Las líneas celulares de neuroblastoma se han utilizado ampliamente para examinar nuevos compuestos en busca de propiedades neurotóxicas y mecanismos asociados. Estas líneas celulares transformadas a menudo muestran características morfológicas, de desarrollo y de señalización que son sustancialmente diferentes del tipo celular parental. En consecuencia, la respuesta de las células de neuroblastoma a la exposición a las toxinas puede diferir de la de las neuronas. Por lo tanto, es esencial tener en cuenta las diferencias farmacológicas y funcionales entre las neuronas y las líneas celulares similares a las neuronas a la hora de interpretar los datos derivados de los ensayos basados en el neuroblastoma. Hemos comparado los efectos de varias neurotoxinas sobre la homeostasis del Ca2+ y la viabilidad celular en las neuronas del gránulo cerebeloso (CGN) y en una línea celular de neuroblastoma (Neuro-2a). Para explorar los mecanismos que subyacen a la sensibilidad diferencial de las neuronas intactas y las células de neuroblastoma a las neurotoxinas, también comparamos las células CGN y Neuro-2a en cuanto a la expresión de los canales de sodio activados por voltaje (VGSC) y los receptores de N-metil-D-aspartato (NMDAR). La potencia citotóxica en las neuronas fue varios órdenes de magnitud mayor para la ciguatoxina caribeña-1 (C-CTX-1) que para el domoato (Dom) o la brevetoxina-2 (PbTx-2). Además, la potencia citotóxica de la C-CTX-1 fue dos órdenes de magnitud mayor en las células CGN que en las Neuro-2a. Se comparó el efecto de C-CTX-1 y Dom en la homeostasis del calcio en neuronas cargadas con fluo-3. Dom causó una elevación del calcio intracelular (i) a concentraciones que eran paralelas a la relación concentración/respuesta para la citotoxicidad en CGN. Por el contrario, C-CTX-1 no elevó i dentro del rango de concentración dinámico para la muerte celular. La discordancia de las relaciones concentración/respuesta para la citotoxicidad inducida por C-CTX-1 y la elevación de i sugiere que la citotoxicidad aguda de C-CTX-1 puede implicar mecanismos distintos de la carga de Ca2+. La elevación de i inducida por C-CTX-1 en las neuronas dependía de la activación de NMDAR y del modo de funcionamiento inverso del intercambiador Na+/Ca2+. Estos datos demuestran que, aunque el C-CTX-1, el domoato y el PbTx-2 comparten la capacidad de producir neurotoxicidad y movilizar el calcio, sus respectivas dianas moleculares y mecanismos de neurotoxicidad difieren. Las células Neuro-2a que no fueron pretratadas con veratridina y ouabain fueron insensibles al C-CTX-1 y a los agonistas glutamatérgicos. La expresión de VGSC era 20 veces menor en las células Neuro-2a que en las CGN, mientras que los NMDAR no se expresaban en estas células de neuroblastoma. Por lo tanto, es probable que la mayor sensibilidad de las células CGN, en relación con las células Neuro-2a, a las neurotoxinas sea una consecuencia de las pronunciadas diferencias en la expresión de VGSC y NMDAR. Estos resultados subrayan la necesidad de tener precaución al interpretar los datos de citotoxicidad negativa derivados del uso de líneas celulares de neuroblastoma.

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