A homeosztázismodell-értékelés megbízható mutatója az inzulinrezisztenciának a 2-es típusú cukorbetegek követése során

KUTATÁS TERVEZÉSE ÉS MÓDSZEREK

A jelen vizsgálatba összesen 55, kizárólag diétával és szulfonilureákkal kezelt 2-es típusú cukorbetegségben szenvedő beteget vontak be (1. táblázat). A BMI-t a testsúly (kilogrammban) és a testmagasság (méterben) négyzetének hányadosaként határozták meg.

A cukorbetegséget az American DiabetesAssociation kritériumai szerint diagnosztizálták (14). Azokat az alanyokat, akiknél az éhomi plazma glükózszint ≥7,0 mmol/l volt, ideiglenesen cukorbetegnek diagnosztizálták. Ezt követően az alanyok 75 g-os orális glükózérzékenységi vizsgálaton (OGTT) estek át (Trelan G 75; Shimizu, Shizuoka, Japán), és azoknál, akiknél az éhomi plazma glükózszint ≥7,0 mmol/l vagy a 2 órás plazma glükózszint≥11,1 mmol/l volt, diagnosztizálták a cukorbetegséget. A 2-es típusú cukorbetegséget az inzulinszekréció mértéke, az életkor, a kialakulás módja és a cukorbetegség családi előzményei alapján határozták meg.

A felvételkor 50 beteget kizárólag diétával, 5 beteget pedig szulfonilureával (glibenklamid 2,5-5,0 mg/nap) kezeltek. Egyik beteget sem kezelték inzulinnal vagy inzulinérzékenyítő szerekkel. Tizenöt betegnél perifériás neuropátia és egyszerű diabéteszes retinopátia, 10 betegnél pedig mikroalbuminuria volt. Makrovaszkuláris szövődményt nem észleltek.

A vizsgálat megkezdése előtt minden betegtől tájékozott beleegyezést kaptak.

A vizsgálat felépítése

A felvétel után a betegeket 6 hétig diétás és mozgásterápiának vetették alá. A diétás kezelés a következő volt: A diéta 20% (energia) fehérjéből, 25% zsírból és 55% szénhidrátból állt. A diétás kezelés betartását hetente kétszer dietetikus ellenőrizte. A mozgásterápia során a betegek naponta körülbelül 10 000 lépést tettek meg; a napi lépések számát lépésszámlálóval számolták, és a számolást minden nap egy ápoló ellenőrizte. Az étrend és a mozgásterápia nem változott a kezelés során.

A glükóz, a HbAlc és az inzulin vérszintjét; a Clamp-IR, a HOMA-IR és az inzulinérzékenység egyszerű indexeinek (a 75 g-os OGTT során kapott 30 perces és 2 órás glükóz, 30 perces és 2 órás inzulin, valamint 30 perces és 2 órás inzulinérzékenységi index)(9,10) értékeit; valamint a testzsírterületet és a vérnyomást minden betegnél a felvételt követő 1 héten belül és az elbocsátás előtt 1 héttel mérték. A szulfonilureákat a clamp-vizsgálat előtt 1 nappal kivonták; az első clamp-vizsgálat után a kezelés alatt egyik beteg sem kapott gyógyszert.

A plazma glükózszintjét automatizált enzimatikus módszerrel mértük. AHbAlc-t (normálérték 4,3-5,8%) nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával mérték. A szérum inzulint immunoradiometriai teszttel (Insulin Riabead II kit; Dainabot, Tokió) mértük. Ez a készlet125I-jelölt és nem-jelölt anti-humán inzulin mousemonoklonális antitesteket tartalmazott. A vizsgálat intra- és interassay variációs együtthatója 1,9, illetve 2,0% volt.

Az IR-t hiperinsulinémiás-euglikémiás clamp technikával értékeltük, mesterséges hasnyálmirigy (STG-22; Nikkiso, Tokió) segítségével (1,7,15,16,17,18), két teflonbevonatú kanült helyeztek be; az egyiket a bal antecubitális vénába vezették be az inzulin (Humulin R; Eli Lilly, Indianapolis, IN) és a 10%-os glükóz infúziójához, a másikat pedig a jobb kontralaterális fűtött kézvénába az artériás vérvételhez.A glükóz és az inzulin meghatározásához szükséges alapszintű vérvételek után a kezdeti 10 perc alatt egy adag inzulint adtak be, amely a szérum inzulinszint gyors, a kívánt szintre (1200 pmol/l) történő emelése érdekében logaritmikusan csökkenő ütemben adagolták; ezt az inzulinszintet ezután 120 percen keresztül 13,44 pmol – kg-1 – perc-1 sebességű, folyamatos inzulininfúzióval tartották fenn. Az átlagos inzulinszint a clamp vizsgálat megkezdése után 90 és 120 perc között stabil szintet ért el (kezelés előtt 1.224,0 ± 208,8 pmol/l; kezelés után 1.177,2 ± 232,8 pmol/l).A vércukorszintet folyamatosan ellenőrizték és 10%-os glükóz infúzióval a kívánt szinten tartották (5,24 mmol/l). Az utolsó 30 perc alatt adott glükóz átlagos mennyiségét tekintettük a glükóz infúziós sebességének, amelyet a clamp IR értékének tekintettünk.

HOMA-t használtunk az inzulinrezisztencia értékelésére a kezelés előtt és után(2). Feltételezve, hogy a <35 éves, normál testsúlyú normál alanyok IR értéke 1, a betegre vonatkozó értékek kiszámíthatók az inzulin és a glükóz éhomi koncentrációjából a következő képlet segítségével: éhomi szérum inzulin (μU/ml) × éhomi plazma glükóz (mmol/l)/22,5 . A HOMA-IR mérésekhez minden alanyból reggel 8:00 órától vettek vérmintát egy éjszakai ágynyugalom után. Három különálló, 15 perc különbséggel vett inzulinmintát vizsgáltunk, és az átlagos inzulinszintet használtuk a HOMA-IR kiszámításához. A HOMA-IR reprodukálhatóságának becslése érdekében minden betegnél elemeztünk egy második HOMA-IR-t egy másik alkalommal, az első HOMA-IR-t követő 5 napon belül, a kezelés előtt és után. A HOMA-IR variációs együtthatója a kezelés előtt 10,2% és 9,8% volt a kezelés után.

A 75 g-os OGTT-t reggel 8:00 órától kezdtük egy éjszakai ágynyugalom után (11:00 óra éhség). Vért vettek 0, 30 és 120 percenként, és kiértékelték a plazmaglükóz és a szérum inzulin szintjét.

A testzsírterületet a korábban leírtak szerint értékelték(19). A teljes keresztmetszeti területet, az intraabdominális zsigeri zsírterületet és a szubkután zsírterületet a köldök magasságában végzett hasi komputertomográfiával mértük. Minden olyan intraperitoneális régiót, amelynek sűrűsége megegyezett a szubkután zsírréteg sűrűségével, zsigeri zsírterületként definiáltunk.

A vérnyomást háromszor határoztuk meg fekvő helyzetben, 5 perces pihenést követően.

Statisztikai elemzések

Az adatokat átlag ± SD-ben fejeztük ki. A kezelés előtt és után mért változók átlagainak összehasonlítására Student’s t tesztet végeztünk. A clamp IR és az inzulinérzékenység több klinikai indexének kapcsolatát egyváltozós regressziós elemzéssel értékelték.A HOMA-IR és a clamp IR közötti regressziós egyenesek összehasonlítását a meredekség és a metszéspont tekintetében a kezelés előtt és után kovarianciaelemzéssel végezték; ebben az elemzésben az F-tesztet használták a két regressziós együttható közötti különbség értékelésére. A normális eloszlás megközelítése érdekében a HOMA-IR és a clamp IR értékeit a regresszió és a kovarianciaelemzés előtt logaritmikusan transzformálták. A Student-tesztet és a korrelációkat a StatView 4.0 szoftverprogram (Abacus Concepts, Berkeley, CA) segítségével végeztük el Macintosh számítógépen. A kovarianciaelemzést és a regresszióelemzést a PRISM 2.0 szoftverprogrammal (Graph-Pad software, San Diego, CA) végezték Macintosh számítógépen. A P < 0,05 valószínűségi értéket kétoldalas tesztek esetén statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.