V nedávném článku Lina a kol. (1) autoři prokázali ochranné účinky infuze izolovaných mitochondrií do sleziny proti poškození jaterní ischemií/reperfuzí na modelu potkana. Jedním z jejich závěrů je, že izolované mitochondrie od dárcovských zvířat si udržely neporušený membránový potenciál v játrech příjemců i 4 hodiny po infuzi, jak bylo hodnoceno pomocí barvení Mito-Tracker Orange CMTMRos.

Kationtové fluorofory jako rhodamin 123 a tetrametylrhodamin metylester (TMRM) jsou snadno sekvestrovány v matrixovém prostoru polarizovaných mitochondrií a tyto sondy se uvolňují, jakmile mitochondrie zaznamenají ztrátu membránového potenciálu. Barviva MitoTracker jsou rovněž kationtové fluorofory, které se elektroforeticky hromadí v mitochondriích v reakci na vysoce negativní membránový potenciál mitochondrií. Na rozdíl od TMRM a rhodaminu 123 však mají barviva MitoTracker reaktivní chloromethylovou skupinu, která vytváří kovalentní vazbu s thioly na proteinech a peptidech, což zachycuje barviva MitoTracker uvnitř mitochondrií. Mitochondrie si tak po ztrátě membránového potenciálu uchovávají barviva MitoTracker, jako je MitoTracker Orange CMTMRos (2;3). Zachování barvení MitoTracker tedy neznamená, že infundované mitochondrie zůstávají polarizované, jak bylo konstatováno v (1). Vysoká koncentrace volného Ca2+ v séru, která je 10 000krát vyšší než cytosolický volný Ca2+, totiž rychle povede k přetížení mitochondrií Ca2+, inhibici dýchání a mitochondriální dysfunkci od nástupu přechodu mitochondriální permeability se ztrátou mitochondriálního membránového potenciálu (4;5).

.

Articles

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.