Histidiiniä sisältävässä proteiinissa, HPr:ssä, aktiivisen paikan jäännös His(15) voidaan korvata aspartaatilla ja se voi silti toimia fosfoakseptorina ja fosfodonorina entsyymi I:llä ja entsyymi IIA:lla (glukoosi). Muut substituutiot, mukaan lukien kysteiini, glutamaatti, seriini, treoniini ja tyrosiini, eivät osoittaneet mitään aktiivisuutta. Entsyymi I:n K(m) His(15) –> Asp HPr:lle on 10-kertainen ja V(max) 1000-kertainen verrattuna villityypin HPr:ään. Asp(15):n fosforylaatio johti spontaaniin sisäiseen uudelleenjärjestelyyn, johon liittyi fosforyyliryhmän ja vesimolekyylin menetys, mikä vahvistettiin massaspektrometrisesti. Muodostuneella proteiinilajilla oli korkeampi pI kuin His(15) –> Asp HPr:llä, mikä voi johtua succinimidin tai isoimidin muodostumisesta. Eristetyn korkean pI:n omaavan muodon hydrolyysi antoi vain asparagiinihappoa jäännöksestä 15, eikä isoasparagiinihappoa havaittu. Tämä viittaa siihen, että muodostuu pikemminkin isoimidi kuin mokkinimidi. Ilman fosforylaatiota ei havaittu korkean pI:n muodon muodostumista, mikä osoittaa, että fosforylaatio katalysoi syklisoitumista. Asn(12):n mahdollinen osallistuminen sisäiseen syklisoitumiseen Asp(15):n kanssa poistettiin Asn(12) –> Ala-mutaatiolla His(15) –> AspHPr:ssä. Alaniinin, aspartaatin, seriinin ja treoniinin Asn(12)-korvaukset villityypin HPr:ssä viittasivat yleiseen vaatimukseen jäännöksistä, jotka kykenevät muodostamaan vetysidoksen His(15):n Nepsilon(2)-atomin kanssa, mutta vetysidoksen eliminoimisella on vain 4-kertainen vähennys k(cat)/K(m):ssä.
Organisaatioyhteys: 
Biokemian osasto, Saskatchewanin yliopisto, Saskatoon, Saskatchewan, Saskatchewan S7N 5E5, Kanada.
Peittäkää koko tiivistelmä.