2 mikronový plazmid Saccharomyces cerevisiae je relativně malý sobecký DNA element s více kopiemi, který se nachází v jádře kvasinky v počtu 40-60 kopií na haploidní buňku. Plasmid je schopen přetrvávat v hostitelské populaci se stabilitou téměř podobnou chromozomu pomocí systému rozdělení a systému kontroly počtu kopií. První část tohoto článku popisuje vlastnosti rozdělovacího systému, který se skládá ze dvou plazmidem kódovaných proteinů Rep1 a Rep2 a rozdělovacího lokusu STB. Současné důkazy podporují model, v němž systém Rep-STB spojuje segregaci plazmidů se segregací chromozomů tím, že podporuje fyzické spojení molekul plazmidů s chromozomy. Ve druhé části se pozornost soustředí na systém Flp specifický pro místa rekombinace, který je umístěn v plazmidu a který hraje rozhodující roli při udržování stabilního počtu kopií plazmidu. Systém Flp koriguje jakýkoli pokles populace plazmidu tím, že podporuje amplifikaci plazmidu prostřednictvím mechanismu replikace indukované rekombinací. Vhodnou amplifikaci plazmidu, aniž by došlo ke skokovému zvýšení počtu kopií, zajišťuje pozitivní a negativní regulace exprese genu FLP pomocí proteinů kódovaných plazmidem a kontrola hladiny/aktivity Flp prostřednictvím posttranslační modifikace Flp buněčným sumoylačním systémem. Systém Flp byl úspěšně využit k pochopení mechanismů místně specifické rekombinace a k provedení cílených genetických změn pro řešení základních problémů v biologii a k dosažení cílů bioinženýrství. Obzvláště zajímavé a možná méně známé a nedoceněné je použití Flp při odhalování jedinečných topologií DNA, které jsou nutné k propůjčení funkční způsobilosti DNA-proteinovým strojům.

Articles

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.