Abstract

Cél. Az elülső tok morfológiai tulajdonságainak és a hámsejtek apoptózisindukciójának összehasonlító értékelése femtoszekundumos lézerrel segített szürkehályogműtét (FLACS) és standard fakoemulsifikációs műtét után. Módszerek. 1. csoport: 30 FLACS elülső kapszulaműtét és 2. csoport: 30 manuális elülső folyamatos görbületes kapszulaműtét. Minden beteget ugyanaz a tapasztalt sebész operált. Az elülső kapszulák morfológiai jellemzőit és a hámsejtek apoptózisindukcióját értékelték. Eredmények. A műtét után 3 hónappal minden betegnél jelentős átlagos, legjobb korrigált látásélesség (BCVA) javulást tapasztaltak, és sem intraoperatív, sem posztoperatív komplikáció nem lépett fel. A kapszulahám mindkét csoportban megőrzöttnek tűnt. A pásztázó elektronmikroszkópos elemzés szabálytalan, fűrészfog alakú széleket mutatott ki az 1. csoport kapszuláiban, míg a 2. csoport kapszulái szabályos és sima széleket mutattak. Az 1. csoportban statisztikailag szignifikánsan magasabb volt a hasított kaszpáz 3 apoptotikus effektor expressziója. Következtetések. A fűrészfogas megjelenés valószínűleg a lézerimpulzusok progresszív szekvenciájának volt köszönhető a kapszulán. A lézerimpulzus alacsony energia/magas frekvencia tulajdonságai az átfedő impulzusmintázattal kombinálva a kapszula széleinek rendkívül folyamatos morfológiáját eredményezték. A FLACS-csoportban tapasztalt magasabb apoptózisindukció a fotodiszruptciótól függő plazmagenerációnak és kavitációs buborékok kialakulásának tudható be.

1. Bevezetés

A szürkehályogműtét világszerte a legtöbbet végzett sebészeti beavatkozás, a WHO becslései szerint a műtéti beavatkozások száma évente 24 millióra emelkedik .

A szürkehályogeltávolítás standard módszere évek óta a fakoemulsifikációs technika, és a folyamatos technikai fejlesztések, mint például a tiszta szaruhártya mikrosebészeti metszések, az összehajtható intraokuláris lencsék használata és a kisebb ultrahangenergia alkalmazása a lencse fragmentálásához, hatékonnyá és biztonságossá tették a szürkehályogműtétet. A bimanuális mikroincíziós szürkehályogműtét (B-MICS) a hagyományos koaxiális fakoemulzifikáció minimálisan invazív változata, amely 1,4 mm-es tiszta szaruhártya-mikrometszéseket tesz lehetővé, és egy ujjatlan fakohegyet használ különálló irrigáló chopperrel, amely az elülső kamra nagyobb stabilitását és a jobb és bal kéz műtét közbeni használatának lehetőségét biztosítja .

A legutóbbi újítás a szürkehályogsebészetben a femtoszekundumos lézertechnológia bevezetése volt. Az először a szaruhártya sebészetben bevezetett femtoszekundumos lézerekből kiindulva, amelyek célja a refraktív sebészethez szükséges szaruhártya lebenyek előállítása volt, a legújabb generációs femtoszekundumos lézerek többsége a szürkehályogsebészetben akár 160 kHz-es ismétlési frekvenciával és legfeljebb 10-15 μJ energiatartományban működik.

A fotodiszruptziós elveken alapuló ilyen típusú lézerek lehetővé teszik az eljárás néhány legnehezebb részének optimális standardizálását, beleértve a kapszulotómiát, a nukleáris fragmentációt és a szaruhártya bemetszéseket, amellett, hogy a kézi megközelítéshez képest pontosabb és reprodukálhatóbb eredményeket biztosítanak .

A femtoszekundumos lézertechnológia megjelenéséig a manuális folyamatos görbületi kapszulorhexis (mCCC) volt a standard módszer az elülső kapszula megnyitására a szürkehályogsebészetben vagy a refraktív lencsecserében. A femtoszekundumos lézerrel asszisztált szürkehályogsebészet (FLACS) forradalmasította ezt a fontos műtéti lépést, kiszámítható és görbületes kapszulaműtéteket hozva létre, amelyek jobb kapszula-intraokuláris lencse (IOL) átfedést és jobb IOL-centrációt és pozíciót eredményeznek, mint a manuális technikával. Korábbi eredmények különösen azt mutatták, hogy a FLACS kapszulotómiák ismételhető és pontos méretűek, centrikusak, és következésképpen jobb IOL-centrációt és az IOL dőlésének csökkent valószínűségét biztosítják .

Más tanulmányok vizsgálták a FLACS kapszulotómiák széleinek morfológiáját és simaságát, amelyet a lézer meghatározott hullámhossza, impulzus energiája, impulzus időtartama, impulzus mintázata, ismétlési frekvenciája és a folt mérete hoz létre . A kapszulák előzetes elemzései jelentős érdességgel járó postage-stamp aspektust mutattak, amelyet valószínűleg több tényező okozott, beleértve a kapszulotómiák létrehozásához használt lézerenergiát .

Másrészt a hátsó kapszula opacifikáció (PCO) a szürkehályogműtétek egyik legismétlődőbb hosszú távú szövődménye. Számos vizsgálatot végeztek eddig annak meghatározására, hogy mely tényezők befolyásolhatják a PCO kialakulását, beleértve az IOL kialakítását, a terápiás szerek adagolását, magát a műtéti technikát és a hátsó kapszula tisztítására szolgáló egyéb műtéti eljárásokat .

Az irodalomban leírtak szerint a lencsekapszula mechanikus vagy fotodiszruptív károsodásnak van kitéve, amikor akár kapszulorhexist, akár kapszulotómiát végeznek, aminek következtében a hámsejtek elhalnak. A hipotézis szerint a femtoszekundumos lézer ésszerűen nagyobb mértékben idézheti elő az apoptózist.

A tanulmány célja az volt, hogy értékelje az emberi elülső lencsekapszula morfológiai jellemzőit, még ultrastrukturális szinten is, manuális technikával, illetve FLACS-sel végzett szürkehályogműtétet követően. Továbbá megvizsgáltuk, hogy a két műtéti megközelítést követően indukálódott-e apoptózis az elülső tok alatti monoréteges hámban.

2. Anyagok és módszerek

A kísérleti vizsgálatot a Modena és Reggio Emilia Egyetem (Modena, Olaszország) Humán Kutatási Etikai Bizottsága hagyta jóvá, és a Helsinki Nyilatkozatnak megfelelően a Modena és Reggio Emilia Egyetem Szemészeti Intézetében végeztük. A vizsgálatba olyan betegeket vontak be, akiknél a szürkehályog LOCS III 2. vagy 3. fokozatú volt, és a látásélességük 5/10-es vagy rosszabb volt. A betegeket kizárták szemsérülés, pszeudoexfoliációs szindróma vagy egyéb szemészeti társbetegségek esetén. A vizsgálatot a hagyományos manuális szürkehályog-eltávolításon (B-MICS) vagy femtoszekundumos lézerrel asszisztált szürkehályogműtéten átesett betegek írásbeli beleegyezését követően végezték a Ziemer LDV Z8 femtoszekundumos lézerrel. Az összes műtéti eljárást ugyanaz a tapasztalt sebész (G.M.C.) végezte.

2.1. Sebészeti technikák

A következetes mydriázist 10% fenilefrin és 1% ciklopentolát instillációjával értük el, és lokoregionális anesztéziát végeztünk peribulbaris blokkal (1,5 ml lidokain 2% és 1,5 ml bupivakain 0,5%).

2.1.1. FSL-asszisztált technika

Óvatosan egy eldobható szívógyűrűt helyeztünk a szemre, középen a limbus fölé. A szívógyűrűt kiegyensúlyozott sóoldattal (BSS) töltöttük fel, hogy folyékony határfelületet hozzunk létre, és a lézerrendszer mozgó karját a szaruhártya csúcsa fölé dokkoltuk. A szemszerkezeteket az integrált optikai koherenciatomográfiás (OCT) rendszerrel mutatták be, és a kezelési paramétereket a lézerplatform beállítási varázslójának segítségével testreszabott módon határozták meg. Az energia és a frekvencia lézerimpulzus beállításai a következők voltak: 900 mW, 1 MHz a kapszulotómiához; 950-1000 mW, 2 MHz a fakofragmentációhoz; 1200-1300 mW, 2 MHz a szaruhártya bemetszésekhez. A lézeres kezelés a lencse fragmentálásával kezdődött nyolc darab pie-cut mintával, amelyet 5,2 mm átmérőjű elülső kapszulotómia követett. Végül a lézer két 1,4 mm-es szaruhártya-mikrometszést végzett 10 óránál, illetve 2 óránál. A végén a szívógyűrűt eltávolították a szemfelszínről, hogy folytathassák a phaco-eljárást. A sebész egy sima spatula segítségével ellenőrizte a CCI-k átjárhatóságát, először a limbus dőlésére merőlegesen, majd a metszés mentén gyengéd mozdulatokkal, hogy az oldalról oldalra teljesen megnyíljon. Az elülső kamrát okuláris viszkoelasztikus eszközzel (OVD) töltöttük fel, hogy folytassuk az elülső kapszula eltávolítását, ügyelve az esetleges szöveti kapszulahidakra, hogy elkerüljük a kapszulafugát.

A hidrodissectiót és a hidrodelineációt egy 26-os kanül segítségével végeztük, BSS injektálásával az elülső kapszula széle alá, ügyelve a légbuborékok mozgására, hogy elkerüljük az esetleges hátsó kapszulablokkot és szakadásokat. Bimanuális fakoemulsifikációs technikát alkalmaztunk a sejtmag leszívására egy 20-as, 30 fokos szögben álló, ujjatlan szondával és egy 19-es irrigáló chopperrel (Oertli-Instruments AG). Végül a maradék kéreg bimániás irrigálását/aspirálását végeztük el két 21-es, ovális szelvényű szondával (21-es irrigáló kézidarab sima, 21-es aspirációs kézidarab durva, Bausch & Lomb), amelyet a hátsó kapszula polírozása követett. Minden intraokuláris lencse komplikációmentesen került a kapszulazsákba. Az elülső lencsekapszula eltávolítása akár kézi elülső kapszulorhexis, akár FSL-asszisztált elülső kapszulotómia után az 1. ábrán látható.

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

1. ábra
Elülső lencsekapszula eltávolítása a B-MICS és FLACS műtéti technikák. (a) Manuális elülső capsulorhexis mikrocsipesszel; (b) a lencse megjelenése FLACS és elülső capsulotomia eltávolítása után mikrocsipesszel.

2.1.2. Az elülső capsulotomia eltávolítása mikrocsipesszel. Standard technika

A sebész két 1,4 mm-es biplanáris trapézmetszést végzett 10 óránál, illetve 2 óránál, egy előkalibrált késsel és egy kézi 5 mm-es folyamatos görbületi kapszulafeszítéssel (mCCC). A hidrodiszekciót 26-os kanüllel, a fakoemulsifikációt pedig 20-as, 30 fokos szögben álló, ujjatlan szondával és irrigáló chopperrel (Bragamele 19-es) végeztük. A fako-fraktúrát a stop-and-chop technikával értük el. Az irrigálást/aspirációt két 21-es, ovális szelvényű szondával végeztük (21-es irrigáló kézidarab sima Stellaris, 21-es aspirációs kézidarab durva, Bausch & Lomb). Mindkét technikánál az IOL beültetése a fő bemetszés megnagyobbítása nélkül történt; a bemetszéseket hidrovarrással varrták össze. A BunnyLens AF IOL-t (Hanita Lenses, Izrael) 1,4 mm-es mikrometszésen keresztül ültették be sebasszisztált technikával a ViscoJect™ BIO 1,5 injektoron keresztül. A műtét végén az OVD-t eltávolították, és a metszéseket biztonsági okokból hidratálták.

A posztoperatív terápia tobramicin és dexametazon szemcseppekből állt 15 napon át naponta négyszer, majd további 15 napon át naponta háromszor flurbiprofen szemcseppekből.

2.2. A műtétet követően az OVD-t eltávolították és a metszéseket hidratálták. Morfológiai értékelés: Fáziskontrasztos, szövettani és pásztázó elektronmikroszkópos elemzések

A műtéti eltávolítást követően azonnal foszfátpufferes sóoldattal (PBS) mostuk az FSL-asszisztált vagy standard technikával nyert elülső lencsekapszulamintákat. A mindkét szürkehályog-műtéti technikát követően nyert kapszulák morfológiájának és széleinek értékelése érdekében a mintákat fáziskontrasztos, szövettani és pásztázó elektronmikroszkópos elemzésekre dolgoztuk fel. A minták egy részét 4%-os paraformaldehiddel (PFA) PBS-ben 20 percig szobahőmérsékleten fixáltuk. Ezután a mintákat háromszor mostuk PBS-szel, majd Nikon Eclipse TE2000-U inverz mikroszkóp segítségével megfigyeltük. A reprezentatív fáziskontrasztos képeket egy CCD Hamamatsu ORCA 285 kamerával készítettük. Ezt követően a mintákat feldolgoztuk szövettani elemzéshez, fokozatos etanollal történő dehidratálással, tisztítással és paraffinba ágyazással. Minden mintából öt μm vastag sorozatmetszeteket vágtunk, és rutinszerű hematoxilin/eozin (H&E) festést végeztünk a morfológiai részletek elemzése és az elülső kapszulák vastagságának mérése céljából.

A begyűjtött minták egy másik részét közvetlenül a műtéti beavatkozások után 0,1 M pH 7,4 Sorenson-foszfátpufferrel (PB) mostuk, és 1%-os glutaraldehiddel fixáltuk 0,1 M pH 7,4 PB-ben. Három PB-ben történő mosás után az elülső lencsekapszula mintákat fokozatos etanollal dehidratáltuk, amíg a SEM-megfigyelést el nem végeztük. A SEM-felvételeket Nova NanoSEM 450 (FEI) pásztázó elektronmikroszkóppal (SEM) készítettük.

Az elemzések fő célja a hámsejtek rétegének, a kapszula szélein található rojtok jelenlétének, valamint a szélek érdességének/simaságának értékelése volt.

2.3. A SEM-felvételek a lencsekapszulából készültek. Az apoptózis értékelése a LEC-kben

Az apoptózis előfordulásának értékelése érdekében az elülső lencsekapszulához tapadó lencsehámsejtekben a B-MICS sebészeti megközelítést követően és az impulzusenergia femtoszekundumos lézerrel történő felszabadítása után a mintákat konfokális immunfluoreszcens elemzésre dolgoztuk fel a korábban leírtak szerint . Röviden, a 4%-kal rögzített kapszulákat PBS-szel mostuk, majd 3% szarvasmarha-szérumalbumin (BSA) tartalmú PBS-szel telítettük 30 percig szobahőmérsékleten. Ezután a mintákat 3% BSA-t tartalmazó PBS-ben 1 : 50 arányban hígított nyúl anti-cleaved kaszpáz 3 primer antitesttel (Cell Signaling) inkubáltuk 1 órán keresztül szobahőmérsékleten. A 3% BSA-t tartalmazó PBS-ben történő mosás után a mintákat kecske antinyúl Alexa546 másodlagos antitesttel (Life Technologies) inkubáltuk, amelyet 1 : 200 arányban hígítottunk 3% BSA-t tartalmazó PBS-ben. Ezután a mintákat PBS-szel mostuk, 1 mg/ml 4′,6-diamidino-2-fenilindollal (DAPI) PBS-ben 1 percig festettük, majd fakulásgátló közeggel rögzítettük. A fluoreszcens mintákat Nikon A1 konfokális lézerpásztázó mikroszkóppal figyeltük meg. A konfokális sorozatmetszeteket ImageJ szoftverrel dolgoztuk fel, hogy háromdimenziós vetületeket kapjunk, a képek renderelését pedig az Adobe Photoshop szoftver .

2.4 segítségével végeztük. Statisztikai elemzés

Az adatokat statisztikai szoftverrel (GraphPad Prism Software version 7 Inc., San Diego, CA, USA) értékeltük ki. A két kísérleti csoport közötti különbségeket Student-teszttel elemeztük. Az adatokat átlag ± SD-ben fejeztük ki. Minden egyes kísérleti kiértékelést három példányban végeztünk. A szignifikanciát minden esetben .

3. Eredmények

3.1. Klinikai megfigyelések

Az 1. csoportban (FLACS) 30 beteg (10 férfi és 20 nő) 30 szemét (15 jobb és 15 bal szemét) vonták be a vizsgálatba; az átlagéletkor 74,07 ± 8,48 év volt. A 2. csoport (B-MICS) esetében 30 beteg (8 férfi és 22 nő) 30 szemét (13 jobb szemét és 17 bal szemét) vonták be a vizsgálatba; az átlagéletkor 75,72 ± 9,16 év volt. Minden szembe BunnyLens AF IOL-t ültettek be. Minden IOL-t zsákba ültettek be.

A teljes műtéti idő az 1. csoportban 17,89 ± 3,80 perc volt, míg a 2. csoportban 12,63 ± 2,10 perc, a különbség statisztikailag szignifikánsnak bizonyult (). Az 1. csoportban nem figyeltek meg sem hiányos kapszulotómiát, sem kapszulagombokat; továbbá mindkét csoportban nem észleltek sem intraoperatív, sem posztoperatív komplikációt.

Három hónappal a műtét után az 1. csoportban átlagosan 0,460 ± 0,249 LogMar BCVA javulást figyeltek meg (a kiindulási értékekhez képest). Hasonlóképpen, a 2. csoportban ugyanebben az értékelési időpontban 0,417 ± 0,150 LogMar átlagos BCVA javulást figyeltek meg ( a kiindulási értékekhez képest). A két csoport között nem észleltünk statisztikailag szignifikáns különbséget a látásélesség javulásában.

Asztigmatizmus és a szaruhártya pachymetria tekintetében sem az egyes csoportokon belül, sem a két csoport között nem észleltünk statisztikailag szignifikáns különbséget a kiindulási és a műtét utáni értékek között, Student-teszt segítségével ().

Végül az endotélsejtek számát (ECC) tekintve az 1. csoportban a 3 hónapos utánkövetéskor 162,27 ± 225,11 sejt/mm2 -es átlagos endotélsejtveszteséget találtunk, a 2. csoportban pedig 322,52 ± 339,93 sejt/mm2 -es csökkenést a műtét után, amely csökkenés statisztikailag szignifikáns volt akár az egyes csoportokon belül, akár a két csoport között ().

3.2. Az endotélsejtek száma az 1. csoportban a 3 hónapos utánkövetéskor 162,27 ± 225,11 sejt/mm2 -es volt. Morfológiai elemzés: Fáziskontrasztos, szövettani és pásztázó elektronmikroszkópos elemzések

A fáziskontrasztos felvételek jól konzervált sejtmaggal és citoplazmával rendelkező epitélsejteket mutattak, emellett a hámfelszín nagy részén ép sejthatárokat mutattak, kivéve a kapszulaszélek közeli részeit, ahol az epitélsejtek leváltak az alapmembránról (2. ábra (a)). A kapszulák szélei szabályosnak és simának tűntek, amint az a 2. a) ábrán látható. Ami a kapszula megjelenését illeti a FLACS csoportban, a hámsejtek többnyire az alapmembránhoz tapadtak, míg a szélek kevésbé szabályos, fűrészfogas mintázatot mutattak (2. ábra (b)). A szövettani elemzés megerősítette, hogy a B-MICS csoport néhány mintája a hámréteg részleges leválását mutatta a bazálmembránról, míg a FLACS csoport legtöbb kapszulája a hámsejtek és a bazálmembrán folyamatos tapadását mutatta (3. ábra). Továbbá a kapszula vastagságának mérése a két kísérleti csoport között különbséget mutatott, bár statisztikai szignifikancia nélkül. Különösen a FLACS technika után nyert minták mutattak nagyobb vastagságot a B-MICS-ből származó kapszulákhoz képest (az adatok nem láthatóak).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

2. ábra
Az elülső lencsekapszula szövettani értékelése. B-MICS-technikával (a) és femtoszekundumos lézerrel asszisztált szürkehályogműtétből (b) kapott elülső lencsekapszulák széleit és hámrétegét mutató fáziskontrasztos felvételek. Sáv: 100 μm.

3. ábra
Az elülső lencsekapszulák szövettani vizsgálata. A minták keresztmetszeteit hematoxilinnal és eozinnal festettük. A jobb oldalon a nagyobb nagyítású képek a hámréteg részleteit mutatják a B-MICS és FLACS technikával nyert mintákban. Sáv: 10 μm.

A 4. ábrán közölt SEM-elemzés végül nagyobb felbontással mutatta ki, hogy a hámsejtek bazálmembránhoz való tapadása mennyire egyenletes, és mindenekelőtt a kapszulaszélek megjelenését. Különösen a B-MICS csoportban a kapszulaszélek szabályos, sima és áttetsző peremmel rendelkeztek (4. ábra (a)). Egyébként a FLACS segítségével kapott kapszulák szélei egyértelműen szabálytalan és rojtos megjelenést mutattak (4. ábra (b)).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

4. ábra
Pásztázó elektronmikroszkópos elemzés. A B-MICS (a) és (b) FLACS technikával nyert minták reprezentatív képei, amelyeken a hámréteg (balra) és a szélek megjelenése (jobbra) látható különböző nagyításokban.

3.3. A minták reprezentatív képei. Az apoptózis értékelése a LEC-ekben

A konfokális immunfluoreszcens elemzés kimutatta, hogy a B-MICS csoportból vagy a FLACS csoportból nyert minták lencsehámsejtjeiben apoptózis következett be, amint azt az 5. ábra (a) mutatja. Míg a kézi műtéti technikával nyert kapszulákban a hasított kaszpáz 3 jelenléte főként a kapszula széleihez közelebbi epitélsejtekben volt megfigyelhető, addig a FLACS technikát követően gyűjtött mintákban a hasított kaszpáz 3 elleni festődés jobban elterjedt, a peremtől a hámréteg magjáig. A hasított kaszpáz 3 pszeudoszínű képeit a korábban leírtak szerint nyertük, és az 5. b) ábrán ismertetjük. Az immunfluoreszcens jeleken végzett denzitometriai elemzés félkvantitatív adatokat szolgáltatott az apoptotikus effektor, a hasított kaszpáz 3 expressziójáról, amely statisztikailag szignifikánsan magasabb volt a FLACS csoportban, a B-MICS csoporthoz képest (5. ábra (b); ).

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

5. ábra
A sejt apoptózisának értékelése az elülső lencsekapszulához tapadó epithelsejtekben. (a) Immunfluoreszcens analízist végeztünk hasított kaszpáz 3 ellen (piros), a sejtmagokat pedig DAPI-val (kék) ellenfestettük. (b) Pszeudokolor képek (fent) és denzitometriai elemzés (lent) a hasított kaszpáz 3 epitélsejtekben. Sáv: 20 μm.

4. Megbeszélés

A femtoszekundumos lézerek alkalmazása a legújabb vívmányt jelenti a szürkehályogsebészetben, kezdve az első klinikai alkalmazásukkal 2008-ban. Az optimális refraktív eredményre vonatkozó elvárások kielégítésének növekvő szükségessége miatt számos új fejlesztés teljesült.

A femtoszekundumos lézer alkalmazása a szürkehályogsebészetben lehetővé tette az eljárás biztonságának és hatékonyságának javítását, amint azt az irodalom is jól dokumentálja . Valóban, korábbi jelentések bizonyították a szürkehályogműtét legnehezebb fázisainak nagyfokú megismételhetőségét és pontosságát a kivitelezésben, beleértve az optimalizált elülső kapszulotomiákat, amelyek jó szakítószilárdságú, folyamatos, éles szélű vágást eredményeztek .

Vizsgálatunkban a standard fakoemulzifikációs technikával, illetve a FLACS-sel nyert emberi elülső kapszulák morfológiai jellemzőit értékeltük. Az utóbbiakat a Ziemer LDV Z8, egy olyan femtoszekundumos lézer használata után gyűjtöttük, amely kihasználja az alacsony energiájú, magas frekvenciájú rendszer előnyeit (magas impulzusismétlési frekvencia – akár 10 MHz – nagyon alacsony, 100-150 nJ energiával kombinálva), és folyékony optikai interfészt használ a kapszulotómia és a lencsetöredezés fázisainak megkönnyítésére. Ezek a tulajdonságok lehetővé tették, hogy a kézi technikával nyert mintákhoz képest olyan elülső kapszulamintákat nyerjünk, amelyek jól megőrzött szövettani felépítésűek, a hámsejtek egyenletesen tapadnak, amint azt a fáziskontraszt- és SEM-elemzések kimutatták. A meglévő szakirodalommal összhangban a FLACS-sel nyert elülső kapszulák szélei kevésbé szabályosak voltak, és fűrészfogas mintázat jellemezte őket a kézi technikával előállított sima peremhez képest. A FLACS-csoportban megfigyelt mintázat valószínűleg a Femto LDV Z8 lézer nagy sűrűségű impulzusraszterének és nagy pontosságú optikájának tulajdonítható, amelyek több egymást átfedő foltot eredményeznek, amelyek folyamatos tiszta vágást hoznak létre, hasonlóan a B-MICS technikával kapotthoz .

A FLACS technikával nyert elülső kapszulaminták szintén nagyobb vastagságot mutattak a B-MICS technikával nyert kapszulákhoz képest, ami valószínűleg az elülső kapszulához tapadó kéreg jelenlétének köszönhető.

A szövettani jellemzők mellett adataink azt mutatták, hogy mindkét műtéti technikával nyert elülső kapszula hámsejtjeiben apoptózis következett be. Különösen a hasított kaszpáz 3 expressziója volt szignifikánsan magasabb a FLACS után gyűjtött mintákban, a pozitív festődés nem korlátozódott a vágási perem mentén elhelyezkedő sejtekre, hanem a kapszula belső magjára is kiterjedt, ami a sejthalál szélesebb körű indukciójára utal. Ezzel szemben a B-MICS-eljárásból származó kapszulamintákhoz tapadó hámrétegben csak a vágási perem mentén mutattak ki apoptózist, ami az elülső kapszula csipesszel történő eltávolítása által kiváltott mechanikai sérülés következménye. Ez a nagyobb apoptotikus esemény, amely az elülső kapszula alatti monoréteges hámot érinti a FLACS után, valószínűleg a lézerimpulzus energiájának, a fotodiszpozíciótól függő plazmaképződésnek és az azt követő kavitációs buborékok létrejöttének köszönhető. Adataink összhangban vannak a Mayer et al. korábbi megállapításaival, és különösen az apoptotikus effektor hasított kaszpáz 3 elterjedt expressziója olyan pozitív előrejelző tényezőt jelenthet, amely lehetővé teszi a kapszulazsák elhomályosodásának megelőzését a maradék hámsejtek proliferációjának erőteljes gátlásával, amely általában a posztoperatív gyulladásos válasszal korrelál . Klinikai szempontból vizsgálatunk kiemelte, hogy 3 hónappal a műtét után a FLACS- vagy a B-MICS-csoportba tartozó betegek statisztikailag szignifikáns javulást mutattak a legjobb korrigált látásélesség (BCVA) értékeiben a kiindulási mérésekhez képest. Figyelemre méltó, hogy ami az endotélsejtek számát illeti, a FLACS-csoportban statisztikailag szignifikáns csökkenés volt megfigyelhető a szaruhártya endotélsejtveszteségében, ami a rövidebb fakoemulsifikációs időnek tulajdonítható esemény. Ezek az adatok összhangban vannak a korábbi eredményekkel, amelyek azt mutatják, hogy a lézeres szürkehályogműtét kevésbé traumatizálja a szaruhártya-endothelt amellett, hogy egy kezdeti tanulási görbén keresztül eszközt kínál a sebészek számára a szürkehályogműtét kritikus fázisainak standardizálására .

5. Következtetések

A femtoszekundumos lézer alkalmazása a szürkehályogsebészetben lehetővé teszi az eljárás néhány legnehezebb lépésének optimalizálását, beleértve a kapszulotómiát, a nukleáris fragmentációt és a szaruhártya bemetszéseket, amellett, hogy pontosabb és megismételhetőbb eredményeket biztosít. Eredményeink összhangban vannak a meglévő irodalommal; azonban további vizsgálatokra lesz szükség a manuális technika és a femtoszekundumos lézer fényes oldalainak összehangolásához, a lézerenergia, az ismétlési frekvencia és a foltméret optimális kombinációjának meghatározásával, annak érdekében, hogy jobb minőségű, a manuális kapszulorhexishez hasonló szabályos vágási élekkel rendelkező kapszulotómiákat kapjunk, és hogy csökkentsük a szem gyulladásos válaszát, ezáltal megelőzzük a lencsehámsejtek proliferációját és a kapszulazsák elhomályosodását.

Rövidítések

FLACS: Femtoszekundumos asszisztált lézeres szürkehályogműtét
B-MICS: Bimanuális mikroincíziós szürkehályogműtét
mCCC: Manuális folyamatos görbületi kapszulakorrekció
IOL: Intraokuláris lencse
PCO: Posterior capsula opacification
BSS: Balanced salt solution
OCT: Optikai koherencia tomográfia
OVD: Ocularis viszkoelasztikus készülék
PBS: Foszfát puffer sóoldat
PFA: Paraformaldehid
H&E: Haematoxilin/eozin
SEM: Pásztázó elektronmikroszkóp
BSA: Bovine serum albumin
DAPI: 4′,6-Diamidino-2-phenylindole.

Tájékoztatás

Ezt a munkát részben a 2017. évi 20. AICCER (Associazione Italiana di Chirurgia di Chirurgia della Cataratta e Refrattiva) találkozón mutatták be, március 9-11., Rimini (Olaszország), 2017.

Érdekütközések

A szerzők kijelentik, hogy nem állnak fenn pénzügyi összeférhetetlenségek.

Articles

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.