La preparazione a base di erbe DJT usata in questo studio è stata preparata sotto GMP (Good Manufacturing Practices) e fornita da Sun Ten Pharmaceutical (Taiwan). Il progetto è stato interamente finanziato dal CCMP per rilevare la potenziale tossicità o gli effetti avversi del DJT. A parte la fornitura del lotto di DJT, Sun Ten Pharmaceutical non è stata coinvolta in nessun’altra sponsorizzazione, progettazione dello studio o monitoraggio dei partecipanti.
Preparazione delle erbe
Tutti i componenti a base di erbe del DJT sono stati preparati in una grande caldaia controllata dal computer dove gli oli volatili di valore terapeutico sono stati raccolti e spruzzati in una camera di essiccazione ad alto vuoto su due piani. I principi attivi delle erbe sono stati trasformati in composti granulati cinque volte più concentrati delle erbe grezze. Questi composti granulati sono stati poi essiccati sotto vuoto a basse temperature prima di essere travasati in una camera sterile separata dove sono stati imbottigliati, etichettati e sigillati. Per garantire la qualità dei principi attivi del DJT, è stata impiegata l’impronta digitale HPLC (high performance liquid chromatography) per identificare le sostanze nel prodotto finale. È stato eseguito un processo di estrazione richiesto dai regolamenti CCMP, che prevede l’uso di acqua per eliminare l’AA-I dalle radici di Asarum heteropoides, una sostanza nefrotossica contenuta principalmente nelle foglie e/o nelle parti aeree delle piante. La cromatografia liquida – spettrometria di massa tandem (LC/MS/MS), un metodo più sensibile, era stata effettuata dal Bureau of Food and Drug Analysis del Department of Health prima dello studio attuale per assicurare che l’AA-I fosse ad un livello non rilevabile. Ogni lotto di DJT è stato anche testato per E. coli, Salmonella (conta dei batteri) e metalli pesanti.
Reclutamento dei soggetti
Questo studio prospettico di follow-up è stato coordinato dalla National Taiwan University, mentre i partecipanti sono stati arruolati attraverso due cliniche di ricerca nel nord di Taiwan: Chinese Medicine Branch e Yangming Branch del Taipei City Hospital. L’approvazione dello studio è stata ottenuta dal Joint Institutional Review Board for Traditional Chinese Medicine di Taiwan (JIRBTCM94-0426-01). Tutti i partecipanti hanno fornito un consenso informato e firmato prima di prendere parte allo studio.
Criteri di inclusione
I partecipanti sono stati reclutati attraverso annunci sui giornali e volantini affissi in cliniche e fiere della salute tra aprile e ottobre 2005. Lo stato di osteoartrite del ginocchio è stato confermato dalla radiografia (osteofiti da lievi a moderati e/o restringimento dello spazio articolare). I partecipanti qualificati avevano almeno 18 anni di età con osteoartrite sintomatica in almeno un ginocchio e avevano cercato aiuto medico nelle due settimane precedenti lo studio. I partecipanti non erano stati coinvolti in altri studi medici tre mesi prima dello studio. Ai partecipanti è stato richiesto di interrompere l’uso di tutti i farmaci attuali, compresi i prodotti convenzionali o a base di erbe per l’artrite, almeno due settimane prima dello screening iniziale per lo studio.
Criteri di esclusione
Reumatoide, infiammatoria o qualsiasi altro tipo di artrite; artroscopia o corticosteroidi intra-articolari / iniezioni di acido ialuronico nel mese precedente; qualsiasi evidenza di disfunzione renale o epatica, come definito da un livello di almeno 1. 5 volte il limite superiore di riferimento.5 volte il limite superiore di riferimento; ipertensione non controllata; diabete mellito; o qualsiasi segno di cancro.
Disegno e procedura dello studio
Tutti gli infermieri coinvolti nello studio hanno partecipato a una sessione di formazione standardizzata per garantire la coerenza e per soddisfare i requisiti GCP (Good Clinical Practices) nel protocollo dello studio. L’idoneità dei partecipanti è stata valutata durante le prime due visite alla clinica. Dopo la visita di screening iniziale, i partecipanti sono entrati in una fase di rodaggio per determinare i dati di base sui loro sintomi e la loro qualità di vita; ogni partecipante è stato anche sottoposto a una valutazione della salute, compreso l’emocromo completo e i test di funzionalità biochimica. Questi dati sono stati raccolti per garantire i criteri di ammissibilità per ogni partecipante, e per escludere gli intervistati con potenziale scarsa conformità. Dopo la fase di rodaggio, ad ogni partecipante è stata fornita una quantità sufficiente di DJT per iniziare il trattamento alla dose di 2,5 g due volte al giorno.
Le successive visite di studio sono state programmate per la prima, seconda e quarta settimana, con eventuali sintomi del ginocchio ed eventi avversi valutati ad ogni visita. Alla fine dello studio, i partecipanti hanno ricevuto un ulteriore esame fisico, compresi gli esami del sangue. I partecipanti sono stati contattati telefonicamente uno o due giorni prima di ogni visita per incoraggiare la loro continua conformità. Per tutto il periodo dello studio, sono stati effettuati dei conteggi delle confezioni rimaste, in modo da monitorare la conformità di ogni partecipante. Il consumo di farmaci antinfiammatori non steroidei (FANS) di salvataggio è stato anche registrato ad ogni visita.
Efficacia/Tollerabilità
I parametri di risultato primari valutati prima e durante le quattro settimane di intervento erano le sottoscale del dolore, della rigidità e del funzionamento fisico, insieme alla valutazione del dolore globale utilizzando una “scala analogica visiva” (VAS) di 100 mm dell’indice Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis (WOMAC). Abbiamo acquistato il WOMAC in lingua cinese direttamente dall’autore. I cambiamenti nella qualità della vita sono stati valutati anche utilizzando il questionario World Health Organization Quality of Life – Taiwan versione breve (WHOQOL-BREF) . La costituzione fisica di ogni soggetto è stata anche categorizzata utilizzando un questionario per l’identificazione del modello, o ‘bian zheng’ nella terminologia medica cinese, sulla base dei criteri raccomandati in Zhongyao Xinyao Linchuang Yanjiu Zhidao Yuanze (Le linee guida per la ricerca clinica sui nuovi farmaci cinesi) . Il questionario consisteva nelle seguenti categorie: frequenza del dolore, avversione al freddo e flaccidità della parte bassa della schiena e delle ginocchia (ognuna delle quali è stata valutata in termini di “occasionale o meno”, “spesso”, o “così frequente da interferire con il lavoro”), e durata della rigidità (“meno di un’ora” o “più di un’ora”).
L’indice WOMAC è una misura multidimensionale, specifica della malattia, auto-somministrata, dello stato di salute. Sonda i sintomi clinicamente importanti e rilevanti per il paziente nelle aree del dolore, della rigidità e della funzione fisica nei pazienti con osteoartrite del ginocchio. Lo strumento comprende 24 domande (cinque sul dolore, due sulla rigidità e 17 sul funzionamento fisico) e può essere completato in meno di cinque minuti. Le ponderazioni sono state introdotte per sommare le cinque voci sul dolore in un punteggio totale che quantifica prevalentemente la gravità del dolore al ginocchio nelle diverse attività quotidiane, e lo stesso processo è stato effettuato sulla rigidità e sul funzionamento fisico. La versione VAS del WOMAC è valida, affidabile e sufficientemente sensibile per il rilevamento di cambiamenti clinicamente importanti nello stato di salute a seguito di una varietà di interventi. La versione di Taiwan del WHOQOL-BREF comprende quattro domini (fisico, psicologico, sociale e ambientale) contenenti 24 sfaccettature e due item nazionali sulla qualità della vita complessiva (QOL) e sulla salute generale, con punteggi più alti che indicano una QOL superiore.
Valutazione della sicurezza
I dati ematologici e biochimici di routine sono stati raccolti al basale e alla settimana 4, compreso l’emocromo completo e le piastrine, i livelli sierici di creatinina, BUN, AST, ALT, albumina/globulina (A/G), acido urico e i livelli urinari di N-acetil-β-D-glucosaminidasi e proteina legante il retinolo. Un’infermiera di ricerca ha anche monitorato attivamente qualsiasi evento avverso e ha registrato qualsiasi segno, sintomo o sensazione inaspettata durante il periodo di studio.
Analisi statistica
La nostra analisi si è concentrata principalmente sui cambiamenti nel costrutto a tre domini della valutazione WOMAC (dolore, rigidità e funzione fisica) insieme alle misure WHOQOL. Gli effetti del trattamento sono stati descritti come cambiamenti delle differenze medie tra i partecipanti tra i punteggi misurati durante ogni visita alle settimane 1, 2 e 4 e al basale. Modelli di regressione lineare separati sono stati costruiti per le variabili di risposta dei punteggi differenziati sulle sottoscale di dolore, rigidità e funzionamento fisico, il VAS-dolore e i domini WHOQOL-BREF.
Le variabili esplicative nel modello di regressione finale erano il sesso, l’età, la gravità dell’osteoartrite al basale, l’interazione tra età e sesso, il BMI (in kg/m2), l’avversione al freddo, la flaccidità della parte bassa della schiena e delle ginocchia e l’uso di farmaci di soccorso FANS. Per esaminare il miglioramento attraverso le 3 visite, sono state incluse nel modello di regressione anche due variabili indicatrici per le visite alle settimane 2 e 4. I coefficienti delle due variabili indicatrici rappresentano le differenze tra il valore medio dei punteggi misurati per le visite alla settimana 2 e 4 rispetto a quelli della settimana 1. I termini di errore sono stati assunti come correlati tra le tre misurazioni ripetute su ciascun partecipante. Infine, ogni singolo elemento del punteggio WOMAC è stato esaminato separatamente, in modo da identificare eventuali elementi del WOMAC sensibili al trattamento con DJT. Le stime dei coefficienti e gli errori standard delle stime nei modelli di regressione multipla con termini di errore correlati sono stati ottenuti utilizzando la funzione dei minimi quadrati generalizzati del pacchetto nlme versione 3.1-60 in un software statistico gratuito R versione 2.1.1.
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