Questo progetto si concentra sulla struttura e la funzione delle società di oligosaccaridi della zona pellucida del topo (mZP) e come questo glicocalice extracellulare che circonda l’uovo interagisce con molecole complementari sulla superficie degli spermatozoi. Prove precedenti suggeriscono fortemente che l’attività di legame degli spermatozoi della mZP è associata alla sua porzione di oligosaccaridi. Studi recenti nel laboratorio del richiedente hanno dimostrato per la prima volta la presenza di glicani N-linked polilactosaminyl e un trisaccaride O-linked che si pensa abbiano ruoli importanti nel riconoscimento e nel legame sperma-uovo. Per valutare la bioattività di questi oligosaccaridi, la proposta ha cinque obiettivi specifici: (1) purificare mZP2 e mZP3, e poi scindere e radiomarcare i glicani N-linked e il trisaccaride O-linked, (2) valutare il ruolo funzionale dei glicani N-linked e O-linked radiomarcati nel riconoscimento e nel legame sperma-uovo, (3) isolare e caratterizzare chimicamente i glicani N-linked funzionali, (4) sintetizzare il trisaccaride O-linked, esaminare la sua funzione e il meccanismo alla base della formazione del complesso antigene-trisaccaride della superficie dello sperma e (5) identificare e caratterizzare chimicamente le proteine della membrana plasmatica dello sperma di topo (PM) riconosciute dai glicani N-linked e/o O-linked. Una volta completato, questo studio sarà il primo rapporto pubblicato sulla diversità struttura-funzione di entrambi gli oligosaccaridi N-linked e O-linked. Dopo che le molecole complementari (cioè i glicani bioattivi sulle glicoproteine ZP e i recettori complementari sul PM spermatico) saranno identificati nel ceppo selezionato di topi sperimentali, sarà possibile affrontare la questione delle relazioni interspecie e intraspecie durante le interazioni dei gameti opposti. Collettivamente, questi studi aumenteranno la nostra comprensione del meccanismo dell’interazione sperma-uovo e della fecondazione nel topo, e forniranno le informazioni necessarie per la regolazione dei processi di fecondazione in altre specie, compresi gli esseri umani.