NASAL DELIVERY – A Promising Route of Drug Delivery to the Brain: Tieteellisiä näkökohtia

ABSTRACT

Yksi tekijöistä, jotka rajoittavat useimpien lääkkeiden kykyä hoitaa keskushermoston (CNS) häiriöitä, liittyy siihen, missä määrin lääke pystyy ylittämään veri-aivoesteen (BBB). Aivoihin johtavien verikapillaarien endoteelisoluissa on tiukkoja liitoksia, jotka toimivat esteenä useimmille lääkkeille ja estävät lääkkeiden ja liuottimien kyvyn ylittää tämä este. BBB rajoittaa tehokkaasti hydrofiilisten yhdisteiden siirtymistä verisuoniosastosta aivokudokseen. Toisin kuin muissa kudoksissa, kapillaarien seinämien yli ei tapahdu irtovirtausta solujen välisten tiukkojen liitosten vuoksi. Muutaman viime vuosikymmenen aikana on ollut useita innovatiivisia lääkeannostelumetodeja, joilla voidaan voittaa BBB:n ylittämiseen liittyvät haasteet.

Yksi tällaiseksi lähestymistavaksi on valittu lääkkeiden toimittaminen nenän kautta. Tieteellinen tuki sille, että lääkkeiden toimittaminen nenän kautta voi johtaa suurempiin pitoisuuksiin lääkkeitä, jotka voivat ylittää BBB:n, kasvaa jatkuvasti. Tähän lähestymistapaan liittyy kuitenkin merkittäviä rajoituksia, jotka edellyttävät lääkkeen fysikaalis-kemiallisten ja farmakologisten ominaisuuksien, mahdollisen keskushermostoon kohdistuvan toksisuuden sekä käytettävän annoksen ja annosteluvälineiden huolellista harkintaa. Tätä aihetta koskevan katsauksen suorittamisen jälkeen tehty lopullinen arviointi osoittaa, että eri eläinlajien ja ihmisten nenän anatomiassa ja fysiologiassa on huomattavia eroja, mikä tekee suoran korrelaation saamisen niiden välille hyvin vaikeaksi. Tieteellisissä aikakauslehdissä julkaistut kokeelliset tiedot tukevat sitä, että erilaisilla formulaatiomenetelmillä, joissa käytetään mukoadhesiivisia yhdisteitä, imeytymistä parantavia aineita ja erikoisreagensseja, voidaan tehostaa lääkkeen toimittamista aivoihin nenän kautta. Tarvitaan lisäkokeita, jotta saadaan luotua vankka korrelaatio tutkittavan yhdisteen ominaisuuksien, nenäontelon fysiologian ja sellaisten erikoistuneiden lääkkeenantotekniikoiden vaikutuksen välille, joiden tiedetään vaikuttavan lääkkeen toimittamiseen aivoihin nenän kautta.

JOHDANTO & TAUSTAA

Lääkkeitä toimitetaan systeemiseen verenkiertoon useita reittejä, kuten suun kautta, parenteraalisesti (laskimonsisäisesti, lihaksensisäisesti), ja useimmissa tapauksissa näillä reiteillä annetut lääkkeet kohtaavat happaman tai entsymaattisen hajoamisen, ja ne voivat kokea liiallisen ensikierron vaikutuksen (maksametabolian) antamisen jälkeen. Näiden tekijöiden vuoksi tehokkaat lääkeannokset eivät joskus pääse systeemiseen verenkiertoon, mikä johtaa tehottomaan hoitoon. Siksi on tutkittava joko vaihtoehtoisia reittejä tai erikoistuneita annostelutekniikoita, jotka voivat johtaa parempiin ja tehokkaampiin lääkkeiden annosteluvaihtoehtoihin. Nenän kautta tapahtuva lääkkeenantoreitti on yksi tällainen vaihtoehtoinen reitti, joka tarjoaa pääsyn hyvin verisuonitettuun limakalvoon, jota voidaan hyödyntää mielenkiintoisena paikallisena lääkkeenantopaikkana paikalliseen lääkkeenantoon, systeemiseen lääkkeenantoon ja kohdennettuun lääkkeenantoon (keskushermostoon).

Nenän alue on anatomialtaan ja fysiologialtaan sellainen, että se voi tarjota suoran väylän keskushermostoon, mikä johtaa korkeampiin lääkeainekonsentraatioihin aivojen eri alueille. Tämän alueen lisähyötynä on, että se tarjoaa sekä solunsisäisiä että solunulkoisia lääkkeen kuljetusreittejä keskushermostoon. Jotta tietty lääke pääsee kulkeutumaan jommankumman näistä kahdesta reitistä, se on riippuvainen myös muista tekijöistä, jotka liittyvät lääkkeen fysikaalis-kemiallisiin ominaisuuksiin ja erityisiin reseptoreihin, joita hajuaistin neuroneissa on.

Topikaalisten dekongestanttien tai tulehduskipulääkkeiden nenäsovellukset ovat suosituimpia topikaalisia nenän kautta tapahtuvia lääkeannoksia. Joidenkin yhdisteiden osalta lääkkeiden toimittaminen nenän kautta tarjoaa suoran pääsyn systeemiseen imeytymiseen. Lääkkeen imeytymistä nenäontelon kautta voidaan kuvata lääkkeen diffuusiona systeemiseen verenkiertoon nenän limakalvon kautta. Limakalvon kautta tapahtuva imeytyminen nenäontelon kautta tapahtuu yleensä seuraavien vaiheiden jälkeen: lääkeaineen vapautuminen, penetraatio (tunkeutuminen kerrokseen), permeaatio (kerrokseen siirtyminen) ja imeytyminen (imeytyminen verisuonistoon). Jos oletetaan, että ihmisellä on hajureitti aivoihin, on vielä tutkittava ja ymmärrettävä, missä määrin se vaikuttaa nenän kautta annosteltujen lääkkeiden keskushermostollista saatavuutta.

NENÄN ANATOMIA

Nenän väliseinä jakaa ihmisen nenän kahteen yhtä suureen symmetriseen puolikkaaseen. Nenäontelon takaosaa kutsutaan nenänieluksi, ja kumpikin symmetrinen puolikas avautuu ympäristöön. Nenäontelon molemmat puoliskot koostuvat seuraavista neljästä alueesta:1,2

Nenäontelo: ei ole kovin voimakkaasti verisuonitettu, ja lääkkeiden läpäisevyys tämän alueen kautta on hyvin heikko.

Eteläontelo: verisuonitus tässä nenäontelon osassa on vähäistä, minkä seurauksena lääkkeiden läpäisevyys on kohtalainen.

Respiratorinen alue: Nenäontelon tämä osa on hyvin vaskularisoitunut, minkä vuoksi lääkkeiden läpäisevyys tämän alueen kautta on hyvä.

Olfactory Region: on hyvin vaskularisoitunut, mikä johtaa suureen lääkkeen läpäisevyyteen. Tämän alueen on myös raportoitu olevan potentiaalinen paikka lääkkeiden kulkeutumiselle nenästä aivoihin.

LÄÄKKEIDEN KULKEUTUMISEN RAJOITTAJAT NENÄSTÄ AIVOIHIN

LÄÄKKEEN FYSIKAALIS-KEMIALLISET OMINAISUUDET

Lääkkeen molekyylipaino, lipofiliteetti ja dissosiaatioaste ovat lääkeaineen ensisijaisia ominaisuuksia, jotka sanelevat sen, millä vauhdilla ja missä laajuudessa lääkeaineet kulkeutuvat nenän limakalvolta aivoihimme.

Suhteellisen molekyylipainon osalta on tehty tutkimuksia, joissa tutkittiin molekyylipainon vaikutusta, ja havaittiin, että nenän kautta annostellun lääkkeen molekyylipainon kasvaessa lääkkeen pitoisuus aivoissa pieneni. Eri molekyylipainoisia fluoresenssimerkittyjä dekstraaneja FD4 (4400 Da), FD20 (18900 Da) ja FD40 (40500 Da) annettiin nenän kautta ja laskimoon. Aivo-selkäydinnesteen lääkeainepitoisuudet arvioitiin iv:n antamisen jälkeen, ja todettiin, että aivo-selkäydinnesteessä ei havaittu fluoresoivasti leimattuja dekstraaneja. Vaikka FD4-, FD20- ja FD40-molekyylejä havaittiin CSF:ssä nasaalisen annostelun jälkeen, pitoisuudet pienenivät dekstraanien molekyylipainon kasvaessa. Useimmat pienimolekyylipainoiset (<400 Da) lääkemolekyylit imeytyvät helposti, ja ne ovat hyviä ehdokkaita kulkeutumaan aivoihin nenän limakalvon kautta.3 Molekyylipainoltaan yli 1000 Da:n molekyylipainoiset molekyylit imeytyvät huonosti aivoihin nenän limakalvon kautta. Suurten molekyylien, kuten peptidien ja proteiinien, kyky imeytyä nenäontelon kautta on myös arvioitu.3

Lipofiilisuuden osalta lipofiilisten lääkkeiden tiedetään imeytyvän hyvin nenän limakalvon kautta. Nenän epiteelin tiedetään käyttäytyvän lipidiseulana, jonka ansiosta lipofiiliset lääkkeet läpäisevät nenän limakalvon. On myös havaittu, että lääkeaineen öljy-vesijakaumakertoimen ja imeytymisnopeusvakion välillä on lineaarinen korrelaatio.4 Lipofiilisiä lääkeaineita, kuten sulfonamideja, on testattu eläinmalleissa, joissa lääkeaineen konsentraatio aivoselkäydinnesteessä on noussut suoran nenästä aivoihin suuntautuvan kulkeutumisen seurauksena nenän antamisen jälkeen. Lipofiiliset lääkeaineet, kuten alprenololi ja propranololi, imeytyivät hyvin nenän limakalvolta verrattuna hydrofiiliseen lääkeaineeseen metoprololiin.5

Dissosiaatioasteen osalta lääkeaineen pitoisuus CF:ssä on kääntäen verrannollinen dissosiaatioasteeseen. Siksi on tärkeää ymmärtää, että nenän kautta annosteltavan lääkkeen ionisoitumisaste voi vaikuttaa lääkkeen kykyyn imeytyä nenän limakalvolla ja sen pitoisuuksiin CSF:ssä. Diltiatseemihydrokloridia ja parasetamolia on käytetty mallilääkkeinä tutkittaessa lääkkeen fysiokemiallisia ominaisuuksia suhteessa nenän kautta tapahtuvaan imeytymiseen. Tämän tutkimuksen tuloksissa todettiin, että jakautumiskertoimen ja nasaalisen imeytymisvakion välillä on kvantitatiivinen suhde.4

Lääkkeen pitoisuus, annos & Annostelutilavuus

Lääkkeen pitoisuus, annos ja annostellun annoksen tilavuus ovat kaikki tärkeitä tekijöitä, jotka voivat vaikuttaa nasaaliseen lääkeaineen annosteluun aivoihin. Nenän kautta tapahtuva lääkkeen imeytyminen lisääntyy, kun lääkkeen pitoisuus kasvaa antopaikassa. Tämä ilmiö on selvempi lääkkeillä, jotka imeytyvät passiivisen diffuusion avulla ensisijaisena lääkkeen imeytymismekanismina. Suurina määrinä annetut korkeammat lääkeainepitoisuudet voivat vaikuttaa kielteisesti lääkkeen imeytymiseen paikallisten haittavaikutusten vuoksi ja joissakin tapauksissa johtaa nenän limakalvojen vaurioitumiseen. Tämän vuoksi on tärkeää ymmärtää, että nenäontelon kapasiteetti on rajallinen, ja siksi nenän kautta annosteltavan annoksen on oltava suhteellisen pieni (25-200 μl).6

Mucociliary Clearance

Yksi nenäontelon tärkeistä tehtävistä on pölyn, allergeenien ja bakteerien poistaminen osana normaalia fysiologista toimintaa. Jotta lääkkeet säilyttäisivät halutun pitoisuuden ja annostelutilavuuden nenän kautta annostelun jälkeen niin, että terapeuttinen annos voi imeytyä, on tärkeää, että lääkkeillä on pitkä viipymäaika nenäontelossa. Lääkeaineen laskeutuminen nenän limakalvoille voidaan saavuttaa erilaisilla formulaatiomenetelmillä ja pitämällä nasaalivalmisteen pH-arvo alueella pH 4,5-6,5.7 Erilaisia annostelumuotoja on käytetty pidentämään viipymisaikaa nenäontelossa. Näihin kuuluvat gelatiini, emulsiot, voiteet, liposomit, mikropallot ja ioninvaihtohartsimenetelmillä valmistetut nanohiukkaset. Bioadhesiivisia valmisteita, tärkkelysmikropalloja ja kitosaanipohjaisia formulaatioita on tutkittu laajasti, mikä johti parempiin bioadhesiivisiin ominaisuuksiin ja pidempään viipymäaikaan nenän epiteelin pinnalla.8,9

entsymaattisen aktiivisuuden läsnäolo

Ensyymien läsnäolo nenäontelossa voi muodostaa entsyymiesteen, jonka tiedetään vaikuttavan lääkeaineen pysyvyyteen nenäontelossa. Proteiinit ja peptidit ovat alttiita hajoamaan proteaasien ja amino-peptidaasien vaikutuksesta nenäontelossa. Vaikka se ei ole täsmälleen samanlainen kuin ensikierron vaikutus, jonka lääkkeet kokevat oraalisen annostelun jälkeen, entsymaattinen aktiivisuus nenäontelossa voi johtaa terapeuttisten vaikutusten heikkenemiseen. P450-entsyymien esiintyminen on paljon suurempaa nenän limakalvolla verrattuna hengitysteiden limakalvoon.10

Eroja eläinlajeissa

Nenän limakalvo ja sen fysiologia on hyvin erilainen eri eläinlajeissa. Hajun limakalvon pinta-ala vaihtelee eri eläimillä. Rotteja ja hiiriä on käytetty laajalti koe-eläiminä. Rotilla hajukalvon alue on yli 50 prosenttia koko nenäontelon pinta-alasta verrattuna ihmisiin, joilla hajukalvon alue on vain 3-5 prosenttia koko nenäontelosta. Siksi on erittäin tärkeää ottaa huomioon anatomiset ja histologiset erot (taulukko 1), kun eläinkokeista saatuja tuloksia ekstrapoloidaan ihmisiin.11-13

SUOSITUKSET LÄÄKKEIDEN KULJETTAMISEN RAJOITUSTEN YLITTÄMISEKSI NENÄSTÄ AIVOIHIN

Lääkkeiden nenästä aivoihin kulkeutumisen esteiden ylittämiseksi nenän kautta nenämenetelmää pitkin on arvioitu eläinmalleissa useita uudenlaisia lähestymistapoja. Ponnistelut on keskitetty nenän limakalvon viipymäajan pidentämiseen ja lääkkeen fysikaalis-kemiallisten ominaisuuksien muokkaamiseen käyttämällä funktionaalisia apuaineita ja innovatiivisia lääkeannostelutekniikoita. Muutamia esimerkkejä näistä innovatiivisista teknologioista ovat mm. mukoadhesiivisten polymeerien, imeytymistä parantavien aineiden ja lääkkeenantolaitteiden yhdistelmä, jonka tarkoituksena on lääkkeen tarkka annostelu nenäontelossa.

Lääkkeen lähestymistapa

Kuten aiemmin on käsitelty, lääkkeiden fysikaalis-kemialliset ominaisuudet, kuten molekyylipaino ja lipofiliteetti, ovat kriittisiä parametreja, jotka vaikuttavat eniten lääkkeen kulkeutumiseen aivoihin nenän epiteelin kautta. Aihiolääkestrategia voi auttaa muokkaamaan näitä ominaisuuksia siten, että lääkkeen imeytymisnopeus ja -laajuus lisääntyvät nenäontelossa. Kokeelliset tutkimukset sekä in vivo että ex vivo ovat osoittaneet, että lääkeaineen nopea ja täydellinen imeytyminen voi johtua testattavan yhdisteen lipofiilisyydestä ja pienemmästä molekyylipainosta. Useita vesiliukoisia Ldopa-alkyyliesterin aihiolääkkeitä annettiin rotille nenän kautta, ja havaittiin, että Ldopa-butyyliesterin aihiolääkkeen konsentraatio oli rottien keskushermostossa huomattavasti korkeampi kuin kantalääkkeen.14 Vaikka tämä lähestymistapa on osoittautunut toimivaksi monien pienten molekyylien kohdalla, tämä strategia aiheuttaa haasteita suurille molekyyleille, kuten proteiineille ja muille biologisille tuotteille. Proteiinien lipofilian lisääminen on ollut vaikeaa, sillä se voi vaikuttaa merkittävästi proteiinin avaruudelliseen rakenteeseen, mikä johtaa biologisen aktiivisuuden heikkenemiseen.14

Innovatiivinen formulaatiomenetelmä

Lääkkeen korkean pitoisuuden säilyttäminen passiivista diffuusiota varten nenän epiteelissä on tärkeää, ja tämän saavuttamiseksi on optimoitava lääkkeen tarkka laskeutuminen ja pidennetty viipymäaika. On olemassa useita nasaalisia formulaatioita ja laitteita, jotka on suunniteltu näiden haasteiden voittamiseksi. Koejärjestely, jossa N-syklopentyyliadenosiini (CPA) formuloitiin mannitoli-lecitiini- ja kitosaanihydrokloridimikrohiukkasten kanssa ja annosteltiin rotille nenän kautta, osoitti, että rottien keskushermostossa oli suurempi määrä CPA:ta kuin vapaassa CPA:ssa. Kitosaanihydrokloridimuodostelma johti 10-kertaisesti suurempaan CPA:n määrään CSF:ssä verrattuna mannitollecithin-mikrohiukkasformulaatioon.16

Imeytymistä parantavat aineet & Entsyymi-inhibiittorit

Lääkkeet, jotka ovat luonteeltaan erittäin lipofiilejä ja joilla on myös hyvin pieni molekyylipaino, eivät välttämättä tarvitse erikoistunutta formulointimenetelmää, mukaan lukien imeytymistä parantavien aineosien käyttö. Imeytymistä parantavia aineita voidaan käyttää tapauksissa, joissa lääkkeellä on huono kalvojen läpäisevyys, sen molekyylikoko on suuri ja se on altis aminopeptidien entsymaattiselle hajoamiselle.17,19,20 Imeytymistä parantavia aineita käyttäen formuloidut lääkeaineet voivat antaa seuraavat ominaisuudet, jotka lisäävät lääkeaineen biologista hyötyosuutta nenän kautta annostelun jälkeen:

– Parantaa lääkkeen liukoisuutta

– Vähentää liman pintajännitystä

– Vähentää entsyymiaktiivisuutta, joka saattaa pitää lääkkeen stabiilissa muodossa

Nenään annosteltavat lääkkeenjakelulaitteet

Lääkkeenjakelulaitteilla on todettu olevan tärkeä merkitys sen varmistamisessa, että koko lääke saadaan toimitettua kohdekohtaan nenäontelossa. Lääkettä on vaikea toimittaa täsmällisesti ihmisen nenäontelon hajualueelle, koska tämä alue sijaitsee korkealla nenäontelossa, ylempien nielurisojen yläpuolella. Tämä alue altistuu hyvin pienelle määrälle ilmaa, joka tunkeutuu nenäonteloon, ja se voi johtaa siihen, että lääkkeen annokset pääsevät pienemmiksi hajualueelle.

YHTEENVETO

Lääkkeiden antaminen nenän kautta on luultavasti yksi ei-invasiivisimmista menetelmistä BBB:n ohittamiseksi keskushermoston häiriöihin kohdennettujen lääkkeiden toimittamiseksi. Tällä lääkeannostelualueella julkaistujen kliinisten kokeiden tarkastelun jälkeen on ilmeistä, että formulaation suunnittelu, lääkkeen fysikaalis-kemiallisten ominaisuuksien muuttaminen, imeytymistä parantavien aineiden ja mukoadhesiivisten polymeerien lisääminen johti lääkkeiden suurempaan biologiseen hyötyosuuteen eläinmalleissa nenän kautta verrattuna saman lääkkeen parenteraaliseen antoon. Kuvassa 1 on esitetty ihanteellisten parametrien yhdistelmä, joka maksimoi lääkkeen kulkeutumisen nenästä aivoihin.

Koska eläinmalleilla tehtävien tutkimusten perimmäisenä tavoitteena on kerätä tietoja ja parametreja, jotka voidaan siirtää tutkimuksiin ihmisillä, mielekkäiden korrelaatioiden luomisessa on edelleen puutteita. Eläinten nenän ja ihmisen nenän anatomian ja fysiologian erot ovat hyvin merkittäviä ja vaikeuttavat tutkimusten tulosten korrelointia. Lisäksi nenän kautta annettujen annosmäärien ja eläinlajien keskushermostossa biologisesti käytettävissä olevien annosmäärien välillä ei ole korrelaatiota. Tämä johtuu siitä, että eläinmalleilla tehdyissä kliinisissä tutkimuksissa käytetään suuria annosmääriä, eivätkä nämä annokset ole käytännössä mahdollisia ihmiselle annosteltaessa.

LÄHTEET

Tekijä haluaa kiittää tohtoreita Pankaj Desai, William Siebel ja Giovanni Pauletti James L Winkle College of Pharmacy, University of Cincinnati, heidän ohjauksestaan ja tuestaan.

1. Temsamani J. Lääkkeiden toimittaminen aivoihin – veriaivoesteen voittaminen. Eur Biopharm Rev syksy. 2002:72-75.

2. Schwartz MW, Sipols A, Kahn SE, Lattemann DF, et al. Kinetics and specificity of insulin uptake from plasma intocerebrospinal fluid. Am J Physiol. 1990:259:E378-E383.

3. Djupesland PG, Skretting A. Nasaalinen laskeutuminen ja ihmisellä: kaksisuuntaisen jauhelaitteen ja perinteisen nestesumutuspumpun vertailu. J Aerosol Med Pulm Drug Del. 2009;25:280-289.

4. Sakane T, Akizuki M, Yamashita S, et al. Lääkkeen kulkeutuminen aivo-selkäydinnesteeseen suoraan nenäontelosta: suhde lääkkeen lipofiliteettiin. Chem Pharm Bull. 1991;39:2456-2485.

5. Jiang XG, Lu X, Cui JB, et al. Studies on octanol-water partition coefficient and nasal drug absorption. Acta Pharm Sin. 1997;32:458-460.

6. Ross TM, Martinez PM, Renner JC, et al. Interferoni beetan intranasaalinen anto ohittaa veriaivoesteen ja kohdistuu keskushermostoon ja kaulan imusolmukkeisiin: ei-invasiivinen hoitostrategia multippeliskleroosiin. J Neuroimmunol. 2004;151:66-77.

7. Arora P, Sharma S, Garg S. Permeability issues in nasal drug delivery. Drug Discov Today. 2002;7:967-975.

8. Illum L. Nenään annosteltavat nikotiinia sisältävät lääkeainevalmisteet. 1999;US5935604.

9. Pavis H, Wicock A, Edgecombe J, et al. Pilottitutkimus nasaalisesta morfiinikiitosaanista läpimurtokivun lievittämiseksi syöpäpotilailla. J Pain Symptom Manage. 2002;24:598-602.

10. Vyas TK, Shahiwala A, Marathe S, Misra A. Intranasaalinen lääkeannostelu aivoihin kohdistamiseksi. Curr Drug Deliv. 2005;2:165-175.

11. Mygind N, Dahl R. Nenäonteloiden anatomia, fysiologia ja toiminta terveydessä ja sairaudessa. Adv Drug Deliv Rev.1998;29(1):3-12.

12. Lochhead JJ, Thorne RG. Biologisten lääkkeiden intranasaalinen toimittaminen keskushermostoon. Adv Drug Del Rev. 2012;64:614-628.

13. Gizurarson S. Anatomiset ja histologiset tekijät, jotka vaikuttavat lääkkeiden ja rokotteiden intranasaaliseen annosteluun. Curr Drug Deliv. 2012;9:566-582.

14. Dalpiaz A, et al. Zidovudiinin aihiolääkkeen imeytyminen aivoihin kiinteiden lipidimikropartikkelien nasaalisen annostelun jälkeen. Mol Pharm. 2014;11:1550-1561.

15. Zachary N, Warnken H, Smyth DC, et al. Formulation and device design to increase nose to brain drug delivery. J Drug Delivery Science & Tech. 2016;35:213-222.

16. Johnson NJ, Hanson LR, Frey WH II. Trigeminaaliset reitit toimittavat pienimolekyylipainoista lääkettä nenästä aivoihin ja orofacialisiin rakenteisiin. Mol. Pharm. 2010;7:884-893.

17. Wolf DA, et al. Lysosomaalinen entsyymi voi ohittaa veri-aivoesteen ja päästä keskushermostoon intranasaalisen annostelun jälkeen. Mol Genet Metab. 2012;106:131-134.

18. Costantino HR, Illum L, Brandt G, Johnson P, et al. Intranasaalinen anto: fysiokemialliset ja terapeuttiset näkökohdat. Int J Pharm. 2007;337:1-24.

19. Appu AP, Arun P, Krishnan JKS, et al. Aktiivisessa muodossa olevan kloramfenikoliasetyltransferaasin nopea intranasaalinen toimitus eri aivoalueille mallina entsyymihoidolle keskushermostossa. J Neurosci Methods. 2016;259:129-134.

20. Karasulu E, Yavas A, et al. Permeaatiotutkimukset ja lampaan nenän limakalvon histologinen tutkimus eri nasaalisten formulaatioiden antamisen jälkeen imeytymistä tehostavien aineiden kanssa tai ilman niitä. Drug Delivery Technology. 2008;15:219-225.

21. Djupesland PG. Nenään annosteltavat lääkkeenantolaitteet: ominaisuudet ja suorituskyky kliinisestä näkökulmasta – katsaus. Drug Deliv Transl Res. 2013;3:42-62.

22. Lisbeth I. Intranasaalinen toimitus keskushermostoon: Book Chapter

25. (Blood-Brain Barrier in Drug Discovery: Optimizing Brain Exposure of CNS Drugs and Minizing Brain Side Effects for Peripheral Drugs, First Edition. Toimittaneet Li Di ja Edward H. Kerns. © 2015 John Wiley & Sons, Inc. Published 2015 by John Wiley & Sons, Inc.).

Tämän numeron ja kaikki aiemmat numerot voit lukea verkossa osoitteessa www.drug-dev.com