Nel recente articolo di Lin et al. (1), gli autori dimostrano gli effetti protettivi dell’infusione splenica di mitocondri isolati contro il danno da ischemia/riperfusione epatica in un modello di ratto. Una delle loro conclusioni è che i mitocondri isolati da animali donatori hanno mantenuto un potenziale di membrana intatto nei fegati degli animali riceventi anche a 4 ore dopo l’infusione, come valutato dalla colorazione Mito-Tracker Orange CMTMRos.
I fluorofori cationici come la rodamina 123 e il tetrametilrhodamine metilestere (TMRM) sono facilmente sequestrati nello spazio della matrice dei mitocondri polarizzati, e queste sonde vengono rilasciate una volta che i mitocondri subiscono una perdita di potenziale di membrana. I coloranti MitoTracker sono anche fluorofori cationici che si accumulano elettroforeticamente nei mitocondri in risposta al potenziale di membrana mitocondriale altamente negativo. Tuttavia, a differenza di TMRM e rodamina 123, i coloranti MitoTracker possiedono un gruppo clorometilico reattivo che forma un legame covalente con tioli su proteine e peptidi, che intrappola i coloranti MitoTracker all’interno dei mitocondri. Così, i mitocondri mantengono i coloranti MitoTracker come MitoTracker Orange CMTMRos dopo la perdita del loro potenziale di membrana (2;3). Quindi, la ritenzione di colorazione MitoTracker non significa che i mitocondri infusi rimangono polarizzati, come è stato concluso in (1). Infatti, un’alta concentrazione di Ca2+ libero nel siero, che è 10.000 volte maggiore del Ca2+ libero citosolico, porterà rapidamente al sovraccarico di Ca2+ mitocondriale, all’inibizione respiratoria e alla disfunzione mitocondriale dall’inizio della transizione di permeabilità mitocondriale con perdita del potenziale di membrana mitocondriale (4;5).