Braz J Med Biol Res, December 1997, Volume 30(12) 1485-1487 (Short Communication)
Plasma testosterone and 11-ketotestosterone levels of male pacu Piaractus mesopotamicus (Cypriniformes, Characidae)
R. Gazola1およびM.I. Borella2
1Escola de Farmácia e Odontologia de Alfenas, Alfenas, MG, Brasil
2Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, ブラジル
Abstract Text Thanksledgments Correspondence and Footnotes
Abstract 
The levels of testosterone (T) and 11->
Abstract (5101>
)南米産のパクーPiaractus mesopotamicusのケトテストステロン（11-KT）を生殖周期の2つの段階でラジオイムノアッセイにより測定した。 i.e., また、生殖腺体格指数（GSI）を算出した。 Tと11-KTは成熟期に最高値に達し（T = 2400 ± 56 pg/ml; 11-KT = 2300 ± 60 pg/ml）、安静期には低値を維持した。 アンドロゲンレベルの上昇は、GSIが最も高くなる成熟期の精子の出現とともに起こった。
キーワード：テレストフィッシュ、テストステロン、11-ケトテストステロン、ラジオイムノアッセイ、生殖サイクル
高等脊椎動物のアンドロゲンは生殖腺と副腎皮質で生産されており、精巣はほとんどのアンドロゲンが合成・分泌されているところである。 魚類の精巣は、アンドロゲンであるテストステロン（T）、アンドロステンジオン、11-ケトテストステロン（11-KT）を合成できます（1、2）。
これまで、テストステロンと11-ケトテストステロンの雄アレステルスでの役割について多くの議論が行われてきました。 一般に、テストステロンは精原細胞の増殖や精母細胞の形成など、精子形成のいくつかのステップに影響を及ぼすと考えられている(3)。 また、テストステロンの代謝産物が尿として体外に放出されることで、異性を惹きつけ、性行動に影響を与えることもあります(4)。 さらに、テストステロンはエストロゲン生合成の前駆体であり、性分化の過程に関与していると考えられる(5)。
11-ketotestosterone は雄のテレホストにおける第二次性徴の発達を著しく促進する (1)． 血清性腺ステロイドホルモン値の季節変化は、雌のパクーを含む多くの淡水産のテレスト種で記録されている(4-9)(10)。 これらのデータは魚類の生殖に関する内分泌学的側面の理解に貢献している。
パクー（Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887）は、ブラジル中央部のマトグロッソ低地群の河川に生息する南米の回遊魚で、経済的に重要な存在である。 飼育下では、自然界と同様の生殖腺成熟パターンを示すが、飼育下では自発的な生殖は起こらない（10）。
今回の調査の目的は、飼育下の雄パクーの生殖周期の2段階、すなわち、性ステロイドのテストステロンと11-ケトテステロンの血漿レベルの変化を報告することにある。
ブラジル、SP州、PirassunungaにあるCEPTA（Center of Research and Training in Aquaculture）で飼育されているPiaractus mesopotamicusのオス（N = 30）を生殖周期の休止期と成熟期の精巣ステロイドであるテストステロンと11-ケトテス テロンを定量するために利用した。 血液サンプル（5 ml/匹）はヘパリン処理した注射器で尾管から採取し、全魚の体重を測定して犠牲にした。 生殖腺体格指数（GSI）は、（生殖腺重量／体重）×100で算出した。 生殖腺はBouin’s溶液で固定し、通常の組織学的手法で処理し、生殖腺病期の判定に使用した。 血液サンプルは遠心分離し、血漿のアリコートを-20℃で保存した。 保存された血漿はドライアイスでWest Vancouver Laboratory (Vancouver, British Columbia) に運ばれ、そこでホルモン濃度がラジオイムノアッセイ (RIA) で測定された。
T と 11-KT レベルは抽出されていない熱処理された血漿で直接測定された (11). ステロイドRIAの完全な詳細については、他の場所で説明されている(12)。 50％レベルのTおよび11-KT抗体は、11-ヒドロキシテストステロンとの交差反応が6％未満、アンドレノステロンおよび他のすべての試験したステロイドとの交差反応が2％未満であった。 このアッセイの有効性は、RIA の試料調製前に血漿に添加した既知量の T および 11-KT が正確であることを実証することで確認された。 精度はアッセイ内およびアッセイ間の変動係数の分析によって決定され、2つのアッセイで10%未満であった。 また，感度は5 pg/mlであった． データは平均値±SEMで報告され、分散分析（ANOVA）とStudent-Newman-Keuls多重範囲検定で分析され、有意水準はP<0.01とした。
生殖周期のRとM段階の雄パクーのRIAとGSIによって測定したTと11-KTのプロファイルは表1に示すとおりであった。 Rステージでは11-KTの血漿値がT値より高く、MステージではT値が11-KTより高かった。 しかし、同ステージではT値と11-KT値の間に有意な差は見られなかった。 また、GSIが高くなるM期にはTと11-KTの値が有意に高くなった（T = 2400 ± 56 pg/ml; 11-KT = 2300 ± 60 pg/ml）。
望遠鏡では精子形成と精子はゴナドトロピン制御下にあると考えられている（4，13）．
パックーの雄の血漿には、生殖腺周期の同じ時期にTと11-KTがほぼ等量存在する。 サケ科のカラフトマスでも同様の結果が得られ(8)、Tと11-KTは同時に増減するか、時にはTが11-KTより1カ月ほど先に増減する。
雄のパックーでは、精巣周期の休止期よりも成熟期の血漿Tと11-KTレベルが著しく高く、測定した血漿ステロイドレベルとGSIの間に正の相関が認められた。 これらの結果は、テレスト魚類で得られた結果と一致する。 例えば、Scorpius lineatusでは、GSI値は完全な精子形成期に最大となり、11-KT濃度は産卵前の雄で高くなる(15)。 Fostier (4) によれば、サケ科魚類の T と 11-KT の濃度は、精子形成期と精子形成期に上昇し、生殖休止期に下降する特徴があるという。 Pagrus auratusでは、精子形成中の魚で血漿T値が上昇し、血漿11-KT値はT値のそれとよく似たパターンを示す(16)。 毎年産卵するDicentrarchus labraxの雄では、成熟の最終段階がC21ステロイドによって調節されているため、血漿中のTと11-KTの値は精子形成時に高くなる（6）
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謝辞
ホルモン測定にご協力いただいたウエストバンクーバー研究所長のE・M・ドナルドソン博士、技術サポートいただいたN・スクマサビン、魚を提供していただいたG・ベルナルディーノに感謝いたします。