4.04.4.2 Fish Aroma and Contaminants
揮発抽出技術のアプリケーションの中で、魚組織および血漿中の2-Phenoxyethanol残留レベルなどいくつかの汚染物質の迅速かつ容易な決定方法を開発48、その後、麻酔で処理した魚における2-Phenoxyethanol残留のダイナミクスをモニタする方法に用いたことだ。
2-フェノキシエタノール(エチレングリコールモノフェニルエーテル、C8H10O2)は、水産養殖に用いられる有望な麻酔薬です。
サンプルヘッドスペースから目的分析物を固相マイクロ抽出(SPME)した後にガスクロマトグラフ質量分析装置(GC-MS)で定量する方法を新たに開発しました48。 2-フェノキシエタノールをヘッドスペースに最大限移行させることを目的としたサンプルハンドリングと、SPME-GC-MSの条件の両方を慎重に最適化しました。 マトリックス修飾を行わないスパイクサンプルは、以下のように調製しました。 5μlの実用標準物質を2gの粉砕した魚の組織に加え、3-382mg kg-1の最終スパイクレベルを得ました。
その後、いくつかの代替マトリックス修飾をテストしました。 (I) スパイクされた組織または残留物を含む組織2 gを10 mlのヘッドスペース (HS) バイアルに移し、そこに2 mlの超純水を加えた。(II) 残留物を含む組織2 gを硫酸ナトリウム2 gで粉砕した。
分析対象物の抽出に最も効果的な繊維を特定するため、固定相選択性の異なる3種類の市販SPME繊維(PA、PDMS/CAR/DVB、CW/DVB)を評価した。 33 mg kg-1 の濃度でスパイクした魚組織 (未修飾) を、これらの繊維テスト実験の対照とした。
すべての抽出は、同じ条件 (30 ℃で 60 分収着) で行われた。 PAおよびCWX/DVB繊維を使用して、満足のいかない抽出効率結果(検出器の応答、すなわち信号対雑音比の比較に基づく)が得られました。 PDMS/CAR/DVB混合繊維が最も良い結果を出したため、その後の実験に採用されました。
2-フェノキシエタノール抽出のダイナミクスに焦点を当てた実験が、30℃で5、15、30、40、60分の抽出時間で実施されました。 実験は、1 mg kg-1のレベルでスパイクした魚の組織サンプルを用いて実施された。 抽出された分析物の量は、抽出時間の範囲内で連続的に増加した。 実験室のサンプル処理能力を許容範囲に維持するため、これ以上の抽出時間の増加は考慮されなかった。
ジビニルベンゼン/カルボキセン/ポリジメチルシロキサン (PDMS/CAR/DVB) ファイバーを使用し、30℃で60分のサンプル前処理とMS/MSモードのイオントラップ検出器を使用し、Klimancova et al.48 では検出 (LOD) と定量 (LOQ) の限界値をそれぞれサンプルの 0.03 と 0.1 mg kg-1 と定めました。 このメソッドは 0.1-250 mg kg-1 の範囲で線形であり、サンプルマトリックスとスパイクレベルに依存して、3 ～ 11% の再現性 (相対標準偏差、R.S.D. で表示) が得られました 48
有機水銀化合物は、その最も一般的なメチル水銀がその毒性の強化により特に懸念されています。 近年、固相マイクロ抽出法(SPME)が有機金属化合物のGC測定のための無溶媒法として広く用いられるようになりました。 SPMEは、高速で無溶媒のサンプル抽出-サンプル導入の統合システムを提供するだけでなく、液体-液体抽出(LLE)技術よりも優れた分析物の前濃縮を提供する可能性がある。 さらに、ヘッドスペース（HS）試料調製技術を適用する場合、試料溶液中に存在する分析対象物と他の化合物の揮発性の違いに基づくマトリックス分離を行うことも可能である。 しかし、他の無溶媒抽出-前濃縮統合法、すなわちパージアンドトラップ法またはスターバー収着抽出 (SBSE) を適用した方法も、さまざまな有機金属測定においてSPMEの魅力的な代替法であることに留意すべきである
典型的な食用魚介類試料中のMeHg測定に対する費用効率の高い分析法 (SPME-GC-pyrolysis-AFS system) の適用が提案されました 49。 本研究では、100 ng g-1の範囲でMeHgを含む複雑なマトリックスを持つ食品サンプルを分析するために、水相フェニル化およびSPMEサンプル調製を使用するために、アルカリ分解を含む確立された方法に必要な変更を検討することに焦点を当てました。 凍結乾燥し粉砕した試料または認証標準物質 (CRM) 250 mg を 30 ml の清浄ガラス製バイアルに正確に量り取り、25% (w/v) KOH in メタノールまたは 18% (w/v) NaOH in メタノール 5-6 ml を加えた (いずれも 4.5 M)。 その後，バイアルをPTFEライニングのスクリューキャップで密閉し，超音波浴中に75℃で3時間置いた。 バイアルを常温まで冷却した後、サンプルのMeHg含有量に応じて手順を変えた。 高含有試料（乾燥重量で数μg-1 MeHgを含む）の場合、消化物全体を50mlメスフラスコに十分にリンスした。 この溶液から1 mlを10 mlメスフラスコに採取した。
標準添加法を用いる場合は、MeHgCl標準溶液1 mlを加えてから公定量に希釈し、この溶液から1 mlを採取した。 標準添加量は、試料溶液の予想分析物濃度の1×、2×、4×に相当しました。
低含有量試料（約100 ng g-1 MeHg以下しか含まない）の場合、バイアルを室温まで冷却した後、消化物を数秒間振り、5mlを6mlガラス遠心バイアルにピペッティングした後、バイアルを室温に戻し、6mLの遠心分離器で処理しました。 この溶液を4100 g、20 ℃で15分間遠心分離した。 上清から1 mlを10 mlメスフラスコに移し、上記の標準添加法を行った。
いずれの場合も、10 mlの希釈（およびスパイク）溶液から1 mlを、それぞれ10 mlの1 M, pH = 5酢酸バッファーを含む30 mlガラスバイアルにピペッティングした。 その際、清潔なPTFEコーティングされた攪拌棒をバイアルに設置した。 最後に，新しく調製した1% NaBPh4を1 ml加え，PTFEコーティングしたゴム隔壁を取り付けたスクリューキャップでバイアルを直ちに密閉した。 バイアルを磁気撹拌板の上に置き、激しく撹拌（700rpm）しながら、ヘッドスペースSPME抽出を行った。 ファイバーは100μmのポリ（ジメチルシロキサン）（PDMS）フィルムでコーティングされている。 抽出後、ファイバーをGCの加熱された入口ポートに導入し、熱脱着と熱分解-AFS測定を行った。49
固体試料100mgと外部校正を用いて直接水銀で試料中の全Hg量を決定した。41
分析物の抽出にSPME (PDMS) 技術を用いてGC-ICP-MSシステムからなる魚組織中のメチル水銀の別の測定手法が提案された41。 0.25gの試料に適量の濃縮MM198 Hgスパイクと20mlの25% (m/v) メタノールKOH溶液を加えて5時間振とうし、分析まで4℃で保存した。 濃縮MM198 Hgスパイクの濃度を定量するために、6種類の逆スパイク同位体希釈校正試料を調製した。 0.200 ml の濃縮 MM198 Hg スパイク溶液と 0.240 ml の 2.042 μg ml-1 (または 1.993 mg ml-1) 自然存在量 mmHg 溶液を正確にバイアルに採取し，メタノールで 10 ml に希釈し，校正試料とした。 SPMEヘッドスペース試料調製では、消化物または逆スパイク同位体希釈校正試料（SPME GC-ICP-MSの感度が高いため）100 mlのみを50 mlガラスバイアルに移し、定量した。
1 mol l-1 NaAc緩衝液20 mlおよび1% NaBPr4 1 mlを加えた後、PTFE被覆シリコンゴムセプタムでバイアルに栓をして、定量した。 SPMEニードルをセプタムから挿入し、10分間ヘッドスペース試料調製を行った。 抽出中、溶液はテフロンコートマグネットスターバーで激しく攪拌された。 回収された分析物はSPMEファイバーからGCカラムに脱着されました41
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