本研究で使用した生薬製剤DJTはGMP（適正製造規範）に基づき調製され、Sun Ten Pharmaceutical（台湾）から提供を受けたものです。 このプロジェクトは、DJTの潜在的な毒性や副作用を検出するために、CCMPから全額出資されたものである。 DJTのバッチを提供した以外、Sun Ten Pharmaceuticalはスポンサーシップ、試験デザイン、参加者のモニタリングに一切関与していません。
ハーブの調製
DJTのすべてのハーブ成分は、治療価値のある揮発性オイルを収集し、2階建て高真空乾燥室に噴霧された大型コンピュータ制御ボイラーで調合されました。 ハーブの有効成分は、生のハーブの5倍濃縮された顆粒状に変化しました。 この顆粒は、低温で真空乾燥された後、別の無菌室に吸い込まれ、瓶詰めされ、ラベルが貼られ、密封された。 DJTの有効成分の品質保証のために、HPLC（高速液体クロマトグラフィー）フィンガープリントを採用し、最終製品中の物質を特定しました。 CCMPで規定されている抽出工程では、植物の葉や茎に多く含まれる腎毒性物質であるAA-Iをアサリウム・ヘテロポイデスの根から水で除去しました。 また、より感度の高い液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法（LC/MS/MS）を保健省食品薬品分析局で実施し、AA-Iが検出されないレベルであることを確認した上で、今回の試験を実施しました。 DJTの各バッチは、大腸菌、サルモネラ菌（細菌数）、重金属の検査も行いました。
被験者の募集
この前向き追跡調査は、国立台湾大学で行われ、被験者は北部台湾の二つの研究クリニックを通じて登録されました。 台北市立病院漢方分院と陽明分院である。 本研究は，台湾伝統中国医学合同審査委員会（JIRBTCM94-0426-01）から承認を得た。 参加者は全員、研究に参加する前に署名とインフォームドコンセントを提出した。
Inclusion criteria
参加者は、2005年4月から10月の間に新聞広告、クリニックや健康フェアに掲示したチラシを通じて募集された。 X線撮影により変形性膝関節症の状態（軽度から中等度の骨棘および/または関節腔の狭小化）を確認した。 対象者は、少なくとも片方の膝に症状のある18歳以上で、調査前の2週間に医療機関を受診した者である。 また、本試験の3ヶ月前に、他の医学的試験に参加されていない方を対象としました。
除外基準
リウマチ性、炎症性またはその他のタイプの関節炎、前月に関節鏡検査または関節内コルチコステロイド/ヒアルロン酸注射、少なくとも1.5%の腎機能障害または肝機能障害の証拠などがあること。コントロールされていない高血圧、糖尿病、または癌の兆候。 参加者の適格性は、最初の2回の診療所訪問時に評価された。 最初のスクリーニング訪問の後、参加者は症状と生活の質に関するベースラインデータを決定するためのランインフェーズに入り、各参加者は全血球計算と生化学的機能検査を含む健康評価も受けた。 これらのデータは、各参加者の適格基準を確認し、コンプライアンス不良の可能性がある回答者を選別するために収集された。 4003>
その後、1週目、2週目、4週目に訪問が予定され、各訪問時に膝の症状や有害事象が評価されました。 試験終了時には、参加者は血液検査を含む更なる健康診断を受けました。 また、被験者の方々には、試験開始の1〜2日前に電話で連絡を取り、試験継続をお願いしました。 試験期間中、被験者のコンプライアンスを監視するため、残量計算が行われた。 4003>
有効性/忍容性
4週間の介入前および介入中に評価された主要アウトカムパラメーターは、疼痛、こわばり、身体機能のサブスケールと、Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis (WOMAC) indexの100mm ‘visual analog scale’ (VAS) によるグローバル疼痛アセスメントだった。 WOMAC中国語版は著者から直接購入した． また，WHO Quality of Life questionnaire – Taiwan brief version (WHOQOL-BREF) を用いてQOLの変化も評価した． また、「中医新薬臨床研究ガイドライン」で推奨されている「パターン識別質問票」（中国医学用語で「卞氏」）を用いて、各被験者の体質を分類した。 質問項目は、腰と膝の痛み、寒さへの嫌悪、弛緩の頻度（それぞれ、「時々以下」、「頻繁に」、「仕事に支障が出るほど頻繁に」で評価）、硬直の持続時間（「1時間未満」または「1時間以上」）で構成されている。
WOMAC indexは多次元、疾患特異的、自己管理型の健康状態測定法である。 変形性膝関節症患者における痛み、こわばり、身体機能の分野における、臨床的に重要で患者に関連した症状を探るものである。 この尺度は24問（痛み5問、こわばり2問、身体機能17問）からなり、5分以内に記入することができる。 痛みに関する5つの項目を合計し、日常生活における膝の痛みの程度を表す総和スコアとし、こわばりや身体機能についても同様に重み付けを行いました。 WOMACのVASバージョンは有効で信頼性が高く、様々な介入後の健康状態の臨床的に重要な変化を検出するのに十分な感度を有している。 WHOQOL-BREF 台湾版は、4つのドメイン（身体、心理、社会、環境）、24のファセットと、総合的な生活の質（QOL）と健康全般に関する2つの項目からなり、得点が高いほどQOLが優れていることを示している。
安全性評価
ベースライン時と4週目に、全血球数と血小板、クレアチニン、BUN、AST、ALT、A/G、尿酸の血清レベル、N-アセチルβ-D-グルコサミニダーゼとレチノール結合蛋白の尿レベルなどの定期血液学および生化学データが収集された。 4003>
統計解析
我々の解析は、WHOQOL指標とともに、WOMAC評価の3領域構成（痛み、こわばり、身体機能）の変化に主に焦点を当てた。 治療効果は、1週目、2週目、4週目の各訪問時に測定したスコアとベースライン時のスコア間の参加者間の平均差の変化として記述された。 最終的な回帰モデルにおける説明変数は、性別、年齢、ベースラインの変形性関節症の重症度、年齢と性別の相互作用、BMI（kg/m2）、寒さへの嫌悪感、腰と膝の弛緩、NSAID救助薬の使用などであった。 また、3回の受診に伴う改善を調べるために、2週目と4週目の受診に関する2つの指標変数も回帰モデルに含めた。 この2つの指標変数の係数は、2週目と4週目の受診時の測定スコアの平均値と1週目のそれとの差を表している。 誤差項は、各参加者の3回の繰り返し測定の間で相関があると仮定した。 最後に、DJTによる治療に感受性のあるWOMAC項目を特定するため、WOMACスコアの各単一項目も個別に検討した。 相関誤差項を用いた重回帰モデルの係数および推定値の標準誤差は、フリー統計ソフトRバージョン2.1.1のパッケージnlmeバージョン3.1-60の一般化最小二乗法機能を用いて求めた
。