Abstract

Purpose. Vergelijkende evaluatie van morfologische eigenschappen van anterieure capsules en apoptose inductie in epitheelcellen na femtosecond laser-assisted cataract chirurgie (FLACS) en standaard phacoemulsificatie chirurgie. Methoden. Groep 1: 30 FLACS anterieure capsulotomieën en groep 2: 30 manuele anterieure continue curvilineaire capsulorhexen. Alle patiënten werden door dezelfde ervaren chirurg geopereerd. Morfologische kenmerken van de voorste kapsels en inductie van apoptose in epitheelcellen werden geëvalueerd. Resultaten. Alle patiënten vertoonden een significante gemiddelde verbetering van de best gecorrigeerde gezichtsscherpte (BCVA) 3 maanden na de operatie, en er traden geen grote intraoperatieve of postoperatieve complicaties op. Het capsulaire epitheel bleek in beide groepen behouden te zijn. Analyse met behulp van elektronenmicroscopie toonde onregelmatige zaagtandvormige randen aan in de capsules van groep 1, terwijl de capsules van groep 2 regelmatige en gladde randen vertoonden. Een statistisch significant hogere expressie van de afgeleide apoptotische effector gekliefd caspase 3 werd waargenomen in groep 1. Conclusies. Het zaagtandpatroon was waarschijnlijk het gevolg van de progressieve opeenvolging van laserpulsen op het kapsel. De lage energie/hoge frequentie eigenschappen van de laser puls, gecombineerd met een overlappend puls patroon, resulteerde in een zeer continue morfologie van de kapsel randen. De hogere apoptose inductie in FLACS groep zou te wijten kunnen zijn aan fotodisruptie-afhankelijke plasma generatie en vorming van cavitatie bubbels.

1. Inleiding

Cataractchirurgie is wereldwijd de meest uitgevoerde chirurgische ingreep, met een toenemend aantal chirurgische procedures tot 24 miljoen per jaar, volgens schattingen van de WHO.

Sinds enkele jaren is de phacoemulsificatie-techniek de standaardmethode voor cataractextractie en de voortdurende technische verbeteringen, zoals de heldere corneale microincisies, het gebruik van opvouwbare intraoculaire lenzen en de toepassing van lagere ultrasone energie voor de fragmentatie van de lens, hebben cataractchirurgie efficiënt en veilig gemaakt. De bimanuele micro-incisie cataractchirurgie (B-MICS) is een minimaal invasieve variant van de traditionele coaxiale phacoemulsificatie, die heldere hoornvliesmicroincisies van 1,4 mm mogelijk maakt, en gebruik maakt van een mouwloze phacotip met een afzonderlijke irrigerende chopper die een hogere stabiliteit van de voorste kamer geeft en de mogelijkheid om zowel de rechter- als de linkerhand te gebruiken tijdens de chirurgische ingreep.

De laatste update in cataractchirurgie was de introductie van femtosecond lasertechnologie. Uitgaande van femtosecond lasers die voor het eerst werden geïntroduceerd voor corneale chirurgie met het doel om corneale flappen voor refractiechirurgie te produceren, werken de meeste van de nieuwste generatie femtosecond lasers in cataractchirurgie met een herhalingssnelheid tot 160 kHz in combinatie met een energiebereik van maximaal 10-15 μJ .

Gebaseerd op de fotodisruptie principes, stellen dergelijke lasers ons in staat om enkele van de moeilijkste delen van de procedure optimaal te standaardiseren, inclusief capsulotomie, nucleaire fragmentatie, en corneale incisies, naast het leveren van meer nauwkeurige en reproduceerbare resultaten, in vergelijking met handmatige benaderingen .

Tot de komst van femtosecond laser technologie, is handmatige continue curvilineaire capsulorhexis (mCCC) de standaardmethode geweest voor het openen van het voorste kapsel in cataractchirurgie of refractieve lensvervanging. Femtosecond laser geassisteerde cataractchirurgie (FLACS) heeft nu een revolutie teweeggebracht in deze belangrijke chirurgische stap, door voorspelbare en curvilineaire capsulotomieën te creëren die resulteren in een verbeterde overlap tussen kapsel en intraoculaire lens (IOL) en een betere centrering en positie van de IOL dan met de manuele techniek. Eerdere bevindingen hebben met name aangetoond dat FLACS-capsulotomieën een herhaalbare en precieze grootte hebben, gecentreerd zijn, en bijgevolg een betere IOL-centratie en minder kans op IOL-kanteling bieden.

In verscheidene studies is de morfologie van de randen en de gladheid van FLACS-capsulotomieën onderzocht, die worden gecreëerd door specifieke lasergolflengte, pulsenergie, pulsduur, pulspatroon, herhalingssnelheid en spotgrootte. Voorlopige analyses van de capsules toonden een postzegel aspect met een significante ruwheid, waarschijnlijk veroorzaakt door verschillende factoren, waaronder de laserenergie gebruikt om de capsulotomies te creëren .

Bovendien is posterieure kapselopacificatie (PCO) een van de meest terugkerende lange termijn complicaties van cataractchirurgie. Er zijn tot nu toe veel studies uitgevoerd om te bepalen welke factoren van invloed kunnen zijn op de ontwikkeling van PCO, waaronder het IOL-ontwerp, de toediening van therapeutische middelen, de chirurgische techniek zelf, en andere chirurgische procedures om het achterste kapsel schoon te maken.

Zoals gerapporteerd in de literatuur, wordt het lenskapsel blootgesteld aan mechanische of fotodisruptieve schade, wanneer ofwel capsulorhexis ofwel capsulotomie wordt uitgevoerd, met als gevolg het afsterven van de epitheelcellen. De hypothese is dat femtosecond laser redelijkerwijs apoptose in hogere mate zou kunnen induceren.

Het doel van deze studie was om de morfologische kenmerken van het menselijke voorste lenskapsel te evalueren, zelfs op ultrastructureel niveau, na cataractchirurgie uitgevoerd door middel van respectievelijk handmatige techniek en FLACS. Bovendien onderzochten we of apoptose werd geïnduceerd in monolaag epitheel onder het voorste lenskapsel, na de twee chirurgische benaderingen.

2. Materialen en Methoden

De experimentele studie werd goedgekeurd door de Human Research Ethics Committee van de Universiteit van Modena en Reggio Emilia (Modena, Italië) en werd uitgevoerd in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki in het Instituut voor Oogheelkunde, Universiteit van Modena en Reggio Emilia. Patiënten met cataract LOCS III graad 2 of 3 en een correcte gezichtsscherpte van 5/10 of slechter werden in de studie opgenomen. Patiënten met een oculair trauma, pseudoexfoliatiesyndroom of andere oculaire comorbiditeiten werden uitgesloten. De studie werd uitgevoerd na schriftelijke toestemming van de patiënten die ofwel traditionele manuele cataractextractie (B-MICS) ondergingen, ofwel femtosecond laser geassisteerde cataractchirurgie door gebruik te maken van de femtosecond laser Ziemer LDV Z8. Alle chirurgische procedures werden uitgevoerd door dezelfde ervaren chirurg (G.M.C.).

2.1. Chirurgische Technieken

Een consistente mydriase werd verkregen met instillatie van 10% fenylefrine en 1% cyclopentolaat en een locoregionale anesthesie met peribulbar blok werd uitgevoerd (1,5 mL lidocaïne 2% en 1,5 mL bupivacaïne 0,5%).

2.1.1. FSL-Assisted Technique

We zorgvuldig toegepast een wegwerp afzuigring om het oog, gecentreerd over de limbus. De zuigring werd gevuld met evenwichtige zoutoplossing (BSS) om een vloeibare interface te creëren, en de mobiele arm van het lasersysteem werd gedokt over de corneale apex. De oculaire structuren werden getoond door het geïntegreerde optische coherentie tomografie (OCT) systeem en de behandelingsparameters werden op een aangepaste manier bepaald door gebruik te maken van de laserplatform instellingen wizard. De energie en frequentie laserpuls instellingen waren 900 mW, 1 MHz voor capsulotomie; 950-1000 mW, 2 MHz voor phacofragmentatie; 1200-1300 mW, 2 MHz voor corneale incisies. De laserbehandeling begon met lensfragmentatie met een achtdelig pie-cut patroon, gevolgd door een anterieure capsulotomie van 5,2 mm diameter. Tenslotte voerde de laser twee 1,4 mm corneale microincisies uit op 10 uur en 2 uur, respectievelijk. Aan het einde werd de afzuigring verwijderd van het oogoppervlak om verder te gaan met de phaco-procedure. De chirurg controleerde de doorgankelijkheid van de CCI’s met behulp van een gladde spatel, eerst met een loodrechte helling op de helling van de limbus en vervolgens met zachte bewegingen langs de incisie, om deze volledig van links naar rechts te openen. De voorste oogkamer werd gevuld met oculair viscoelastisch middel (OVD) om verder te gaan met het verwijderen van het voorste kapsel, met aandacht voor eventuele weefsel capsulaire bruggen om kapsel fuga te vermijden.

Hydrodissectie en hydrodelineatie werden uitgevoerd met behulp van een 26-gauge canule met injectie van BSS onder de voorste kapselrand, met aandacht voor de bewegingen van de luchtbellen, om eventuele posterieure kapselblok en rupturen te vermijden. Bimanuele facoemulsificatietechniek werd gebruikt om de nucleus te aspireren met een 20-gauge 30 graden gehoekte mouwloze probe en een 19-gauge irrigerende chopper (Oertli-Instruments AG). Tenslotte werd bimanuele irrigatie/aspiratie van de overblijvende cortex uitgevoerd met twee 21-gauge sondes met een ovaalvormige doorsnede (21-gauge irrigatie handstuk glad, 21-gauge aspiratie handstuk ruw, Bausch & Lomb) gevolgd door polijsten van het achterste kapsel. Alle intraoculaire lenzen werden zonder complicaties in de kapselzak geplaatst. Anterieure lenskapsel verwijdering na ofwel handmatige anterieure capsulorhexis of FSL-ondersteunde anterieure capsulotomie wordt getoond in figuur 1.

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

Figuur 1
Anterieure verwijdering van het lenskapsel bij B-MICS en FLACS chirurgische technieken. (a) Manuele anterieure capsulorhexis met micro-forceps; (b) uitzicht van de lens na FLACS en anterieure capsulotomie verwijdering met micro-forceps.

2.1.2. Standaardtechniek

De chirurg voerde twee biplanaire trapeziumvormige incisies van 1,4 mm uit op respectievelijk 10 uur en 2 uur, met een voorgekalibreerd mes en een handmatige 5 mm continue curvilineaire capsulorhexis (mCCC). Hydrodissectie werd uitgevoerd met een 26 gauge canule en phacoemulsificatie met een 20 gauge, 30 graden gehoekte sleeveless probe en een irrigerende chopper (Bragamele 19 gauge). De faco-fractuur werd verkregen met de stop-and-chop techniek. Irrigatie/aspiratie werd uitgevoerd met twee 21-gauge sondes met een ovaalvormige doorsnede (21-gauge irrigatiehandstuk glad Stellaris, 21-gauge aspiratiehandstuk ruw, Bausch & Lomb). Bij beide technieken werd de IOL geïmplanteerd zonder vergroting van de hoofdincisie; de incisies werden gehydrocuteerd. De BunnyLens AF IOL (Hanita Lenses, Israël) werd geïmplanteerd via een 1,4 mm microincisie met de wondondersteunde techniek via de ViscoJect™ BIO 1.5 injector. Aan het einde van de operatie werd de OVD verwijderd en werden de incisies om veiligheidsredenen gehydrateerd.

Postoperatieve therapie bestond uit tobramycine en dexamethason oogdruppels vier maal per dag gedurende 15 dagen, gevolgd door flurbiprofen oogdruppels drie maal per dag gedurende nog eens 15 dagen.

2.2. Morfologische evaluatie: Fasecontrast, histologische, en Scanning Electron Microscopy Analyses

Anterior lens capsule exemplaren verkregen uit een van beide FSL-assisted of standaard technieken werden onmiddellijk gewassen met fosfaat buffer zoutoplossing (PBS) na chirurgische extractie. Om de morfologie en de randen van de capsules verkregen na zowel de cataract chirurgische technieken te evalueren, werden specimens verwerkt voor fasecontrast, histologische en scanning elektronenmicroscopie analyses. Een deel van de monsters werd gefixeerd met 4% paraformaldehyde (PFA) in PBS gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur. Vervolgens werden de monsters driemaal gewassen met PBS en werden geobserveerd met behulp van een Nikon Eclipse TE2000-U omgekeerde microscoop. Representatieve fase contrast beelden werden verkregen met een CCD Hamamatsu ORCA 285 camera. Daarna werden monsters verwerkt voor histologische analyse, door het ondergaan van dehydratie met graded ethanol, clearing en inbedden in paraffine. Vijf urn dikke seriële secties werden gesneden voor elk monster en routine hematoxyline / eosine (H&E) kleuring werd uitgevoerd om de morfologische details te analyseren en de dikte van de voorste kapsels te meten.

Een ander deel van de verzamelde monsters werd gewassen, direct na de chirurgische procedures, met 0,1 M pH 7,4 Sorenson’s fosfaatbuffer (PB) en gefixeerd met 1% glutaaraldehyde in 0,1 M pH 7,4 PB. Na drie wasbeurten in PB werden de voorste lenskapselmonsters gedehydrateerd met gradiënt ethanol, totdat SEM-observatie werd uitgevoerd. SEM beelden werden verkregen met een Nova NanoSEM 450 (FEI) scanning elektronenmicroscoop (SEM).

Het belangrijkste doel van deze analyses was de evaluatie van de epitheelcellen laag, de aanwezigheid van franjes in de capsule randen, en de ruwheid / gladheid van de randen.

2.3. Evaluatie van apoptose in LECs

Om te evalueren of apoptose optrad in lensepitheelcellen die zich hechten aan voorste lenskapsel na B-MICS chirurgische benadering en na het vrijkomen van pulsenergie door femtosecond laser, werden monsters verwerkt voor confocale immunofluorescentie-analyse, zoals eerder beschreven. In het kort werden de met 4% gefixeerde capsules gewassen met PBS en verzadigd met PBS dat 3% boviene serumalbumine (BSA) bevatte gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur. Vervolgens werden de monsters gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met een konijn anti-cleaved caspase 3 primair antilichaam (Cell Signaling), verdund 1 : 50 in PBS dat 3% BSA bevat. Na het wassen in PBS met 3% BSA werden de monsters geïncubeerd met een geit anti-rabbit Alexa546 secundair antilichaam (Life Technologies), verdunning 1 : 200 in PBS met 3% BSA. De monsters werden vervolgens gewassen met PBS, gekleurd met 1 mg/ml 4′,6-diamidino-2-fenylindool (DAPI) in PBS gedurende 1 minuut, en vervolgens gemonteerd met antifading medium. Fluorescerende monsters werden geobserveerd door een Nikon A1 confocale laser scanning microscoop. De confocale seriële secties werden verwerkt met ImageJ software om driedimensionale projecties te verkrijgen en beeld rendering werd uitgevoerd met behulp van Adobe Photoshop Software .

2.4. Statistische Analyse

De gegevens werden geëvalueerd met statistische software (GraphPad Prism Software versie 7 Inc., San Diego, CA, USA). Verschillen tussen de twee experimentele groepen werden geanalyseerd met de Student’s -test. De gegevens werden uitgedrukt als gemiddelde ± SD. Elke experimentele evaluatie werd in drievoud uitgevoerd. In elk geval werd de significantie vastgesteld op .

3. Resultaten

3.1. Klinische waarnemingen

Voor groep 1 (FLACS) werden 30 ogen (15 rechter ogen en 15 linker ogen) van 30 patiënten (10 mannen en 20 vrouwen) in de studie opgenomen; de gemiddelde leeftijd was 74,07 ± 8,48 jaar. Voor Groep 2 (B-MICS), werden 30 ogen (13 rechter ogen en 17 linker ogen) van 30 patiënten (8 mannen en 22 vrouwen) geïncludeerd in de studie; de gemiddelde leeftijd was 75.72 ± 9.16 jaar. BunnyLens AF IOL werd geïmplanteerd in alle ogen. Alle IOLs werden in de zak geïmplanteerd.

De totale operatietijd was 17,89 ± 3,80 minuten in Groep 1, terwijl dit in Groep 2 12,63 ± 2,10 minuten was, met een verschil dat statistisch significant bleek te zijn (). In Groep 1 werden geen onvolledige capsulotomie of kapselknopen waargenomen; bovendien werden in beide groepen geen intraoperatieve grote complicaties noch postoperatieve complicaties geregistreerd.

Drie maanden na de operatie werd een gemiddelde verbetering van het BCVA van 0,460 ± 0,249 LogMar waargenomen in Groep 1 (ten opzichte van de uitgangswaarden). Op dezelfde manier werd in Groep 2 een gemiddelde verbetering van de BCVA waargenomen van 0,417 ± 0,150 LogMar (vergeleken met de uitgangswaarden), op hetzelfde evaluatiemoment. Er werden geen statistisch significante verschillen in verbetering van de gezichtsscherpte waargenomen tussen de twee groepen.

Met betrekking tot astigmatisme en corneale pachymetrie, detecteerden we geen statistisch significant verschil tussen basislijn en postoperatieve waarden, met Student’s -test hetzij binnen elke groep of tussen de twee groepen ().

Ten slotte, met betrekking tot het aantal endotheelcellen (ECC), vonden we in Groep 1 bij 3 maanden follow-up een gemiddeld verlies van endotheelcellen van 162,27 ± 225,11 cellen/mm2 en van 322,52 ± 339,93 cellen/mm2 na de operatie in Groep 2, een vermindering die statistisch significant was, hetzij binnen elke groep, hetzij tussen de twee groepen ().

3.2. Morfologische analyse: Fasecontrast-, histologische en scanning-elektronenmicroscopie-analyses

Fasecontrastbeelden toonden epitheelcellen met goed geconserveerde kernen en cytoplasma, en onthulden intacte celranden door het grootste deel van het epitheliale oppervlak, behalve in de nabijheid van de kapselranden, waar epitheelcellen loskwamen van het basaalmembraan (figuur 2(a)). Randen van de capsules leken regelmatig en glad, zoals gemeld in figuur 2 (a). Wat betreft het uiterlijk van de capsules in de FLACS-groep, waren de epitheelcellen meestal gehecht aan het basaalmembraan, terwijl de randen een minder regelmatig, zaagtandpatroon vertoonden (figuur 2(b)). Histologische analyse bevestigde dat sommige monsters uit de B-MICS groep een gedeeltelijke loslating van de epitheellaag van het basementmembraan vertoonden, terwijl de meeste capsules uit de FLACS groep een continue aanhechting van epitheelcellen en basementmembraan vertoonden (Figuur 3). Verder toonden metingen van de dikte van de kapsel tussen de twee experimentele groepen een verschil aan, hoewel zonder statistische significantie. In het bijzonder vertoonden de monsters verkregen na FLACS-techniek een grotere dikte in vergelijking met capsules afkomstig van B-MICS (gegevens niet aangetoond).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

Figuur 2
Histomorfologische evaluatie van anterieure lenscapsules. Fase contrast beelden tonen randen en epitheliale laag van anterior lens capsules verkregen uit B-MICS techniek (a) en femtosecond laser bijgestaan cataractchirurgie (b). Bar: 100 μm.

Figuur 3
Histologische analyse van anterior lens capsules. Dwarsdoorsneden van de specimens werden gekleurd met hematoxyline en eosine. Rechts tonen beelden met een hogere vergroting details van de epitheellaag in specimens verkregen met B-MICS- en FLACS-technieken. Bar: 10 μm.

Finitief, SEM-analyse, zoals gerapporteerd in figuur 4, onthuld met een hogere definitie hoe uniform de hechting van epitheliale cellen aan de keldermembraan was en, vooral, het uiterlijk van capsulaire randen. Met name in de B-MICS groep hadden de kapselranden een regelmatige, gladde en doorschijnende rand (figuur 4(a)). In de andere gevallen vertoonden de randen van de door FLACS verkregen capsules een onregelmatig en gefranjerd uiterlijk (afbeelding 4(b)).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

Figuur 4
Scanning elektronenmicroscopie analyse. Representatieve beelden van monsters verkregen met B-MICS (a) en (b) FLACS technieken, met epitheliale laag (links) en randen verschijning (rechts) bij verschillende vergrotingen.

3.3. Evaluatie van apoptose in LECs

Confocale immunofluorescentieanalyse toonde aan dat apoptose optrad in lensepitheelcellen van monsters verkregen uit ofwel de B-MICS-groep of de FLACS-groep, zoals getoond in figuur 5(a). Terwijl in capsules verkregen met de manuele chirurgische techniek de aanwezigheid van gekloofd caspase 3 vooral werd waargenomen in epitheelcellen dichter bij de kapselranden, vertoonden monsters verzameld volgens de FLACS-techniek een meer gespreide kleuring tegen gekloofd caspase 3, van de rand tot de kern van de epitheellaag. Pseudocolorbeelden van gekloofd caspase 3 werden verkregen zoals eerder beschreven en gerapporteerd in figuur 5(b). Densitometrische analyse uitgevoerd op de immunofluorescente signalen leverde semikwantitatieve gegevens op van de expressie van de apoptotische effector gekliefd caspase 3, die statistisch significant hoger was in de FLACS-groep, ten opzichte van de B-MICS-groep (figuur 5 (b); ).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

Figuur 5
Evaluatie van celapoptose in epitheelcellen vastgehecht aan anterior lens capsules. (a) Immunofluorescentie analyse werd uitgevoerd tegen gekloofde caspase 3 (rood), en kernen werden tegengekleurd met DAPI (blauw). (b) Pseudocolor beelden (boven) en densitometrische analyse (onder) van gekloofde caspase 3 in epitheliale cellen. Bar: 20 urn.

4. Discussion

Het gebruik van femtosecond lasers vormt de nieuwste prestatie in cataract chirurgie, vanaf hun eerste klinische toepassing in 2008. Als gevolg van de toenemende noodzaak om te voldoen aan de verwachtingen van een optimaal refractief resultaat, zijn veel nieuwe ontwikkelingen vervuld.

De toepassing van femtosecond laser voor cataractchirurgie heeft het mogelijk gemaakt de veiligheid en effectiviteit van de procedure te verbeteren, zoals goed gedocumenteerd in de literatuur. Inderdaad, eerdere rapporten aangetoond dat de hoge herhaalbaarheid en precisie in de uitvoering van de moeilijkste fasen van cataract chirurgie, met inbegrip van geoptimaliseerde anterior capsulotomies die een continue scherpgerande snede met een goede treksterkte produceerde .

Onze studie evalueerde de morfologische kenmerken van de menselijke anterior capsules verkregen met standaard phacoemulsificatie techniek en FLACS, respectievelijk. De laatste werden verzameld na het gebruik van Ziemer LDV Z8, een femtosecond laser die voordeel haalt uit een lage energie hoogfrequent systeem (hoge pulsherhalingsfrequentie – tot 10 MHz – gecombineerd met een zeer laag energiebereik van 100-150 nJ) en maakt gebruik van een vloeibare optische interface om de capsulotomie en lensfragmentatie fasen te vergemakkelijken. Deze eigenschappen toegestaan het verkrijgen van voorste kapsel specimens met een goed bewaarde histomorfologie, met epitheliale cellen uniform hechtende, in vergelijking met monsters verkregen na handmatige techniek, zoals aangetoond door fasecontrast en SEM-analyses. In overeenstemming met de bestaande literatuur waren de randen van voorste kapsels afgeleid van FLACS minder regelmatig en gekenmerkt door een zaagtandpatroon, in vergelijking met de gladde rand geproduceerd door handmatige techniek. Het patroon waargenomen in de FLACS groep is zeer waarschijnlijk toe te schrijven aan hoge dichtheid puls raster en hoge precisie optiek van de Femto LDV Z8 laser, die resulteren in meerdere overlappende spots die een continue schone snede te creëren, die lijkt op die verkregen met B-MICS techniek .

Anterior kapsel specimens verkregen door FLACS techniek toonde ook een grotere dikte, in vergelijking met capsules afgeleid van B-MICS, waarschijnlijk te wijten aan de aanwezigheid van cortex adherent aan de anterior kapsel.

Naast histomorfologische kenmerken, toonden onze gegevens aan dat apoptose optrad in epitheelcellen van anterior capsules verkregen uit beide chirurgische technieken. In het bijzonder was de expressie van gekliefd caspase 3 significant hoger in monsters verzameld na FLACS, met een positieve kleuring niet beperkt tot de cellen langs de snijrand, maar ook verspreid naar de binnenste kern van het kapsel, dus suggererend een bredere inductie van celdood. Omgekeerd werd in de epitheellaag die vastkleefde aan de kapselmonsters afkomstig van de B-MICS procedure, apoptose alleen gedetecteerd langs de snijrand, als gevolg van mechanisch letsel geïnduceerd door de tanggemedieerde extractie van het voorste kapsel. Deze grotere apoptotische gebeurtenis die het monolaag epitheel onder het voorste kapsel na FLACS beïnvloedt is waarschijnlijk te wijten aan laser pulsenergie, fotodisruptie-afhankelijke plasmavorming, en de daaropvolgende creatie van cavitatiebellen. Onze gegevens zijn consistent met eerdere bevindingen van Mayer et al. en, in het bijzonder, een gespreide expressie van de apoptotische effector gekloofde caspase 3 zou een positieve voorspellende factor kunnen zijn die kapselzakopacificatie kan voorkomen, door de proliferatie van resterende epitheelcellen sterk te remmen, die over het algemeen correleert met postoperatieve ontstekingsreactie . Vanuit klinisch oogpunt bleek uit onze studie dat patiënten uit zowel de FLACS- als de B-MICS-groep 3 maanden na de operatie een statistisch significante verbetering vertoonden van de best gecorrigeerde gezichtsscherpte (BCVA) ten opzichte van de uitgangsmetingen. Opmerkelijk, wat betreft het aantal endotheelcellen, was een statistisch significante afname van het verlies van corneale endotheelcellen waargenomen in de FLACS groep, gebeurtenis die toe te schrijven is aan kortere phacoemulsificatie tijden. Deze gegevens zijn in overeenstemming met eerdere bevindingen die aantonen dat laserstaarchirurgie minder traumatisch is voor het hoornvlies-endotheel en bovendien een hulpmiddel biedt aan chirurgen om de kritische fasen van cataractchirurgie te standaardiseren, door middel van een initiële leercurve.

5. Conclusies

Het gebruik van femtosecond laser in cataractchirurgie maakt het mogelijk om enkele van de moeilijkste stappen van de procedure te optimaliseren, waaronder capsulotomie, nucleaire fragmentatie, en corneale incisies, naast het bieden van meer nauwkeurige en herhaalbare resultaten. Onze bevindingen zijn in overeenstemming met de bestaande literatuur, maar verdere studies zullen nodig zijn om de positieve kanten van handmatige techniek en femtosecond laser te evenaren, door het definiëren van de optimale combinatie van laser energie, herhalingsfrequentie, en spot grootte, om betere kwaliteit capsulotomies te verkrijgen met regelmatige snijranden vergelijkbaar met die van handmatige capsulorhexis, en om de ontstekingsreactie in het oog te verminderen, dus, het voorkomen van lens epitheliale cel proliferatie en capsulaire zak opacificatie.

Afkortingen

FLACS: Femtosecond assisted laser cataract surgery
B-MICS: Bimanuele microincisie cataract chirurgie
mCCC: Manuele continue curvilineaire capsulorhexis
IOL: Intraoculaire lens
PCO: Posterior capsule opacification
BSS: Balanced salt solution
OCT: Optische coherentie tomografie
OVD: Oculair visco-elastisch apparaat
PBS: Phosphate buffer saline
PFA: Paraformaldehyde
H&E: Haematoxylin/eosin
SEM: Scanning electron microscope
BSA: Bovine serum albumine
DAPI: 4′,6-Diamidino-2-phenylindole.

Disclosure

Dit werk werd gedeeltelijk gepresenteerd op de 20e AICCER-bijeenkomst 2017 (Associazione Italiana di Chirurgia della Cataratta e Refrattiva), 9-11 maart, Rimini (Italië), 2017.

Conflicts of Interest

De auteurs verklaren dat er geen financiële belangenconflicten bestaan.

Articles

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.