En el reciente artículo de Lin et al. (1), los autores demuestran los efectos protectores de la infusión esplénica de mitocondrias aisladas contra la lesión por isquemia/reperfusión hepática en un modelo de rata. Una de sus conclusiones es que las mitocondrias aisladas de los animales donantes mantuvieron un potencial de membrana intacto en los hígados de los animales receptores incluso a las 4 horas de la infusión, tal como se evaluó mediante la tinción Mito-Tracker Orange CMTMRos.
Los fluoróforos catiónicos como la rodamina 123 y el metiléster de tetrametilrhodamina (TMRM) se secuestran fácilmente en el espacio de la matriz de las mitocondrias polarizadas, y estas sondas se liberan una vez que las mitocondrias experimentan una pérdida de potencial de membrana. Los colorantes MitoTracker también son fluoróforos catiónicos que se acumulan electroforéticamente en las mitocondrias en respuesta al potencial de membrana mitocondrial altamente negativo. Sin embargo, a diferencia de la TMRM y la rodamina 123, los colorantes MitoTracker poseen un grupo clorometilo reactivo que forma un enlace covalente con los tioles de las proteínas y los péptidos, lo que atrapa los colorantes MitoTracker dentro de las mitocondrias. Así, las mitocondrias retienen los colorantes MitoTracker como el MitoTracker Orange CMTMRos después de la pérdida de su potencial de membrana (2;3). Por lo tanto, la retención de la tinción MitoTracker no significa que las mitocondrias infundidas permanezcan polarizadas, como se concluyó en (1). De hecho, una alta concentración de Ca2+ libre en suero, que es 10.000 veces mayor que el Ca2+ libre citosólico, conducirá rápidamente a una sobrecarga de Ca2+ mitocondrial, a la inhibición respiratoria y a la disfunción mitocondrial desde el inicio de la transición de permeabilidad mitocondrial con pérdida del potencial de membrana mitocondrial (4;5).