11β-ヒドロキシラーゼ1（CYP11B1）欠損症では、コルチゾールの血清濃度は低くなる（通常は朝の採血で<7 microgram/dLである）。 11-デオキシコルチゾールおよび11-デオキシコルチコステロンは、朝の採血で正常基準範囲の上限の少なくとも2～3倍（より一般的には20～300倍）上昇する。 11-デオキシコルチゾールの上昇は、11β水酸化酵素2（CYP11B2）がそのまま存在するため、通常、11-デオキシコルチコステロンの上昇よりも相対的に大きい。 このため、すべての強力な鉱質コルチコイド（コルチコステロン、18-ヒドロキシコルチコステロン、アルドステロン）の血清濃度は、通常、正常基準範囲より上昇する。 血漿レニン活性はそれに応じて低下するか完全に抑制される。 生後7日未満の乳児の鉱質コルチコイドの結果の解釈には注意が必要である。鉱質コルチコイド値は、健康な新生児では生後数時間でかなり上昇し、1週間までに成人に近いレベルまで低下することが多い
CYP11B1欠損の軽症例では、確定診断に副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）1～24刺激試験が必要かもしれない。 患児では、ACTH1-24 250μgを静脈内または筋肉内投与した60分後に観察される血清11-デオキシコルチゾール濃度は、通常20ng/mLを超えるか、少なくとも4倍上昇することを示す。 このような上昇は非罹患者ではほとんど見られない。 対応するコルチゾール反応は鈍化する(<18 ng/mL peak)。
CYP11B2欠損症では、血清コルチゾール濃度は通常正常であり、ACTH1-24に対する反応も正常である。 11-デオキシコルチコステロンは、CYP11B1欠損症よりもしばしば顕著に上昇するが、11-デオキシコルチゾールは有意に上昇することもあれば、上昇しないこともある。 血清コルチコステロン濃度は低値、正常値、またはわずかに上昇し、血清18-ヒドロキシコルチコステロンとアルドステロン濃度は、ほとんどの症例で低値である。 しかし、基礎となる遺伝的欠陥が18-ヒドロキシラーゼ活性に選択的に影響する場合、コルチコステロン濃度はかなり高くなる。 逆に、欠損が主にアルドステロン合成酵素の機能に影響する場合、18-ヒドロキシコルチコステロン濃度は非常に高くなる。
CYP11B2遺伝子の発現は通常ACTHではなくレニンによって制御される。 グルココルチコイド反応性高アルドステロン症では、CYP11B1のACTH反応性プロモーターが、CYP11B2遺伝子発現に対して異常な制御を行う。 その結果、これらの患者ではコルチコステロン、18-ヒドロキシコルチコステロン、アルドステロンが著しく上昇し、そのレベルはACTH分泌のリズムに支配された日内パターンに従っている。 さらに、CYP11B2が高濃度であるため、11-デオキシコルチゾールの18-水酸化が起こる（CYP11B1はCYP11B2より11-デオキシコルチゾール変換活性がはるかに高く、18-水酸化活性を持たないため通常では考えられない事象である）。 その結果、通常は微量にしか存在しない18-ヒドロキシコルチゾールが、これらの患者では有意に検出される可能性がある。 最終的な診断の確定は、ACTH1-24の注射により鉱質コルチコイド産生が直接反応することを示すことで得られる。 通常、コルチコステロン、18-ヒドロキシコルチコステロン、アルドステロンレベルには、ほとんど影響を与えない。 この検査は、デキサメタゾン投与後に鉱質コルチコイドレベルが低下することを示すことで、さらに補足することができる。 性ステロイド値は、CYP11B1 欠損症では中等度から著しく上昇し、CYP11B2 欠損症ではかなり低いか、あるいは最小限の上昇にとどまります。 グルココルチコイド反応性高アルドステロン症における性ステロイド値は通常正常である。 630ng/dL（新生児の基準範囲の上限）より高い値から2000または3000ng/dLの範囲にある少数の患者については、代替診断として11水酸化酵素欠損症を検討することが賢明であろう。 血清アンドロステンジオン濃度も軽度から小幅にしか上昇しておらず、表現型が食塩消耗症ではなく、単純な男性化（女性）または正常（女性または男性）であれば、これは特に当てはまります。 11-ヒドロキシラーゼ欠損症は、特にCYP11B1に影響を与える場合、血清17-ヒドロキシプロゲステロン濃度の中程度の上昇と関連することがある。 このような場合、CYP11B1欠損及びCYB11B2欠損の検査を考慮し、上記のように解釈すべきである。 あるいは、21-デオキシコルチゾールの測定も有用であろう。 このマイナー経路代謝物は、コルチゾールに変換されるために21-ヒドロキシルアイオンを必要とするため、CYP21A2欠損症で蓄積されるが、その合成には17-ヒドロキシプロゲステロンの11-ヒドロキシル化が必要なため、通常はCYP11B1欠損症で上昇しない。
注意事項
出生時は、視床下部-下垂体-副腎軸と視床下部-下垂体-性腺軸が活性化し、ミネラルコルチコイド、性ステロイドおよびその前駆体を含むすべての副腎ステロイドが高値となる。 早産児では、病気やストレスにより、さらに顕著に上昇することがあります。 副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）1-24検査は、低いが薬物およびアレルギー反応の確実なリスクがあるため、患者の安全を保証する環境、通常は内分泌、または他の集中型の検査センターで、医師の監督の下でのみ実施されるべきである。
先天性副腎過形成（CAH）の診断におけるACTH1-24検査の解釈には、特に11-水酸化酵素欠損症や3-β-ヒドロキシステロイド脱水素酵素（3β-HSD）欠損症など、信頼できる標準的データがほとんどないCAHの一般的ではない変異型についてはかなりの経験を必要とする。 さらに稀な酵素欠損症であるStAR (steroidogenic acute regulatory protein), 20,22 desmolase, 17a-hydroxylase/17-lyase, and 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase (17beta-HSD) などについては、症例報告があるのみである。 したがって、CAHの経験のある小児内分泌学者からの専門的な意見を求める必要がある
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