uit de nuchtere insuline- en glucoseconcentraties met de volgende formule: nuchtere seruminsuline (μU/ml) × nuchtere plasmaglucose (mmol/l)/22,5. Bij elke proefpersoon werden bloedmonsters voor de HOMA-IR-metingen genomen vanaf 8.00 uur ’s morgens na een nachtelijke bedrust. We onderzochten drie afzonderlijke insulinemonsters die met een tussenpoos van 15 minuten werden genomen, en het gemiddelde insulineniveau werd gebruikt voor de berekening van de HOMA-IR. Om de reproduceerbaarheid van HOMA-IR te schatten, analyseerden we een tweede HOMA-IR bij alle patiënten bij een andere gelegenheid binnen 5 dagen na de eerste HOMA-IR voor en na de behandeling. De variatiecoëfficiënt voor HOMA-IR vóór de behandeling was 10,2% en 9,8% na de behandeling.
De 75-g OGTT werd gestart vanaf 8:00 A.M. na een nachtelijke bedrust (honger voor 11:00 h). Bloed werd afgenomen bij 0, 30, en 120 min, en plasmaglucose en serum insuline niveaus werden geëvalueerd.
Het lichaamsvet gebied werd geëvalueerd zoals eerder beschreven(19). De totale dwarsdoorsnede, het intra-abdominale viscerale vetgebied, en het subcutane vetgebied werden gemeten door middel van abdominale computertomografie genomen ter hoogte van de navel. Elk intraperitoneaal gebied met dezelfde dichtheid als de subcutane vetlaag werd gedefinieerd als een visceraal vetgebied.
De bloeddruk werd driemaal bepaald in rugligging na een rustperiode van 5 minuten.
Statistische analyses
De gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD. Student’s t test werd uitgevoerd om de gemiddelden van variabelen gemeten voor en na de behandeling te vergelijken. De relatie van de IR-klem met verschillende klinische indexen van insulinegevoeligheid werd geëvalueerd door middel van univariate regressieanalyse.Vergelijking van de regressielijnen, met betrekking tot hellingen en intercepts, tussen HOMA-IR en de IR-klem voor en na de behandeling werd uitgevoerd door middel van een covariantieanalyse; in deze analyse werd de F-test gebruikt om het verschil tussen twee regressiecoëfficiënten te evalueren. Om een normale verdeling te benaderen, werden de waarden van HOMA-IR en IR-klem logaritmisch getransformeerd vóór de regressie- en covariantieanalyse. Student’st test en correlaties werden uitgevoerd met het softwareprogramma StatView 4.0 (Abacus Concepts, Berkeley, CA) voor de Macintosh. Covariantieanalyses en regressieanalyses werden uitgevoerd met het PRISM 2.0 softwareprogramma (Graph-Pad software, San Diego, CA) voor de Macintosh. Een waarschijnlijkheidswaarde van P < 0,05 bij tweezijdige tests werd als statistisch significant beschouwd.