La miniaturisation des tests de criblage à haut débit (HTS) a été une stratégie largement débattue et étudiée dans le but de réduire les coûts de criblage et d’augmenter la vitesse tout en ne compromettant pas la qualité des données. Dans ce contexte, les technologies de manipulation des liquides continuent d’être améliorées. Un développement nouveau et prometteur est l’émergence des distributeurs de nanolitres, qui sont capables de transférer directement les composés dans les microplaques d’essai. Dans cette étude, nous avons étudié la miniaturisation d’un essai de kinase HTS et comparé les performances réelles de la technologie actuelle de transfert par déplacement d’air (système MiniTrak V) et d’un distributeur de nanolitres basé sur un capillaire (CyBi-HummingWell). La robustesse et l’efficacité des formats de dosage miniaturisés ont été comparées en testant la staurosporine pour générer des courbes dose-réponse et 340 composés actifs précédemment identifiés. Grâce au dispositif MiniTrak, la miniaturisation des tests est passée de 18 microlitres à 6 microlitres dans des plaques à 384 puits et à 1536 puits. En utilisant le distributeur de nanolitres, la miniaturisation a été réalisée jusqu’à 5 microL dans des plaques à 1536 puits. Les facteurs Z’ obtenus pour chaque format de dosage étaient systématiquement supérieurs à 0,5. Les données présentées ici décrivent la reproductibilité des résultats obtenus avec les deux technologies de transfert et mettent en évidence les problèmes possibles pour l’identification des hit.