Udformning af forskning og metoder
I alt 55 patienter med type 2-diabetes, der blev behandlet med kost alene og med sulfonylurinstoffer, blev indskrevet i nærværende undersøgelse (Tabel 1). BMI blev estimeret ved at dividere kropsvægten (i kilogram) med kvadratet påhøjden (i meter).
- Se inline
- Se popup
- Download powerpoint
Diabetes blev diagnosticeret i henhold til kriterierne fra American DiabetesAssociation (14). Personer med et fastende plasmaglukoseniveau ≥7,0 mmol/l blev foreløbigt diagnosticeret som havende diabetes. Derefter gennemgik forsøgspersonerne en 75-g oral glukosetolerancetest (OGTT) (Trelan G 75; Shimizu, Shizuoka, Japan), og forsøgspersonerne med et fastende plasmaglukoseniveau ≥7,0 mmol/l eller et 2-h plasmaglukoseniveau≥11,1 mmol/l blev diagnosticeret som havende diabetes. Type 2-diabetes blev defineret i henhold til graden af insulinsekretion, alder, mønsteret for udbruddet og eksistensen af diabetes i familien.
Ved indlæggelsen blev 50 patienter behandlet med diæt alene og 5 med sulfonylurinstoffer (glibenklamid 2,5-5,0 mg/dag). Ingen af patienterne blev behandlet med insulin eller insulinsensibiliserende midler. Femten patienter havde perifer neuropati og simpel diabetisk retinopati, og 10 havde mikroalbuminuri. Makrovaskulære komplikationer blev ikke påvist.
Informeret samtykke blev indhentet fra alle forsøgspersoner før studiets begyndelse.
Studieopbygning
Efter indlæggelsen blev patienterne underkastet diæt- og motionsterapi i 6 uger. Diætbehandlingen var som følger: Den var sammensat således: 1.440-1.720 kcal/dag med en kost bestående af 20 % (energi) protein, 25 % fedt og 55 % kulhydrater. Overholdelsen af diætbehandlingen blev kontrolleret af en diætist to gange om ugen. I løbet af motionsterapien gik patienterne ca. 10 000 skridt dagligt; antallet af skridt pr. dag blev talt ved hjælp af en skridttæller, og tællingen blev kontrolleret af en sygeplejerske hver dag. Kost- og motionsterapien blev ikke ændret i løbet af behandlingsforløbet.
Blodniveauerne af glukose, HbAlc og insulin; værdierne afclamp-IR, HOMA-IR og de simple indekser for insulinfølsomhed (30-min- og 2-h glukose, 30-min- og 2-h insulin og 30-min- og 2-h insulinsensitivitetsindeks opnået under en 75-g OGTT)(9,10);og kropsfedtareal og blodtryk blev målt hos alle forsøgspersoner inden for 1 uge efter indlæggelsen og 1 uge før udskrivelsen. Sulfonylurinstoffer blev trukket tilbage 1 dag før clampundersøgelsen; ingen af patienterne modtog noget lægemiddel efter den første clampundersøgelse under behandlingen.
Plasmaglukoseniveauet blev målt ved en automatiseret enzymatisk metode. HbAlc (normalværdi 4,3-5,8 %) blev målt ved højtydende væskekromatografi. Seruminsulin blev målt ved hjælp af et immunoradiometrisk testsæt (Insulin Riabead II-sæt; Dainabot, Tokyo). Dette kit indeholdt125I-mærkede og umærkede anti-humane insulin-mousemonoklonale antistoffer. Variationskoefficienterne inden for og mellem prøverne var henholdsvis 1,9 og 2,0 %.
Clamp IR blev evalueret ved hjælp af hyperinsulinemisk-euglykæmisk clamp-teknik ved hjælp af kunstig pancreas (STG-22; Nikkiso, Tokyo)(1,7,15,16,17,18).Kort fortalt blev der kl. 8:00 om morgenen, Den ene blev indsat i den venstre antecubital vene til infusion af insulin (Humulin R; Eli Lilly, Indianapolis, IN) og 10 % glukose, og den anden blev indsat i den højre kontralaterale opvarmede håndvene til arterialiseret blodprøvetagning.Efter basisblodprøver til glukose- og insulinbestemmelse blev der i løbet af de første 10 min. givet en dosis insulin på en alogaritmisk faldende måde for at hæve seruminsulinet hurtigt til det ønskede niveau (1 200 pmol/l); dette insulinniveau blev derefter opretholdt ved en kontinuerlig insulininfusion med en hastighed på 13,44 pmol – kg-1- min-1 i 120 min. Det gennemsnitlige insulinniveau nåede et stabilt niveau mellem 90 og 120 min efter påbegyndelsen af clamp-undersøgelsen (før behandling 1 224,0 ± 208,8 pmol/l; efter behandling 1 177,2 ± 232,8 pmol/l).Blodglukose blev overvåget kontinuerligt og holdt på det ønskede niveau (5,24 mmol/l) ved at infundere 10 % glukose. Den gennemsnitlige mængde glukose, der blev givet i løbet af de sidste 30 minutter, blev betragtet som glukoseinfusionshastigheden, der blev taget som værdien af clamp IR.
HOMA blev anvendt til at vurdere insulinresistens før og efter behandlingen(2). Under antagelse af, at normalsubjekter i alderen <35 år med normalvægt har en IR på 1, kan værdierne for en patient beregnes ud fra fastekoncentrationerne af insulin og glukose ved hjælp af følgende formel: fasteseruminsulin (μU/ml) × fastesplasmaglukose (mmol/l)/22,5. Blodprøver til HOMA-IR-målinger blev udtaget fra hver person fra kl. 8.00 om morgenen efter en nats sengeleje. Vi undersøgte tre separate insulinprøver, der blev taget med 15 minutters mellemrum, og det gennemsnitlige insulinniveau blev anvendt til HOMA-IR-beregningen. For at vurdere HOMA-IR’s reproducerbarhed analyserede vi en anden HOMA-IR hos alle patienter ved en anden lejlighed inden for 5 dage efter den første HOMA-IR før og efter behandlingen. Variationskoefficienten for HOMA-IR før behandlingen var 10,2 % og 9,8 % efter behandlingen.
Den 75-g OGTT blev startet fra kl. 8:00 om morgenen efter en nats sengeleje (sult i 11:00 timer). Blod blev taget ved 0, 30 og 120 min, og plasmaglukose- og seruminsulinniveauer blev evalueret.
Kropsfedtområdet blev evalueret som tidligere beskrevet(19). Det samlede tværsnitsareal, det intraabdominale viscerale fedtareal og det subkutane fedtareal blev målt ved abdominal computertomografi taget på navleniveau. Ethvert intraperitonealt område med samme tæthed som det subkutane fedtlag blev defineret som et visceralt fedtområde.
Blodtrykket blev bestemt tre gange i rygliggende stilling efter 5 minutters hvile.
Statistiske analyser
Data er udtrykt som gennemsnit ± SD. Student’s t-test blev udført for at sammenligne middelværdierne af variabler målt før og efter behandlingen. Sammenhængen mellem clamp IR og flere kliniske indekser for insulinfølsomhed blev evalueret ved univariat regressionsanalyse.Sammenligning af regressionslinjerne med hensyn til hældninger og intercepter mellem HOMA-IR og clamp IR før og efter behandling blev foretaget ved hjælp af kovariansanalyse; i denne analyse blev F-testen anvendt til at evaluere forskellen mellem to regressionskoefficienter. For at nærme sig en normal fordeling blev værdierne af HOMA-IR og clamp IR alle transformeret logaritmisk før regressions- og kovariansanalysen. Student’s test og korrelationer blev udført ved hjælp af StatView 4.0-softwareprogrammet (Abacus Concepts, Berkeley, CA) til Macintosh. Kovariansanalyse og regressionsanalyse blev udført ved hjælp af softwareprogrammet PRISM 2.0 (Graph-Pad software, San Diego, CA) til Macintosh. En sandsynlighedsværdi på P < 0,05 ved tosidet test blev betragtet som statistisk signifikant.