Hai provato la tricromia?
La colorazione tricromica è una delle macchie speciali più comunemente usate in ogni laboratorio di istologia.
Il significato pedante della parola tricromia è “tricromia”, riferendosi a come la tecnica colora differentemente i campioni di tessuto in tre colori.
Tuttavia, il termine è ora effettivamente usato per descrivere qualsiasi metodo di colorazione che utilizza due o più coloranti acidi di colori contrastanti per colorare selettivamente diversi componenti di base dei tessuti.
Cosa macchia la tricromia?
La tecnica utilizza tre coloranti per produrre una colorazione diversa dei diversi tipi di tessuto. Tipicamente sono usati per dimostrare il collagene, spesso in contrasto con il muscolo liscio, ma possono anche essere usati per evidenziare la fibrina in contrasto con i globuli rossi. Possono anche evidenziare selettivamente altri componenti.
| Tipo di tessuto | Colore con macchia tricromica |
| Collagene, Ossa | Verde-blu |
| Muscolo, Fibrina, Citoplasma, | Rosso |
| Cellule rosse del sangue | Giallo o rosso |
| Nuclei | Rosso-nero scuro |
Chi usa i coloranti tricromici?
Queste macchie sono ampiamente utilizzate sia per la ricerca che per scopi diagnostici. Per esempio, i ricercatori che studiano la progressione della guarigione delle ferite, o che valutano l’efficacia dei prodotti farmacologici che la accelerano, esaminano abitualmente sezioni di tessuto colorate con tricromia per misurare la deposizione di collagene.
Nei laboratori diagnostici, i patologi spesso usano questa colorazione per aiutare a rispondere a domande che possono sorgere dopo aver esaminato sezioni di routine colorate con ematossilina ed eosina. In particolare, questa colorazione è richiesta di routine per valutare la malattia nel fegato. Può essere particolarmente preziosa quando si esaminano campioni di fegato di pazienti con cirrosi, dove può fornire informazioni utili sul grado di fibrosi, e quindi sullo stadio e sulla progressione della loro malattia.
Principi generali della colorazione
Durante la procedura, la soluzione di Bouin (il ‘mordente’ che fa aderire il colorante al tessuto) viene applicata alle sezioni di tessuto per intensificare il colore finale. I nuclei sono colorati con ematossilina di ferro. Il citoplasma e il muscolo sono poi colorati di rosso con la fucsina dell’acido scarlatto di Biebrich. Dopo il trattamento con i poliacidi acido fosfotungstico (PTA) e acido fosfomolibdico (PMA), il collagene viene colorato con blu tricromico, contenente blu di anilina (o verde chiaro di anilina che macchia il collagene di verde). Infine, una soluzione di acido acetico è usata per risciacquare le sezioni dopo la colorazione che produce una tonalità più delicata di colorazione del tessuto.
Diverse tecniche di colorazione tricromica
Varie ricette di tricromia esistono, tutte nate dalla formulazione originale del patologo Claude L. Pierre Masson dei primi anni del 1900. Dei vari tipi di macchie tricromiche disponibili, quelle più comunemente usate oggi sono:
- Tricromia di Masson: Questa è una tecnica di colorazione a più fasi. Utilizza i poliacidi PTA e PMA. Tutte le fasi di mordenzatura e colorazione (come descritto sopra) sono eseguite individualmente.
- Tricromia di Gomori: Questa è una tecnica di colorazione con metodo a una fase. Questo metodo non utilizza poliacidi e, a differenza della sua controparte Masson, combina tutti i reagenti in un’unica soluzione (tranne la colorazione nucleare e il mordente di Bouin) che viene applicata alle sezioni di tessuto per un certo tempo.
Quale tricromia è più comunemente usata nei vostri laboratori?
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